张锋
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- Ad-VEGF-骨髓间充质干细胞移植在脑梗死治疗中的作用被引量：2
- 2013年
- 脑梗死以高致死率和致残率而备受关注,但目前为止,仍没有有效的治疗手段。近些年,携带血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的骨髓间充质干细胞移植疗法成为了热点。研究表明:携带VEGF的骨髓间充质干细胞可以向神经元样细胞定向诱导分化、刺激内源性神经干细胞的增殖、分泌神经营养因子和保护因子,从而促进脑梗死患者的感觉、认知和运动功能的恢复。本文就VEGF-MSCs在治疗脑梗死中的作用机制做以下综述。
- 张锋胡昌龙陈波李巧玉
- 关键词：骨髓间充质干细胞VEGF脑梗死神经保护血管再生
- 骨髓间充质干细胞对退变髓核细胞功能的逆转作用被引量：1
- 2014年
- 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)对退变髓核细胞(dNPCs)的营养修复作用。方法针刺抽吸法制备SD大鼠退变椎间盘动物模型,分离培养髓核细胞(NPCs)及BMSCs,并将BMSCs和dNPCs分别复合藻酸盐后等比例接种于transwell共培养系统上下室中进行体外非直接接触共培养作为实验组,单纯NPCs和dNPCs分别复合藻酸盐后作为阳性及阴性对照组。光镜下观察细胞生长情况,选取合适细胞复合藻酸盐在共培养体系中培养7 d后回收各组NPCs,对回收细胞的CollagenⅠ、Ⅱ和Aggrecan行Western blot及免疫荧光检测,RT-PCR检测CollagenⅡ、SOX9和Aggrecan的mRNA的表达情况。结果共培养7 d后,RT-PCR检测结果显示BMSCs+dNPCs组的CollagenⅡ、SOX9和Aggrecan的mRNA表达接近NPCs组,但明显高于dNPCs组(P均<0.05)。Western blot检测结果显示BMSCs+dNPCs组的CollagenⅡ和Aggrecan含量接近甚至超过NPCs组,但明显高于dNPCs组(P均<0.05);CollagenⅠ含量与NPCs组相近,但明显低于dNPCs组(P<0.05)。CollagenⅡ和Aggrecan免疫荧光染色结果显示,BMSCs+dNPCs组和dNPCs组胞质都被染成红色,在核周围着色较深,BMSCs+dNPCs组胞质着色范围及核周围深染范围明显大于dNPCs组。结论在Transwell非直接接触共培养条件下,BMSCs能够促进dNPCs外基质的表达,提示BMSCs能够在一定程度上逆转椎间盘dNPCs的功能。
- 胡浪李大鹏张志坚王晓光包卿张锋黄永辉
- 关键词：椎间盘退变骨髓间充质干细胞髓核细胞藻酸盐
- Gadd45g基因对垂体瘤AtT-20细胞的增殖、凋亡和自噬的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨生长阻滞及DNA损伤诱导基因45g(Gadd45g)过表达及靶向沉默对垂体瘤AtT-20细胞及小鼠原代星型胶质细胞的增殖、凋亡及自噬等影响。方法构建Gadd45g基因的CDS区序列克隆至真核表达质粒p3XFLAG-Gadd45g及其shRNA真核表达质粒pLKO.1-sh-Gadd45g,将p3XFLAG-Gadd45g转染至小鼠垂体瘤AtT-20细胞中。其shRNA真核表达质粒pLKO.1-purosh-Gadd45g进行慢病毒包装,病毒感染小鼠星形胶质细胞;Western blot检测FLAG-Gadd45g融合蛋白的表达及RT-PCR检测shRNA沉默效率,CCK-8检测细胞增殖活力,Western blot检测其对凋亡蛋白、自噬蛋白的影响。结果 Gadd45g及其特异性shRNA真核表达质粒构建成功。构建的p3XFLAGGadd45g质粒在垂体瘤AtT-20细胞中能够表达;Gadd45g shRNA具有沉默效率。在垂体瘤AtT-20细胞中过表达Gadd45g,可明显抑制细胞增殖,并能诱导Caspase-3表达,降低Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P<0.05)。与之相反,在原代培养的星形胶质细胞中,shRNA干扰Gadd45g表达,可促进细胞增殖,并降低Caspase-3表达,而增加Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P<0.05)。结论垂体瘤中Gadd45g的表达缺失可能使得垂体瘤AtT-20细胞凋亡受阻及自噬作用增强,从而促进垂体瘤的发生、发展。恢复垂体瘤细胞中Gadd45g的表达及抑制垂体瘤细胞自噬作用有望成为垂体瘤治疗的新方法。
- 胡昌龙杨勇陈波王景文张锋胡维葛璐龚爱华王安利李巧玉
- 关键词：垂体瘤
- 腺病毒转染血管内皮生长因子基因对感染大鼠骨髓间充质干细胞的影响
- 2014年
- 目的体外观察和检测腺病毒AdCMV转染血管内皮生长因子(VEGF)基因对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的影响。方法培养大鼠BMSCs,用AdCMV-增强型绿色荧光蛋白(eGFP)、AdCMV-VEGF感染大鼠BMSCs,MTT检测AdCMV-VEGF对大鼠BMSCs增殖的影响,Western blot检测不同浓度的AdCMV-VEGF感染大鼠BMSCs后蛋白的表达量和BMSCs组、AdCMV-eGFP组、AdCMV-VEGF组细胞的VEGF蛋白表达量的差异。结果成功培养了BMSCs。与BMSCs组和AdCMV-eGFP组比较,AdCMV-VEGF组的VEGF蛋白表达较多。结论成功获得大鼠BMSCs,且AdCMV-VEGF成功转染大鼠BMSCs,为缺血性脑血管疾病治疗提供有用的参考。
- 张锋李巧玉陈波袁志诚胡昌龙胡浪张志坚
- 关键词：腺病毒血管内皮生长因子骨髓间充质干细胞
