朱红娟
- 作品数：12 被引量：78H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院果树研究所更多>>
- 发文基金：国家葡萄产业技术体系建设项目国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 苹果脱毒技术研究进展被引量：4
- 2014年
- 苹果(Malus pumila Mill.)普遍感染病毒。目前,培育无病毒原种母本树,建立用于繁殖接穗和营养系砧木的母本园,栽植无病毒苗木,是防治病毒病的根本措施。本文针对常见的4种苹果病毒及1种类病毒,综述了茎尖培养、热处理、化学处理、微茎尖嫁接以及低温处理脱除苹果病毒方法的研究进展,分析了不同方法的应用效果,及所适合脱除的病毒种类,以期为我国苹果病毒脱除技术研究提供参考信息。
- 胡国君董雅凤张尊平范旭东任芳朱红娟
- 关键词：苹果病毒脱除
- 葡萄A病毒外壳蛋白原核表达及抗血清制备被引量：3
- 2014年
- 葡萄A病毒（Grapevine virus A，GVA）为线性病毒科（Flexiviridae）葡萄病毒属（Vitivirus）的代表种，是葡萄皱木复合病（rugose wood complex disease）的重要病原之一，可引起葡萄嫁接成活率下降、春季萌芽延迟、生长减弱甚至衰退死亡等危害。GVA为线状单链RNA病毒，基因组共编码5个开放阅读框（ORF1-5），其中ORF4 编码外壳蛋白（coat protein， CP），是病毒粒子包裹和系统移动所必需的功能蛋白。GVA自然寄主为葡萄，机械摩擦可侵染本氏烟等草本寄主，由于嫁接和无性繁殖材料调运等因素造成该病毒远距离传播，目前在世界多个国家和地区均有发生。
- 任芳董雅凤张尊平范旭东胡国君朱红娟
- 关键词：抗血清制备原核表达嫁接成活率VIRUSRNA病毒
- 葡萄病毒分子检测技术研究进展被引量：16
- 2014年
- 简述了葡萄病毒RT-PCR、分子杂交、基因芯片、RT-LAMP以及高通量测序等分子检测技术的原理和特点,综述了近年来葡萄病毒分子检测所取得的进展,展望了今后研究的主要方向。
- 范旭东董雅凤张尊平任芳胡国君朱红娟
- 关键词：葡萄病毒分子检测
- 我国部分地区沙地葡萄茎痘相关病毒分离物外壳蛋白序列变异分析被引量：7
- 2014年
- 为明确我国葡萄中沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)的感染情况及病毒外壳蛋白(coat protein,CP)基因的变异特点,从而为其致病性、病害的防治以及抗病毒基因工程等研究提供依据,本研究对采自我国16个省市自治区的65个葡萄品种305株葡萄样品中的GRSPaV进行RT-PCR检测,根据地区与品种差异选取了24个阳性样品进行cp基因克隆与测序分析,并对不同RNA提取方法进行了比较。结果显示,114株样品被GRSPaV侵染,平均带毒株率为37.4%;分离物间及同一分离物不同克隆间的序列差异较大,从24个分离物克隆获得的37条cp基因序列与来源于不同国家的12个GRSPaV分离物的核苷酸序列同源性为80.5%~99.7%,氨基酸序列同源性为88.8%~100%;各个分离物的遗传距离无明显地域差异;SiO2吸附法比SDS法和CTAB法更适宜葡萄样品RNA的提取。
- 朱红娟胡国君范旭东张尊平任芳董雅凤
- 关键词：RT-PCR检测
- 葡萄抗病毒转基因研究进展被引量：5
- 2013年
- 迄今已发现63种病毒侵染葡萄。利用转基因技术培育抗病品种是防控葡萄病毒病的重要手段之一。对葡萄再生体系和遗传转化方法及影响因素、葡萄抗病毒转基因研究进展,以及转基因植株检测、抗性评价和抗性机理等进行了综述,并对今后研究方向进行了讨论和展望。
- 任芳董雅凤张尊平范旭东胡国君朱红娟
- 关键词：葡萄抗病毒转基因
- 葡萄试管苗热处理脱毒技术研究被引量：9
- 2013年
- 为加快培育葡萄优良品种无病毒苗木,提高脱毒效率,开展了葡萄试管苗热处理脱毒技术研究。将携带葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)、葡萄卷叶相关病毒-1(GLRaV-1)和葡萄卷叶相关病毒-2(GLRaV-2)的8个葡萄品种试管苗进行恒温热处理,对分离成活的62个茎尖进行RT-PCR和ELISA检测。结果显示,62个茎尖中,29个茎尖脱除了上述5种病毒,葡萄卷叶相关病毒-1、葡萄斑点病毒、葡萄扇叶病毒、葡萄卷叶相关病毒-2和沙地葡萄茎痘病毒的脱毒率分别为81.8%、80.0%、78.1%、75.0%和61.5%。采用试管苗热处理结合茎尖培养方法可获得良好的脱毒效果,适用于葡萄无病毒原种母本树的培育。
- 张尊平范旭东胡国君任芳朱红娟董雅凤
- 关键词：葡萄葡萄病毒脱毒茎尖培养
- 沙地葡萄茎痘相关病毒的RT-LAMP检测方法被引量：9
- 2013年
- 本研究建立了一种用于沙地葡萄茎痘相关病毒(Grapevine rupestris stem pitting-associated virus,GRSPaV)的RT-LAMP检测方法。以GRSPaV的RdRp基因序列(GenBank登录号:GQ478314)为靶序列,设计3组RT-LAMP引物,从中筛选出1组有效引物,并确定了适宜的反应温度和反应时间。对RT-LAMP产物进行HhaⅠ酶切,酶切片段与理论片段大小一致,证明了RT-LAMP产物的特异性。RT-LAMP方法能够检测出GRSPaV的RNA最大稀释倍数为10-4,与RT-PCR方法相比更为灵敏。田间葡萄样品RT-LAMP检测结果与已知样品带毒情况相同,表明RT-LAMP检测GRSPaV具有较好的可靠性。在RT-LAMP反应产物中加入染料SYBR GreenⅠ(×1000)可直接观察反应结果。建立的GRSPaV RT-LAMP检测方法具有简便、快速、灵敏、可视化等特点,尤其适合基层使用,具有良好的应用前景。
- 范旭东董雅凤张尊平任芳胡国君朱红娟
- 关键词：反转录聚合酶链式反应
- 沙地葡萄茎痘相关病毒PCR检测及基因变异分析
- 葡萄皱木复合病(Rugose wood complex disease)是一种发生普遍、为害严重的葡萄病毒病.依其在指示植物上的症状表现分为葡萄栓皮病、Kober 5BB茎沟病、LN33茎沟病和沙地葡萄茎痘病等四种主要类...
- 朱红娟胡国君范旭东张尊平任芳董雅凤
- 关键词：PCR检测基因变异
- 葡萄病毒脱除技术研究进展被引量：18
- 2013年
- 葡萄是我国的一种重要果树,在长期的无性繁殖过程中受扇叶病、卷叶病、皱木复合病和斑点病等多种病毒病的危害,给葡萄的产量和品质带来了严重的影响。在生产上,无病毒的繁殖材料是控制病毒病的主要途径。总结了茎尖培养、热处理、化学处理、体细胞胚再生、电疗法和超低温脱毒等方法的脱病毒原理及在葡萄病毒脱除中的应用效果,分析了不同方法所适合脱除的病毒种类。通过对上述研究进展的综述,以期为我国葡萄病毒脱除技术研究提供参考信息。
- 胡国君董雅凤张尊平范旭东任芳朱红娟
- 关键词：葡萄病毒脱除
- 葡萄病毒E分子检测及基因序列分析被引量：21
- 2014年
- 皱木复合病（rugose wood complex disease）是一种发生普遍、危害严重的葡萄病毒病，该病与葡萄病毒属（Vitivirus）病毒的侵染密切相关，葡萄病毒E（Grapevine virus E，GVE）是葡萄病毒属的新成员。为明确我国GVE侵染状况以及不同分离物的基因变异情况，本研究针对GVE的MP和CP基因设计了两对引物，RT—PCR结果表明，两对引物均能从带毒样品中扩增到目的基因片段。采用上述引物检测了211株葡萄样品，GVE检出率为5．7％。对7个GVE分离物的外壳蛋白基因进行测序和系统进化树分析，结果显示，上述分离物克隆分别处于2个明显分化的组群（GroupI和GroupII）。研究测定了GVE中国分离物GFMG-1的全基因组序列，该分离物与Et本分离物TvAQ7核苷酸序列相似度高达98％。但与日本分离物TvP15、南非分离物SA94、美国分离物WAHH2及波兰分离物59PE核苷酸序列相似性仅为70％-75％。本研究为进一步明确我国GVE发生、分布及分子检测提供了依据。
- 范旭东董雅凤张尊平任芳胡国君朱红娟
- 关键词：分子检测
