郑志永
- 作品数：6 被引量：52H指数：3
- 供职机构：浙江大学化学工程与生物工程学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 应用溶氧反馈控制高密度培养重组大肠杆菌过程中乙酸的产生被引量：24
- 2006年
- 在培养重组大肠杆菌的过程中,乙酸的产生会抑制细菌的生长,也不利于重组蛋白的表达。研究了补料培养重组大肠杆菌过程中,应用脉冲补料方式时溶氧信号的响应特征来辩识是否产生乙酸。当大肠杆菌以0.1h?1的比生长速率生长时,补料过程中发酵液的乙酸含量很低,溶氧pO2的响应信号随脉冲补料而振荡。而在诱导表达重组人表皮生长因子时,大肠杆菌的呼吸能力下降,过量补入的葡萄糖使重组菌产生大量的乙酸,同时pO2的响应信号失去振荡的特征。根据pO2响应信号的特征反馈控制葡萄糖的流加速率,有效地避免了重组蛋白表达过程中乙酸的产生,实现了重组大肠杆菌的高密度培养,菌体干重达到48g?L?1,重组人表皮生长因子的表达水平提高了45%。
- 郑志永姚善泾
- 关键词：乙酸溶氧过程控制重组大肠杆菌
- 比色法测定大肠杆菌呼吸链脱氢酶活性被引量：18
- 2005年
- 为了研究大肠杆菌在不同生理状态下的代谢活力,提出一种测定大肠杆菌内呼吸链脱氢酶的活力方法. 大肠杆菌细胞膜呼吸链中的脱氢酶将氯化碘硝基四氮唑(INT)还原为暗红色水不溶性物质,用有机溶剂提取暗红色物质并用比色法测定,得到脱氢酶的活力. 研究脱氢酶催化氯化碘硝基四氮唑的反应条件, 考察显色反应的各种影响因素.得到反应的最优条件为:检测波长为490nm, 测定的菌体质量浓度为0.1～0.4g/L细胞干重, INT质量分数为0.05%, pH7.2, 温度32 ℃. 结果表明,该测定方法能够正确地表达大肠杆菌细胞呼吸链脱氢酶活性,可用于研究多种因素对大肠杆菌代谢活力的影响.
- 郑志永姚善泾
- 关键词：脱氢酶
- 用遗传算法进行重组大肠杆菌发酵动力学的分析被引量：3
- 2006年
- 重组大肠杆菌在诱导表达人表皮生长因子的过程促使细菌的生长受到抑制,一部分重组菌丧失了分裂能力,但仍保持着一定的代谢活力,分离成为存活但不能培养的细菌,根据大肠杆菌在表达外源蛋白过程中细胞生理状态的不同将细菌分为三类,提出一个描述诱导表达过程中重组大肠杆菌分离、生长的动力学模型．应用遗传算法对不同底物浓度的细胞生长、分离和产物合成的动力学参数进行了有效地估计,避免了传统算法可能陷于局部最优的问题,模型计算结果与实验结果吻合良好．分离模型在初始糖浓为5-20g/L的范围内可以较好地描述发酵过程中细胞生长、分离和目标产物表达的过程并具有一定的预测能力．
- 郑志永姚善泾
- 关键词：遗传算法发酵动力学重组大肠杆菌
- 重组基因表达对大肠杆菌生理的影响被引量：6
- 2004年
- 重组基因在表达外源蛋白质时常常会耗用大量的宿主细胞资源 ,从而对宿主造成代谢负荷 ,代谢负荷使得宿主的生化和生理产生很大的变化 ,甚至损害宿主正常的代谢功能。而过重的代谢负荷会影响目标蛋白的表达量和表达质量。综述了产生代谢负荷的原因 ,宿主细胞对代谢负荷的应激反应、以及减轻代谢负荷的策略。
- 郑志永关怡新林东强姚善泾
- 关键词：基因表达大肠杆菌
- 基于重组大肠杆菌细胞生理的人表皮生长因子发酵研究
- 重组蛋白在表达过程中会耗用大量的宿主细胞资源,对大肠杆菌细胞造成代
谢负荷,使细胞的生理产生很大的变化,甚至损害细胞正常的代谢功能。相应地,
大肠杆菌细胞自身会针对这种变化作出应激反应...
- 郑志永
- 关键词：大肠杆菌细胞生理人表皮生长因子
- 文献传递
- 重组大肠杆菌分泌人表皮生长因子过程中杂蛋白的行为分析
- 在发酵过程中要提高目标蛋白在总蛋白中的比重,一方面可以优化发酵工艺提高发酵液中目标蛋白的含量,另一方面也可以通过降低杂蛋白的含量来实现。为了控制发酵过程中产生的杂蛋白,首先要分析杂蛋白产生的原因及其行为特征,从而为控制生...
- 郑志永姚善泾
- 文献传递
