刘小娟
- 作品数：11 被引量：32H指数：3
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 唾液乳杆菌株SIL1及其应用
- 本发明公开了一株猪源唾液乳杆菌SIL1及其应用，属于微生物技术领域。该唾液乳杆菌（<I>Lactobacillussalivarius</I>）SIL1对酸、胆盐和温度具有良好的耐受性，耐受pH3和胆盐含量为6g/L的培...
- 王晓丽王永山朱小翠诸玉梅刘小娟周宇王冉
- 文献传递
- 传染性法氏囊病病毒siRNA抑制病毒复制实验
- 本实验根据VP1基因保守区序列设计siRNA,在鸡胚成纤维细胞(CEF)上分析其对IBDV复制的抑制效应,为新型抗IBDV药物与疫苗设计探索新的研究思路和靶标。1材料与方法根据传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP1基因保守...
- 欧阳伟刘小娟王永山张海彬范红结
- 文献传递
- IBDV抗原表位与HBcAg嵌合基因的分子设计及其表达产物分析
- 为了提高模拟IBDV多表位基因5epis的免疫效力,运用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(Hepatitis B core antigen,HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)...
- 刘小娟王永山欧阳伟张海彬王晓丽王忠灿唐雨德
- 关键词：抗原表位嵌合基因
- 唾液乳杆菌株SIL1及其应用
- 本发明公开了一株猪源唾液乳杆菌SIL1及其应用，属于微生物技术领域。该唾液乳杆菌（Lactobacillus salivarius）SIL1对酸、胆盐和温度具有良好的耐受性，耐受pH3和胆盐含量为6g/L的培养液，能在模...
- 王晓丽王永山朱小翠诸玉梅刘小娟周宇王冉
- 靶向传染性法氏囊病病毒VP1基因siRNA对病毒复制的抑制被引量：1
- 2011年
- 根据传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP1基因保守区序列,选择设计了3个靶向VP1的小干扰RNA序列(siR-NA):VP1-siRNA668、VP1-siRNA1034和VP1-siRNA2250,化学合成DNA序列,体外转录合成siRNA,转染鸡胚成纤维细胞(CEF)后接种IBDV,分析siRNA对病毒复制的影响。结果显示,病毒接种后72h,3个VP1-siRNA转染组未出现明显的细胞病变(CPE),病毒滴度分别为102.75,102.00,101.75 TCID50/0.1mL,而siRNACON转染和单纯IBDV接种对照组均出现明显CPE,病毒滴度均为106 TCID50/0.1mL;用荧光定量RT-PCR分析VP1基因水平,3个VP1-siRNA转染组比对照组分别降低了73.10%,81.79%,90.28%。结果表明,本试验选择设计的3个siRNA具有明显抑制IBDV复制功能,其中2 250位点的siRNA抑制效果最明显,推测该区域是VP1基因的重要功能区,是新型抗IBDV药物与疫苗设计的重要靶标。
- 欧阳伟王永山刘小娟张海彬
- 关键词：RNA干扰(RNAI)VP1基因
- 八株芽孢杆菌的分离鉴定及其抗逆性比较被引量：9
- 2010年
- 从土壤中分离到3个菌株,分别命名为KF、DY和LB1,从猪粪便中分离到5个菌株,分别命名为KH、K2X、KY1、LB2和LY3,通过16SrRNA基因序列分析,结合细菌形态学、生理生化特性进行了鉴定,并对分离菌的抗逆性进行了比较。经鉴定,KF、KH、K2X和KY1菌株为枯草芽孢杆菌,LB1、LB2和LY3菌株为蜡样芽孢杆菌,DY菌株为地衣芽孢杆菌;抗逆性比较结果显示,K2X菌株对温度比较敏感,其他菌株经60℃处理30min后不影响其生长;DY菌株耐酸性最强,能在pH3的胃液中正常生长;KY1菌株的耐酸性次之,耐胆盐能力最强,能在胆盐含量为6g/L的培养基和模拟肠液中正常生长。研究还发现,这8个菌株对共培养的大肠杆菌都没有抑制作用,只有KF、KH和LB2菌株对共培养的沙门氏菌分别有28.6%、27.0%和24.6%的抑菌效果。
- 王晓丽朱小翠王永山诸玉梅刘小娟周宇王冉
- 关键词：芽孢杆菌RRNA抗逆性
- 传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合基因的构建及其表达产物分析被引量：6
- 2010年
- 为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)的抗原表位嵌合体基因分子载体pET-mHBc。将编码IBDV多表位基因5epis定向插入到pET-mHBc的mHBc基因中,获得嵌合体基因mHBc-5epis表达重组质粒pET-mHBc-5epis,并在大肠杆菌中表达。经SDS-PAGE分析,重组嵌合体蛋白的分子量约29 ku,表达量约占菌体总蛋白的47.6%;Western blot结果表明,重组嵌合体蛋白可与IBDV抗体反应形成1条特异性蛋白带;重组嵌合体蛋白呈病毒样颗粒(VLP),直径约100 nm～120 nm;用IBDV抗体夹心ELISA检测,抗原效价达到1∶200。本实验成功构建了5epis与HBcAg嵌合体基因,并在大肠杆菌中高效表达,具有IBDV抗原反应性的重组病毒样颗粒嵌合体蛋白,为研究其表位型基因工程疫苗提供了新途径。
- 刘小娟王永山欧阳伟张海彬王忠灿唐雨德
- 关键词：传染性法氏囊病病毒抗原表位
- 传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合体蛋白的表达及其免疫功能分析
- 刘小娟王永山欧阳伟毕振威张海彬王忠灿
- 关键词：免疫功能
- 5株乳酸菌的分离鉴定与生物学特性研究被引量：16
- 2011年
- 从泡菜和仔猪粪便中分离出5株乳酸菌,分别命名为RS、RB、RFT、RST、RO,结合细菌形态学、生理生化特性和16S rRNA序列同源性分析进行鉴定,并对其特性进行了研究。结果表明RS菌株为植物乳杆菌,RB、RO菌株为粪肠球菌,RFT、RST为屎肠球菌。其中RS菌株具有较好的耐酸性、一定的胆盐耐受力,对温度敏感;RB、RFT、RST、RO菌株对模拟肠液具有较强的耐受力,45~55℃处理30 min不影响其生长;5个菌株对大肠杆菌O157和沙门氏菌的抑菌率均达到98%~100%,可作为优良的益生菌候选菌。
- 王晓丽王永山诸玉梅朱小翠刘小娟周宇王冉
- 关键词：乳酸菌生物学特性
- IBDV抗原表位与HBcAg嵌合体基因的构建及其表达产物免疫功能分析
- 传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease, IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus, IBDV)引起的以侵害雏鸡淋巴组织,特别是中枢免疫器...
- 刘小娟
- 关键词：传染性法氏囊病乙肝病毒核心抗原免疫功能
- 文献传递
