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异染色质蛋白HP1α参与辐射损伤修复的研究: 真核细胞DNA与组蛋白相互作用形成复杂的高级结构被包裹在染色质内,因此,染色质结构的变化是调控DNA复制、重组、修复和转录等代谢活动的第一个关键点<'[1]>.染色质可分为常染色质和异染色质,异染色质的显著特征是:浓缩深...; 赵剑韩云朱应葆; 关键词：DNA复制异染色质反义技术免疫共沉淀; 文献传递

异染色质蛋白HP1α参与辐射损伤修复的研究: 真核细胞DNA与组蛋白相互作用形成复杂的高级结构被包裹在染色质内,因此,染色质结构的变化是调控DNA复制、重组、修复和转录等代谢活动的第一个关键点.; 赵剑韩云朱应葆; 文献传递

hR24L基因转染对MCF7细胞凋亡的影响被引量：1: 2001年; 为研究人类DNA损伤修复基因hR2 4L与细胞凋亡的关系 ,首先用PCR方法扩增了hR2 4L基因的开放阅读框(ORF) ,成功地构建了正义和反义hR2 4L基因的逆转录病毒表达载体重组体。然后用这两种重组质粒转染MCF7细胞 ,筛选出的阳性克隆再分别用过氧化氢、丁酸钠和去血清饥饿诱导凋亡 ,用Northern印迹杂交分析hR2 4L基因表达情况 ,用流式细胞仪和电泳检测细胞凋亡。结果发现转染正义hR2 4L重组载体的细胞的hR2 4LmRNA表达水平升高 ,其凋亡面积所占比例 (2 1 2 1± 2 42 )比对照细胞 (46 16± 4 38)明显降低 ;而转染反义hR2 4L重组载体的细胞的hR2 4LmRNA表达水平则下降 ,但其凋亡峰面积所占比例 (31 0 5± 3 0 2 )比对照细胞也明显降低 ,表明两者均抑制过氧化氢和去血清饥饿诱导的凋亡 ,但它们对丁酸钠诱导的凋亡均无抑制作用。可见hR2; 李平法朱应葆韩云童坦君傅欣; 关键词：基因转染细胞凋亡 DNA损伤修复病毒载体

异染色质蛋白HP1α参与辐射损伤修复的研究: 2004年; 目的　研究HP1α对辐射损伤修复的影响。方法　用反义技术单独抑制HP1α和联合抑制HR2 4L表达 ,观察细胞对辐射敏感性的影响 ,用免疫共沉淀法观察HP1α是否参与修复蛋白复合物的形成。结果　单独抑制HP1α,细胞对辐射敏感性与正常细胞相比差异无显著性 ,联合抑制HP1α和HR2 4L时 ,细胞对辐射的敏感性比单独抑制HR2 4L时显著增加 ;2 0Gyγ射线照射后 8h ,可检测出HR2 4L与HP1α复合物的存在。结论　HP1α与修复蛋白相互作用 ,参与DNA损伤修复 ,从而影响细胞对辐射的敏感性。; 赵剑韩云朱应葆; 关键词：HP 蛋白细胞异染色质

辐射损伤诱导HR24L多种修复蛋白复合物的形成被引量：1: 2004年; 目的　探讨辐射损伤后HR2 4L修复蛋白复合物的形成 ,为HR2 4L参与切除修复和重组修复提供生化证据。方法　利用质粒共转染和免疫共沉淀技术检测HR2 4L复合物中关键修复蛋白的存在及其在辐射损伤后的变化。结果　 2 0J m2 紫外线照射损伤后 2h ,可检测到HR2 4L ,复合物中存在有XPA。 2 0Gyγ射线照射后 2h ,检测到Ku70参与HR2 4L复合物的形成 ,照射后 8h可见Rad5 2存在。结论　辐射损伤后 ,切除修复蛋白和重组修复蛋白参与HR2 4L复合物形成的生化证据 ,进一步支持HR2 4L参与多种修复途径的论点。; 韩云孙艳朱应葆; 关键词：蛋白切除 HR 复合物生化

HRAD17/HR24L基因参与细胞周期检定点调控及凋亡调节: 在细胞周期进程中,细胞进入S期前保持DNA的完整性和进入M期前有两套完好的染色体对于遗传信息的完整和忠实传递至关重要.因此,电离辐射及化学诱变剂等因素造成DNA损伤时,细胞内的某些机制将使细胞周期发生G1/S期和/或G2...; 朱应葆钱鑫韩云; 关键词：电离辐射化学诱变剂 DNA损伤; 文献传递

辐射损伤诱导HR24L多种修复蛋白复合物的形成: HR24L基因是本实验室用功能互补法从人胎肝cDNA文库中克隆出的与芽生酵母(Saccharomyces cerevisiae)RAD24同源的DNA修复基因,它与国外学者随后报道的HRAD17是同一个基因。该基因参与细...; 韩云孙艳朱应葆; 文献传递

辐射损伤对HRAD17基因转染不同类型细胞的影响被引量：6: 2006年; 目的探讨HRAD17在DNA辐射损伤修复及辐射诱导的凋亡中的作用。方法利用基因转染技术,对小鼠成纤维细胞NIH3T3和人宫颈癌HeLa细胞均分别转染pDOR-neo载体,pDOR-HRAD17s(正义)和pDOR-HRAD17a(反义)质粒,G418筛选获得阳性克隆。转染后各组细胞去血清培养48 h同步化后给予60Coγ射线10 Gy照射,吸收剂量率为2.54 Gy/min,加入完全培养基继续培养,并于0、61、2、14、36和48 h收集固定细胞,碘化丙啶(PI)避光染色后,流式细胞仪检测细胞DNA量。结果在辐射损伤后,转染正义HRAD17的成纤维细胞主要发生G1/S期阻滞,转染正义HRAD17的肿瘤细胞主要发生G2/M期阻滞;转染正义HRAD17的细胞凋亡比例降低,转染反义HRAD17的细胞凋亡比例升高。结论HRAD17同时参与细胞周期G1/S和G2/M期阻滞,并抑制辐射损伤诱导的细胞凋亡。; 钱鑫韩云孙艳杨业鹏朱应葆; 关键词：HRAD17 细胞周期凋亡基因转染

酵母DNA修复基因RAD16温度敏感突变株的分离及人类互补基因的鉴定被引量：2: 2007年; 用PCR介导的基因重组法敲除酵母RAD16基因,用羟胺处理酵母RAD16基因表达质粒,获得RAD16基因突变库,并将其转化RAD16基因敲除的酵母细胞.用平皿复制法获得温度敏感突变株rad16-ts2,经互补试验证实,该突变表型为RAD16基因突变所致.将人cDNA表达文库转化rad16-ts2后筛选温度敏感拯救(rescue)表型,回收拯救表型酵母细胞中的质粒.测序结果表明,所获得的人cDNA克隆为HLTF/Zbu1/SMACA3基因.比较分析显示,人类该基因编码蛋白质氨基酸序列与酵母Rad16的同一性为32%,相似性则达50%.人HLTF/Zbu1/MACA3基因在HeLa细胞中过表达,可显著抑制过氧化氢损伤和UV照射诱导的细胞凋亡.; 朱应葆韩云孙艳

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韩云