刘浩 作品数:14 被引量:13 H指数:3 供职机构: 北京协和医学院 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
SHIVchn19p7中国恒河猴细胞适应株的制备和生物特性研究 2010年 目的体外制备SHIVchn19p7病毒中国恒河猴细胞适应株,建立病毒库。滴定该批次SHIVchn19p7病毒的TCID50。方法用SHIVchn19p4静脉感染中国恒河猴,并进行恒河猴体内传代。定期采血测定血浆病毒载量,当病毒载量达高峰时采血分离外周血单核淋巴细胞(PBMCs),与正常恒河猴PBMCs共培养。定期测定培养液中的P24抗原水平。当病毒复制达高峰期时收集培养上清,分装并冻存。测定病毒RNA载量、P24抗原浓度。10倍系列稀释SHIVchn19p7病毒,加入TZM-bl细胞,测定TZM-bl细胞中Lucifres值,计算病毒的TCID50。结果本研究共制备了240mL,SHIVchn19p7病毒,gp120序列测定分析表明病毒未发生变异,CCR5的嗜性也未发生改变。病毒载量为4.44×105copies/mL,P24抗原水平为3.57×102pg/mL,TZM-bl细胞测定病毒的TCID50为2.08×104mL。结论此次制备的SHIVchn19p7细胞适应株生物学特性稳定,适合作为毒种库构建SHIVchn19p7/中国恒河猴模型。 丛喆 陶真 刘浩 姚南 金光 陈霆 魏强高效联合抗反转录病毒治疗引发继发性骨质疏松的研究进展 被引量:3 2018年 高效联合抗反转录病毒治疗(highly active anti-retroviral therapy,HAART)是艾滋病治疗的主要方法,但也是导致骨质疏松和骨量减少的重要因素之一,目前该治疗方法可能的发病机制尚不明确。其中,核苷类反转录酶抑制剂(nucleotide reverse transcriptase inhibitor,NRTI)和蛋白酶抑制剂(protease inhibitors,PI)在诱发骨质疏松症上具有重要作用。本文就NRTI和PI引发骨质疏松的流行病学、可能的相关机制做一综述。 刘浩 刘浩 李玮 魏强关键词:骨质疏松 艾滋病病毒 模拟HIV性传播特点的SIVmac239恒河猴直肠黏膜感染 被引量:3 2010年 目的制备SIVmac239恒河猴(Macaca mulatta)细胞适应株病毒,模拟HIV性传播感染特点进行恒河猴直肠黏膜感染研究,探索引起系统性感染的病毒阈值水平与机体病毒、免疫学之间相关性,为我国艾滋病黏膜疫苗等生物制剂有效性评价提供新的模型构建思路。方法参照HIV性传播自然感染剂量范围,选用SIVmac239连续升高的3种剂量直肠黏膜途径感染两只恒河猴,采取多种方法进行病毒血症和免疫反应特点分析。结果两只恒河猴经2×101TCID50和2×102TCID50病毒滴度2次攻击后45d,经检测均未建立系统性感染,病毒特异性免疫反应均为阴性;第3次2×103TCID50病毒滴度攻击后,M296猴表现出典型的系统性感染特点,并诱导特异性免疫反应。结论确认了HIV性传播过程中的病毒剂量效应关系,为预防性生物制剂的猴体有效性评价提供了新的思路。同时,发现SIVmac239Gag区特异性的T细胞免疫反应在病毒控制过程中发挥了关键作用,对于新一代艾滋病黏膜疫苗的抗原选择具有指导性意义。 刘浩 刘强 丛茹 王卫 乔红伟 陈志伟 魏强关键词:SIVMAC239 恒河猴 细胞免疫应答 SHIV1157ipd3N4细胞适应株的制备及其生物特性 2011年 目的体外制备SHIV1157ipd3N4病毒中国恒河猴细胞适应株,在细胞水平和中国恒河猴体内评价其生物学特性。方法用SHIV1157ipd3N4病毒阴道感染中国恒河猴,在血浆病毒载量高峰期采血分离外周血单核淋巴细胞(PBMCs),与正常中国恒河猴PBMCs共培养。定期测定培养液中的P24抗原水平。当病毒复制达高峰期时收集培养上清,分装并冻存。测定病毒RNA载量、P24抗原浓度和TCID50。静脉感染中国恒河猴,研究该批次SHIV1157ipd3N4在体内的病毒学、免疫学指标变化及变异情况,分析其基本的生物学特性。结果本研究共制备了243 mL SHIV1157ipd3N4病毒原液,gp120序列分析表明病毒未发生变异,CCR5的嗜性也未发生改变。病毒载量为1.586×108 copies/mL,P24抗原水平为1.16×103 pg/mL,TZM-bl细胞测定病毒的TCID50为3.16×103/mL。1 mL SHIV1157ipd3N4静脉成功感染中国恒河猴G1004V,高峰期病毒载量达到1.0×106 copies/mL以上。结论此次制备的SHIV1157ipd3N4细胞适应株生物学特性稳定,适合作为毒种库构建SHIV1157ipd3N4/中国恒河猴模型。 丛喆 姚南 刘浩 金光 陶真 陈霆 魏强关键词:中国恒河猴 鼠李糖乳杆菌防治替诺福韦诱发骨质疏松的研究 目的:高效抗逆转录病毒疗法(Highly Active Antiroviral Therapy, HAART)是导致人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者骨质疏松主要因素... 刘浩关键词:鼠李糖乳杆菌 骨质疏松 抗炎效应 成骨分化 SHIV-XJ02170感染恒河猴后期的传代特点和env基因变异 2011年 目的研究SHIV-XJ02170在中国恒河猴感染后期传代过程中病毒和宿主的变化特点,并分析env基因的序列变异。方法将感染中国恒河猴G0401V后期(5年)的SHIV-XJ02170病毒垂直传代2只猴(G0401V→G0402V→0403V),同时,剔除G0401V猴CD8+T细胞使潜伏的病毒大量复制后传代1只猴(G0401V→G0404V),应用流式细胞术、病毒载量测定、序列分析等方法研究该病毒在猴体内长期适应后的病毒和免疫学指标及序列变异特点。结果 G0401V在感染后期仍能稳定传代,且表现出毒力增强的特点。其传代猴G0402V在传代后41 d死亡,外周血CD4+T淋巴细胞衰竭,仅为43个/mL,符合艾滋病感染猴快速进展型的特征。剔除体内CD8+T细胞之后的传代猴G0404V的表现类似G0401V,即长期低水平的病毒血症水平。env基因序列分析发现SHIV-XJ02170在G0401V体内长期适应后发生了可遗传的序列变异,并引起糖基化位点的改变。结论 SHIV-XJ02170在猴体长期适应后的传代过程中表现出向强毒株过渡的特征,为进行SHIV-XJ02170感染性克隆的构建奠定了良好的实验基础。 陶真 丛喆 刘强 李悦 刘浩 王卫 金光 陈霆 姚南 蒋虹 杨贵波 李喆 魏强关键词:传代 ENV B亚型SHIV_(SF162p3)中国恒河猴小剂量多次阴道黏膜感染 被引量:3 2011年 目的模拟HIV性传播感染特点进行中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染研究,为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建思路。方法选用20-30TCID50剂量的SHIVSF162p3病毒阴道黏膜途径感染六只成年雌性中国恒河猴,共感染13次,每次攻毒间隔4~7 d。采取测定血浆病毒载量和外周血CD4+∶CD8+。结果 6只中国恒河猴经13次病毒攻击后,经检测均建立系统性感染,血浆病毒载量呈阳性;CD4+∶CD8+均有下降。结论成功建立了中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染模型,为艾滋病研究提供了新的更接近于自然感染状态的模型建立模式。 丛喆 刘浩 朵建英 王卫 蒋虹 高虹 杨志伟 Sylvain Fleury 魏强 秦川关键词:黏膜感染 分子氢与Nec--1通过抑制细胞坏死性凋亡减轻皮瓣缺血再灌注损伤的对照研究 研究目的: 1.探究缺血再灌注后皮瓣中是否存在细胞坏死性凋亡现象。 2.研究Nec-1(Necrostatin-1)对缺血再灌注皮瓣中的坏死性凋亡现象是否有抑制作用,另外这种抑制作用是否可以保护皮瓣,减少皮瓣缺血再灌... 刘浩关键词:缺血再灌注损伤 文献传递 SHIV_(SF162P3)中国恒河猴细胞适应株的制备和鉴定 被引量:1 2010年 目的体外制备SHIVSF162P3中国恒河猴细胞适应株,建立病毒库,为模型制备提供生物学特性稳定的感染用病毒。方法用SHIVSF162P3体外感染中国恒河猴外周血单个核细胞(PBMCs),定期测定培养液中的P24抗原水平。当病毒复制达高峰期时收集培养上清,分装并冻存。测定病毒RNA载量、P24抗原浓度和TCID50。利用病毒RNAenv区(M33262,6846bp~8481bp,共1636bp)序列分析的方法分析毒株在制备过程中的变异情况。静脉途径感染中国恒河猴G0801V,观察血浆病毒载量、外周血CD4+/CD8的变化情况。结果本研究共制备了275mLSHIVSF162P3病毒,病毒载量为4.389×107copies/mL,P24抗原水平为5.64×102pg/mL,TZM-bl细胞滴定TCID50为8.37×104/mL。gp120序列测定分析表明病毒未发生变异,CCR5的嗜性也未发生改变。感染猴G0801V高峰期病毒载量超过1×108copies/mL,急性期CD4+/CD8+倒置。结论此次制备的SHIVSF162P3细胞适应株生物学特性稳定,适合作为毒种库构建SHIVSF162P3/中国恒河猴模型。 丛喆 刘强 刘浩 陶真 王卫 蒋虹 魏强关键词:中国恒河猴 SIVmac239细胞适应株/中国恒河猴直肠粘膜模型研究 目的建立SIVmac239细胞适应株/中国恒河猴直肠粘膜模型并探索MID50病毒滴度滴定的新方法。方法采用剂量10倍连续提高(5×10~2TCID起始,间隔两周)的攻毒方案,将SIVmac239中国恒河猴细胞适应株直肠粘... 刘浩 刘强 丛喆 陈志伟 魏强 秦川关键词:中国恒河猴 直肠粘膜 SIVMAC239 文献传递