曾敏慧 作品数:13 被引量:25 H指数:4 供职机构: 中山大学孙逸仙纪念医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 广东省科学事业费计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
辅助生殖后宫内合并宫颈妊娠出血患者1例病例报告及讨论 2022年 1主持人中山大学孙逸仙纪念医院普通妇科冯淑英副主任医师2病例汇报人中山大学孙逸仙纪念医院生殖内分泌专科曾敏慧主治医师3病例摘要患者,女,27岁,主因“体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)术后27 d,阴道出血1 d”于2020-04-22入院,患者2020-3-26于我院生殖中心行IVF-ET术,移植冷冻胚胎2枚,2020-04-21无明显诱因下出现阴道流血、量少、无腹痛,遂至当地医院就诊,超声检查提示:宫内早孕,胚胎存活;另一孕囊位于宫颈管,靠近宫颈外口,内见心管搏动。 曾敏慧 冯淑英 杨冬梓关键词:宫颈妊娠 辅助生殖 超声监测 负压吸宫 地中海贫血患者来源外周血及脐带血细胞诱导式多能干细胞的建系和造血分化 被引量:4 2015年 目的探讨地中海贫血(地贫)患者特异诱导式多能干细胞系(i PSCs)细胞模型的建立及造血分化能力。方法采集Hb H病引产胎儿(α地贫)的脐带血、双重杂合子β地贫输血患者(基因型为IVS-Ⅱ-654/CD17)外周血各1例,分离单核细胞后进行短期培养,核转染再程序化为i PSCs,检测i PSCs未分化状态和多能性标志物。i PSCs与OP9细胞共培养向造血干细胞诱导分化,进行吉姆萨染色检查和流式细胞术检测造血干细胞的分化结果。结果地贫患者i PSCs表达干细胞多能性标志物Oct4、SSEA4、Tra-1-60、Tra-1-81,碱式磷酸酶染色阳性,悬浮培养可以形成类球形拟胚体,畸胎瘤形成实验显示地贫患者i PSCs可分化为内、中、外胚层细胞。流式细胞术检测结果显示CD34+细胞分别为8.71%(α-i PSCs分化结果)和4.46%(β-i PSCs分化结果)。结论α、β地贫患者外周血与脐带血可再程序化为i PSCs,该细胞系具有多能分化特性,与OP9共培养能分化为造血干细胞。 曾敏慧 蒋满波 文艳飞 彭澄 张滨 蔡柳洪关键词:地中海贫血 造血分化 卵巢早衰患者来源的诱导多能干细胞的建系、鉴定及诱导分化 被引量:8 2016年 目的:建立和鉴定卵巢早衰(又称原发性卵巢功能不全,primary ovarian insufficiency,POI)患者来源的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs),研究其向原始生殖细胞分化的潜能。方法:将表达Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4和Lin28基因的p EB-C5和表达SV40 T抗原的p EB-Tg质粒转染POI患者的外周血单个核细胞,将其重编程为i PSCs并检测其干细胞多能性特性。添加转化生长因子β1(transfroming growth factor-β1,TGF-β1)和骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)后,应用real-time PCR和Western blot方法分别检测原始生殖细胞标志物的mRNA及蛋白表达水平。结果:通过碱性磷酸酶染色、细胞免疫荧光、拟胚体及畸胎瘤形成检测,证明了POI患者外周血来源的i PSCs可成功向3胚层细胞分化并保持多能性。添加TGF-β1和BMP4后,诱导组原始生殖细胞特异性标志物干细胞生长因子受体(stem cell growth factor receptor,c-Kit)、发育多能性相关蛋白3(developmental pluripotency-associated 3,STELLA/DPPA3)和DEAD盒多肽4(DEAD box polypeptide 4,VASA/DDX4)的mRNA水平明显升高(P<0.05),VASA/DDX4蛋白表达水平亦明显增加(P<0.05)。结论:POI患者外周血单个核细胞在体外可被成功诱导成无外源性基因整合的i PSCs,并且具有多能分化特性,添加TGF-β1和BMP4后可向原始生殖细胞分化。 文艳飞 蔡柳洪 何文 曾敏慧 蒋满波关键词:诱导多能干细胞 原始生殖细胞 纳米银避孕泡沫对阴道微生态的影响 被引量:5 2014年 目的研究纳米银避孕泡沫对阴道微生态的影响。方法采用用药前后自身对比的方法,对30例使用纳米银避孕泡沫的性活跃期妇女进行阴道分泌物检测。结果妇女使用纳米银避孕泡沫后阴道炎症反应明显改善,白细胞脂酶降低,差异有统计学意义(P<0.05);而阴道菌群密集度稍上升,差异有统计学意义(P<0.05);对阴道细菌的多样性和优势菌的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论纳米银避孕泡沫对阴道微生态无不良影响,并且具有一定的抗菌效果。 蔡柳洪 曾敏慧 张滨 林慧 蒋满波 文艳飞关键词:纳米银 阴道菌群 阴道微生态 不同促排卵方案对宫腔内人工授精周期的疗效影响 目的:宫腔内人工授精是治疗不孕的重要手段之一,不同促排卵方案对卵泡发育、妊娠率等都有影响.方法:将2009年5月到2014年1月在中山大学附属第三医院不育与性医学科进行第一周期宫腔内人工授精(IUI)共458周期,按是否... 曾敏慧 文艳飞 蒋满波 邢卫杰 陶欣 蔡柳洪利用荧光素酶报告基因在体观察移植的人胚胎干细胞的动向 2013年 目的利用慢病毒载体携带荧光素酶报告基因并转导人胚胎干细胞,以实现在体观察移植细胞的增殖情况。方法酶切pGL3 base质粒获得荧光素酶基因序列,酶切LTBR-GIP获得载体骨架,经过酶切产物热失活、平末端处理、CIP处理、胶纯化和连接,所构建慢病毒载体命名为ULIP,包括UBC启动子和IRES连接,能同时表达荧光素酶基因和Puromycin抗性基因。以ULIP转导人胚胎干细胞H9,并以Puromycin筛选稳定转导的细胞。随后移植于BALB/c小鼠和RAG-/-γC-/-小鼠,在Xenogen IVIS(r)50成像系统进行荧光信号检测。结果稳定转导ULIP或LTBR-GIP的H9移植到BALB/c小鼠,ULIP组3d后荧光信号明显减弱,5d后基本上不能检出。而移植到RAG-/-γC-/-小鼠后,ULIP组的荧光信号在第3天稍有下降,随后荧光信号逐渐增强。LTBR-GIP-H9在移植BALB/c小鼠和RAG-/-γC-/-小鼠后均未能检测到荧光信号。结论荧光素酶报告基因可以用于观察移植细胞在体内的动向,实现实时观察移植细胞的存活情况。 蔡柳洪 张滨 陈世钦 曾敏慧 陶欣关键词:荧光素酶报告基因 慢病毒载体 人胚胎干细胞 男性勃起功能障碍法医鉴定结果148例分析 目的:通过对男性勃起功能障碍法医鉴定案例的分析,探讨诊断勃起功能障碍时,全面考虑阴茎长度、勃起角度和硬度的重要性.方法:回顾性分析2009年1月到2013年5月间,中山大学附属第三医院不育与性医学科进行法医鉴定的男性勃起... 蒋满波 蔡柳洪 文艳飞 曾敏慧 张滨NDP基因变异携带合并未分化结缔组织病及血栓患者通过PGT-M成功助孕1例 2024年 目的总结Norrie病家系合并女方为未分化结缔组织病及血栓患者通过胚胎植入前单基因遗传学检测(preimplantation genetic testing for monogenic,PGT-M)助孕临床诊疗经验。方法报道通过生殖遗传、生殖医学、眼科、风湿内科及产科多学科诊疗,对1例NDP基因第2外显子杂合缺失合并未分化结缔组织病及血栓病的患者进行家系构建、促排取卵、胚胎检测、冻融胚胎移植、羊膜腔穿刺、孕期及围产期监测的临床经过。结果该患者成功妊娠并足月分娩1名健康女婴。结论通过对该夫妇进行多学科诊疗管理,1个周期的PGT-M助孕使患者顺利获得健康的后代,减轻患者的心理和生理负担。 曾敏慧 郑灵燕 欧阳能勇 李瑞歧 陈慧 王文军关键词:血栓 未分化结缔组织病 人工授精中不同促排卵方案比较 目的 比较不同促排卵方案在宫腔内人工授精应用的异同,为临床选择提供依据.对象及方法 中山大学附属第三医院不育与性医学科2009年5月到2014年1月进行第一周期宫腔内人工授精(IUI)患者中,促排监测(月经2-5天检测基... 曾敏慧 文艳飞 蒋满波 蔡柳洪关键词:促排卵方案 宫腔内人工授精 卵巢反应 地中海贫血“integration-free”诱导多能干细胞的建立及造血分化的研究 被引量:2 2015年 目的:建立无外源基因整合(integration-free)的地中海贫血患者特异诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSC),并研究其向造血前体细胞分化的可能性。方法:用核转染的方法将表达Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc和Lin28转录因子的质粒p EB-C5以及表达SV40大T抗原的质粒p EB-Tg导入引产巴氏水肿胎皮肤成纤维细胞中,将其重编程为i PSC后检测其向3个胚层细胞分化的特性。将i PSC细胞与小鼠OP9细胞共培养向造血前体细胞诱导分化,检测造血前体细胞特异性抗原。结果:成功建立了巴氏水肿胎皮肤成纤维细胞来源的α地中海贫血患者特异i PSC系,其具有向3个胚层分化的能力,与OP9细胞共培养9 d后可检测到造血前体细胞标记CD34的阳性率为18.7%,CD34和CD45双阳性为12.2%。结论:巴氏水肿胎皮肤成纤维细胞可成功诱导成"integration-free"i PSC,该细胞系具有向3个胚层分化的能力,与OP9共培养可向造血前体细胞分化。 蒋满波 曾敏慧 章钧 文艳飞 张滨 蔡柳洪关键词:地中海贫血 诱导多能干细胞 造血分化