万丽丽
- 作品数:11 被引量:44H指数:3
- 供职机构:华中农业大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家重点实验室开放基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 油菜细胞核雄性不育的细胞学研究以及育性相关基因的克隆与功能分析
- 甘蓝型油菜细胞核雄性不育是油菜杂种优势利用的重要途径,它的优点表现在相对于细胞质雄性不育更为稳定彻底的不育性状,不受恢保关系限制而易获得强优势组合。虽然细胞核雄性不育已经得到广泛的应用,但其雄性不育基因作用的机理还没有被...
- 万丽丽
- 文献传递
- 甘蓝型油菜显性细胞核雄性不育基因MS5<Sup>b</Sup>及其应用
- 本发明公开了一种甘蓝型油菜显性细胞核雄性不育基因MS5<Sup>b</Sup>及其应用,涉及油菜遗传育种和基因工程领域。本发明提供的甘蓝型油菜显性细胞核雄性不育基因MS5<Sup>b</Sup>的功能区段蛋白,其氨基酸序...
- 杨光圣辛强洪登峰万丽丽董发明
- 文献传递
- GOX-CP4EPSP转化甘蓝型油菜的抗草甘膦研究被引量:4
- 2016年
- 利用Genome walking方法在孟山都抗农达油菜(Brassica napus L.)中克隆了GOX-CP4EPSP双顺反子结构。利用农杆菌介导的遗传转化方法将PCAMBIA-GOX-CP4EPSP植物双元表达载体转化甘蓝型油菜Pol CMS恢复系"7-5"获得转基因植株。在田间对转基因植株喷施400倍的农达(41%草甘膦异丙胺盐),所有的转基因家系都能存活,而非转基因Pol CMS恢复系"7-5"全部死亡。在转基因植株叶片中能够检测到GOX和CP4EPSP基因的表达。对转基因T1代3个家系在60 mg/L草甘膦培养基上的发芽试验以及GUS染色分析表明抗草甘膦的单株能表达与GOX-CP4EPSP共转化的GUS蛋白质,而对草甘膦敏感的单株和野生型对照植株都不能表达GUS蛋白质。鉴于GOX-CP4EPSP双顺反子在转基因油菜中的有效性和稳定性,可以作为双子叶植物遗传转化的筛选标记。
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- 关键词:NAPUS双顺反子农达
- 转Bt基因油菜的抗虫性分析被引量:2
- 2016年
- 利用农杆菌介导的遗传转化分别将Cry1C和Cry2A的2个单价Bt基因转入油菜(Brassica napus L.),以两个纯合的转基因抗虫油菜为亲本,通过有性杂交的方法将不同Bt基因聚合,培育双价Bt抗虫油菜,并对其抗虫性和种子品质性状进行评价。结果表明,Cry1C、Cry2A在聚合后均能稳定表达,和单价Cry1C转基因植株相比,双价株系中蛋白质含量明显降低,以Cry2A为母本的聚合株系蛋白质含量降低更多,Cry1C在遗传上存在母本效应。室内接种小菜蛾二龄幼虫结果显示,转化单价和双价聚合Bt基因的抗虫性增强,其中转化单价Cry1C的抗虫性优于双价聚合Bt基因和单价Cry2A基因的转基因植株。玻璃温室栽培转基因植株,单价Bt和双价聚合Bt基因的转基因植株能生存而非转基因植株受到严重虫害而死亡。对抗性优良的单价和双价聚合的转基因植株种子品质测定发现,与未受到虫害的受体材料双低优良恢复系7-5的含油量和硫苷含量差异不显著,从而达到抗性改良的目的。
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- 关键词:NAPUS苏云金芽孢杆菌农杆菌介导遗传转化
- 侧翼序列克隆方法评价被引量:35
- 2006年
- 克隆已知序列的侧翼DNA区域是基因操作实验中经常面临的任务之一。自PCR技术发明以来,以其为基础克隆侧翼序列的方法不断开发,如反向PCR(inversePCR)、捕捉PCR(capturePCR)、VectorettePCR、抑制PCR(suppressionPCR)、T接头PCR(T-linkerPCR)、多功能接头PCR(versatilecassettePCR)、AluPCR、热不对称交错PCR(thermalasymmetricinterlacedPCR)和DNA步行—复性控制引物(DNAwalking-an-nealingcontrolprimerTM)等。本文对上述方法的原理进行了简要的概括和总结,据此将其归为三大策略,即连接成环PCR、外源接头介导PCR和半随机引物PCR。对不同的策略和同一策略中不同的方法的优缺点亦进行了比较,进而讨论和展望了它们的主要应用领域和潜力,以期对实际操作起到借鉴作用。
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- 关键词:侧翼序列
- 转化Ospgip1改良甘蓝型油菜的菌核病抗性
- 2013年
- 通过农杆菌介导法,将水稻抗病基因Ospgip1成功转入甘蓝型油菜7-5、P61-5和T45中,获得了转基因阳性单株。对转基因植株T1进行PCR检测确定阳性单株,再利用RT-PCR、Real-time PCR分析阳性单株苗期叶片中Ospgip1基因的表达量,并对转基因植株进行苗期和成株期的抗菌核病性鉴定。T1中37个株系2 000株阳性单株的RT-PCR、Real-time PCR分析结果表明,Ospgip1已在转基因植株后代中表达。转基因植株的抗菌核病性鉴定结果显示,T1转基因植株苗期叶片Ospgip1表达量与其相应的叶片菌斑面积呈显著负相关性;其中16个株系的苗期平均菌斑面积显著小于对照,成株期21个转基因株系菌斑的平均长度小于对照。
- 陈叶万丽丽王转茸洪登峰杨光圣
- 关键词:甘蓝型油菜农杆菌介导法核盘菌
- 高产优质杂交油菜新品种华油杂12、13、14号的选育和推广应用
- 杨光圣洪登峰董发明万丽丽熊秋芳邹立成段志红杨兴柏祝师元马磊吴润余大龙徐义孙秀丽孙丽
- 该项目属于作物育种技术领域,具体涉及高产优质双低杂交油菜新品种的选育与推广。利用“油菜温敏型细胞质雄性不育两系选育方法”专利技术,通过复合杂交和系谱选育并结合小孢子培养选育出新的温敏型波里马细胞质雄性不育两用系“195A...
- 关键词:
- 关键词:杂交油菜品种选育栽培技术
- 高产优质广适应杂交油菜新品种华油杂13号的选育和推广应用
- 杨光圣洪登峰董发明万丽丽熊秋芳邹立成段志红王奕祝师元马磊吴润余大龙徐义王娟孙秀丽
- 该项目属于作物育种技术领域,具体涉及高产优质双低杂交油菜新品种的选育与推广。利用自己的“油菜生态型细胞质雄性不育两系选育方法”的专利技术,通过复合杂交和系谱选育并结合小孢子培养选育出新的生态型波里马细胞质雄性不育两用系“...
- 关键词:
- 关键词:油菜品种选育
- 一种通过基因编辑创制油菜雄性不育新种质的方法及应用
- 本发明提供了一种通过基因编辑技术创制雄性不育系的方法和应用。该方法通过对MS5基因的保守结构域进行基因编辑敲除,使得MS5基因功能丧失或者产生功能获得突变,从而形成隐性或显性细胞核雄性不育系。本发明制备的雄性不育系与正常...
- 杨光圣辛强洪登峰董发明万丽丽
- 文献传递
- 高产优质抗逆杂交油菜新品种“华油杂9号”的选育和推广应用
- 杨光圣万丽丽张立武洪登峰刘平武何庆彪段志红董发明王娟熊秋芳魏泽兰祝师元汪爱顺胡丹平吴润
- 华中农业大学利用自己的“隐性细胞核+细胞质雄性不育三系选育方法”的专利技术,将隐性细胞核雄性不育基因导入到波里马细胞质雄性不育系中,选育出新的不育系986A。与一般polCMS不育系相比,该不育系具有长势更旺、开花更畅、...
- 关键词:
- 关键词:油菜品种选育