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一种无毒Ⅱ型伪狂犬病毒毒株及其应用: 本发明公开了一种无毒II型伪狂犬病毒毒株及其应用。本发明无毒II型伪狂犬病毒毒株由II型伪狂犬病毒野毒株的基因组中带有使RR1蛋白发生K759R突变的突变基因序列。本发明无毒II型伪狂犬病毒由新分离的II型伪狂犬病毒毒株...; 周继勇李海敏顾金燕颜焰董伟仁

一种高灵敏TaqMan实时荧光定量PCR检测核酸的方法: 本发明公开了一种高灵敏TaqMan实时荧光定量PCR检测核酸的方法，属于痕量检测技术领域。本发明提供了一种高灵敏TaqMan实时荧光定量PCR检测核酸的方法，包括以下步骤：根据待测核酸设计特异性引物和至少1条探针，利用所...; 董伟仁颜焰金玉兰彭曦冉顾金燕周继勇

猪伪狂犬病毒基因分型PCR检测方法的建立被引量：4: 2021年; 为建立一种基因Ⅰ型和Ⅱ型猪伪狂犬病毒(PRV)鉴定方法,对PRV全基因组序列进行生物信息学分析,在Ⅱ型PRV gC基因上鉴定到一段不同于Ⅰ型PRV的47 bp长的多位点稳定差异基序。该方法能特异性区分基因Ⅰ型和Ⅱ型PRV,检测猪瘟病毒、猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪蓝耳病病毒、猪圆环病毒2型及3型时呈阴性。两种分型方法针对Ⅰ、Ⅱ型PRV的最低检测限均为1×10^(4)copies/L。44份猪组织病料的单重及双重PCR检测均显示,5份样品为Ⅰ型PRV,1份样品为Ⅱ型PRV。结果表明,本研究建立的单重和双重PRV分型检测方法均能准确鉴定PRV基因型,双重PCR分型方法更便捷,本研究为PRV流行病学调查及持续性感染猪的清群净化提供有效技术手段。; 胡铭哲董伟仁颜焰顾金燕周继勇; 关键词：猪伪狂犬病毒基因分型双重PCR

一种提高转移载体中IRES序列介导筛选基因表达效率的方法: 本发明公开了一种提高转移载体中IRES序列介导筛选基因表达效率的方法，属于分子生物学技术领域，将转移载体转染靶细胞后，用病毒进行感作。本发明中利用伪狂犬病病毒的gE基因为插入位点，插入的外源基因为猪圆环病毒2型Cap基因...; 金玉兰丁书香董伟仁颜焰曾卫东洪奇华

猪圆环病毒2型抗原亚型鉴定试纸卡: PCV2抗原亚型鉴定试纸卡适用于猪PCV2亚型鉴定。其反应试剂载体吸附层包括纤维层，金标纤维层，纤维素膜层和吸水材料层；金标纤维层为吸附胶体金标记的识别PCV共同抗原表位的抗衣壳蛋白单克隆抗体的金标玻璃棉，纤维素膜层上印...; 周继勇颜焰金玉兰; 文献传递

一种快速构建禽传染性支气管炎病毒反向遗传株的方法: 本发明公开了一种快速构建禽传染性支气管炎病毒反向遗传株的方法，属于冠状病毒反向遗传技术领域。所述构建方法包括：以BAC载体为骨架，运用体外同源重组技术，快速完成包含禽传染性支气管炎病毒基因组全长cDNA克隆的构建，将构建...; 廖敏周继勇石婷婷曹尚尚颜焰

免疫鸡群H5N1和H9N2亚型禽流感病毒混合感染及H9N2亚型病毒进化分析: 2012年; 本研究分析了免疫鸡群H5N1和H9N2亚型禽流感病毒混合感染中H9N2亚型分离毒株A/chicken/Yuyao/01/2010(H9N2)的基因组特征。氨基酸序列分析显示,HA蛋白裂解位点为PSRSSR/GL,具有低致病性禽流感病毒特征,HA受体结合位点出现了人流感病毒结合位点226L,D基因出现了S31N的突变。遗传分析表明,A/chicken/Yuyao/01/2010病毒的HA基因、NA基因和NS基因在进化上属于CK/BJ/94-Like谱系,D基因和PB2基因属于G1-Like谱系,NP基因、PA基因和PB1基因属于Ck/SH/F/98-Like谱系。结果表明,从H5N1和H9N2亚型混合感染鸡体内分离的H9N2亚型禽流感病毒是一株来源于CK/BJ/94-Like谱系、G1-Like谱系和Ck/SH/F/98-Like谱系的重组病毒。; 曾嘉梅房栋卞学兵王俊桦颜焰周继勇; 关键词：禽流感 H9N2 分子进化分析

猪圆环病毒PCV1和PCV2鉴别检测试纸卡: PCV1和PCV2鉴别检测试纸卡适用于猪PCV2感染快速鉴别检测。其反应试剂载体吸附层包括纤维层，金标纤维层，纤维素膜层和吸水材料层；金标纤维层为吸附胶体金标记的识别PCV1和PCV2共同抗原表位的抗衣壳蛋白单克隆抗体的...; 周继勇金玉兰颜焰商绍彬; 文献传递

致病性猪圆环病毒基因分型三重荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3: 2022年; 为建立一种同时鉴别致病性猪圆环病毒(PCV)不同型的检测方法,本研究对PCV2、PCV3、PCV4各自Rep基因进行特异性保守序列分析,建立了致病性PCV的TaqMan单重和三重荧光定量PCR检测方法。该方法能特异性区分PCV2、PCV3和PCV4,与PCV1及PRV等临床上常见的猪传染性病原均无交叉反应。建立的单重及三重PCR方法的最低检测限度均为101copies∕μL,组内及组间的变异系数均小于1%,表明重复性良好。对354份猪临床组织病料进行三重荧光定量PCR检测,结果显示,PCV2、PCV3和PCV4的阳性率分别为66.7%、26.8%和0;PCV2和PCV3共感染率为15.8%。结果表明,本研究建立的三重荧光定量PCR方法能准确鉴别致病性PCV,灵敏性优于普通PCR法,检测过程更高效、便捷,为致病性PCV的临床诊断及流行病学调查提供了检测工具。; 金玉兰李寒影董伟仁颜焰周继勇; 关键词：猪圆环病毒

猪圆环病毒病的流行病学与控制技术研发: 周继勇金玉兰颜焰商绍彬申会刚陈庆新王忠田马广鹏邢刚; 该项目围绕PCVD（猪圆环病毒病）控制急需解决的紧迫技术问题，开展了病毒与抗体检测技术、流行病学等系统研究，研究内容包括：1、建立了用于PCV2控制技术开发的毒种和基因的关键资源库，发现PCV2在浙江省的流行特征和趋势。...; 关键词：; 关键词：圆环病毒病流行病学基因工程

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颜焰