应晓杨
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
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- 反义寡核苷酸靶向hTERT对K562细胞株端粒酶活性和细胞凋亡的影响
- 2008年
- 本研究探讨靶向封闭端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的反义硫代寡核苷酸(antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide,ASPSODN)对K562细胞目的基因抑制作用及对端粒酶活性和细胞凋亡的影响。选用3种浓度ASPSODN,分别为0.2μmol/L、0.6μmol/L、1.0μmol/L,同时设空白组、脂质体组和三种相同浓度正义硫代寡核苷酸(SPSODN)作为对照,转染到人红白血病细胞株K562,于24、48小时收集细胞进行检测。用RT-PCR检测靶基因hTERT mRNA的表达,TRAP-ELISA检测细胞端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明:①K562细胞被转染24小时后,hTERT mRNA的表达在脂质体组为0.80±0.24,在0.2μmol/LASPSODN组为0.69±0.12,在SPSODN组为0.72±0.25,它们与空白对照组(0.85±0.28)无统计学差异(p>0.05),而0.6μmol/LASPSODN组的hTERT mRNA的表达(0.42±0.16)比脂质体组明显下调(p<0.05),而相同浓度的SPSODN组则下调不明显(0.69±0.26),1.0μmol/LASPSODN和SPSODN对hTERT表达都表现出一定的抑制。采用台盼蓝拒染法染色显示,经脂质体转染的1.0μmol/LODN无论正义或反义时,细胞死亡明显增多。②24小时端粒酶相对活性空白对照组为88.9%,脂质体作用组为77.7%,两者无显著性差异;0.2、0.6、1.0μmol/LASPSODN作用后端粒酶相对活性分别为60.6%、52%、58%,与空白对照组相比均有显著性差异(p<0.05),其中0.6μmol/LASPSODN组间与脂质体组有显著性差异(p=0.037);而0.2、0.6、1.0μmol/L作用后SPSODN组端粒酶相对活性分别为76.1%、72.2%、65.7%,0.2和0.6μmol/LSPSODN组与空白组、脂质体组间均无统计学差异。48小时ASPSODN各作用组则端粒酶活性有所恢复,0.2、0.6、1.0μmol/LASPSODN作用后端粒酶相对活性分别为84.1%、82.3%、79.6%;而48小时0.2、0.6、1.0μmol/L各SPSODN组端粒酶相对活性分别为74.8%、74.5%、67.9%,0.2和0.6μmol/LSPSODN组间端粒酶活性无明显抑制。③培养48小时后0.6μmol/LASPSODN组和SPSODN组细胞凋亡率分别为4.34%和1.8
- 应晓杨方美云王一
- 关键词：端粒酶端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸K562细胞株细胞凋亡
- 可溶性补体受体2在干燥综合征患者血清中的变化及意义
- 2014年
- 目的:探讨原发性干燥综合征(pSS)患者血清中可溶性补体受体2(sCR2)的变化及意义。方法:采用ELISA法检测20例原发性干燥综合征患者和20例健康体检者血清中可溶性补体受体2的浓度,并用SPSS统计软件进行相关统计学分析。结果:pSS患者sCR2水平均明显低于健康体检者(P均<0.01),sCR2与年龄和性别无关,特别是PSS患者中抗体阳性组血清sCR2水平低于阴性对照组,存在显著的统计学意义(P <0.05),而且pSS患者血清sCR2水平与免疫球蛋白IgG及血沉存在明显负相关。结论:pSS患者血清sCR2水平明显降低,且与免疫球蛋白IgG及血沉存在明显负相关,提示sCR2可能参与pSS的发病过程。
- 李宁宁张永利王晓非侯云华应晓杨王晨辰张婷刘影王芳
- 关键词：原发性干燥综合征
- 反义寡核苷酸靶向hTERT对K562细胞株端粒酶活性和细胞凋亡的影响
- 目的:端粒酶活化与肿瘤的发生发展和细胞的永生化有密切关系。端粒酶是一种逆转录酶,能以自身RNA为模板合成端粒的DNA重复序列/(5-TTAGGG-3/)n加在染色体末端,维持端粒长度,使细胞发生永生化并致癌变。端粒酶主要...
- 应晓杨
- 关键词：端粒酶反义寡核苷酸K562细胞株
- 文献传递
- 组织细胞性坏死性淋巴结炎误诊9例分析被引量：2
- 2004年
- 组织细胞性坏死性淋巴结炎(Histocytic necrotizing lymphadenitis)最早由日本人Kikuchi等于1 972年描述的,故又称Kikuchi病或Kikuchi-Fujinmoto病[1],简称HNL.是一种病因不明的非肿瘤性淋巴结肿大的自限性疾病,在临床上较为少见.因其临床表现多样,缺乏特异性,极易造成误诊.我院自1993～2003年共收治HNL12例,其中误诊9例,误诊率达75%.现分析如下.
- 应晓杨张永利
- 关键词：淋巴结炎误诊淋巴结炎病理学坏死
- 反义寡核苷酸对K562细胞增殖和端粒酶活性的影响
- 2010年
- 目的 研究靶向封闭端粒酶反转录酶（hTERT）mRNA的反义硫代寡核苷酸（ASPSODN）对K562细胞目的 基因的抑制及其对端粒酶活性及细胞增殖周期和凋亡的影响.方法 ASPSODN转染到人类红白血病细胞株K562,采用MTT法、酶联免疫吸附（ELISA）法和流式细胞术（FCM）检测K562细胞的增殖、端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期的改变,RT-PCR检测hTERT mRNA的表达.结果 0.6μmol/L的ASPSODN（0.42±0.16）能明显下调hTERT表达（P〈0.05）,端粒酶相对活性降至52%;MTT法检测显示明显抑制K562细胞增殖活性;FCM显示细胞凋亡率为10.31%,PI染色显示细胞被阻止在G1/G0期,S期及G2/M期的细胞减少,但无特征性的凋亡峰.结论 ASPSODN靶向hTERT能特异性抑制K562细胞hTERT mRNA的表达,明显下调端粒酶活性,抑制K562细胞增殖,并通过降低细胞的端粒酶活性而诱发细胞凋亡.
- 应晓杨方美云王一
- 关键词：细胞周期K562细胞系
- 抗中性粒细胞胞浆抗体对诊断系统性红斑狼疮血管炎的临床意义被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)在活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者中临床意义。方法:通过间接免疫荧光法(IIF)及酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测63例处于活动期的SLE的血清ANCA,并分析ANCA与SLE临床表现及其他实验室检查结果之间的关系。结果:用IIF方法检测时ANCA在SLE的阳性率25.4%,全部是核周型AN-CA(p-ANCA)。用ELISA方法检测靶抗原,乳铁蛋白Lactofertin(LF)为主要的靶抗原。ANCA在SLE合并皮肤血管炎或肾脏受累、病情活动及抗ds-DNA抗体阳性时的阳性率显著高于相应对照组。结论:ANCA可能参与了SLE血管炎的发病过程。
- 应晓杨张永利
- 老年人恶性淋巴瘤82例临床分析被引量：1
- 2004年
- 应晓杨张永利
- 关键词：老年人恶性淋巴瘤生存率
- 低氧诱导因子-1α对Jurkat细胞端粒酶逆转录酶影响的研究
- 2017年
- 目的探讨RNA干扰白血病细胞株Jurkat低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)的影响,并检测其对端粒酶活性、细胞增殖及凋亡的影响,为白血病的基因治疗提供理论基础。方法构建人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的短发夹RNA(sh RNA)真核表达载体并转染白血病细胞株Jurkat;采用RT-PCR方法检测Jurkat细胞HIF-1α及hTERT m RNA表达水平;EIESA法检测端粒酶的活性,流式细胞术分析转染后Jurkat细胞的细胞周期和凋亡率。结果成功构建了pshRNA-HIF-1αl和pshRNA-HIF-1α2重组质粒;转染Jurkat细胞后,与空质粒组相比,pshRNA HIF-1α可有效抑制Jurkat细胞HIF-1α及hTERT基因表达;流式细胞术结果表明转染后,其凋亡率明显高于空质粒组(P<0.05),Jurkat细胞增殖活性显著降低。结论成功构建HIF-1α的sh RNA表达质粒,转染Jurkat细胞后能表达sh RNA,干扰效果明确,目的基因的表达明显下降,从而可以抑制白血病细胞Jurkat的增殖,促进凋亡。
- 应晓杨方美云王晨辰韩丽徐艳冰张卫军
- 关键词：SHRNA表达质粒HTERT
- 骨髓活检在恶性血液病诊断中的意义被引量：8
- 2009年
- 目的应用骨髓活检和涂片相结合,对82例恶性血液病患者的骨髓进行骨髓切片和涂片结果的分析,以期进一步提高形态学诊断及预后判断。方法收集恶性血液病病例82例,一步法抽吸骨髓,常规方法涂片染色,塑料包埋法制作组织切片;恶性血液病的诊断参照2001年WHO分型标准。结果骨髓活检和涂片相结合,在诊断骨髓纤维化、低增生性骨髓增生异常综合征,骨髓活检诊断符合率高于骨髓涂片。对于淋巴瘤骨髓受累的病例,骨髓活检更容易找到特征性的淋巴瘤细胞;对多发性骨髓瘤,活检切片是体内肿瘤负荷更敏感的指标;对慢性粒细胞性白血病判断急变及急性白血病判断缓解后复发,骨髓活检常能进行较好的监测。结论骨髓活检和穿刺涂片相结合,可以有效提高恶性血液病的诊断水平。
- 应晓杨张永利
- 关键词：骨髓活检骨髓涂片恶性血液病
