- 连翘苷人工抗原的合成及免疫原性鉴定被引量:4
- 2014年
- 基于高特异性,高灵敏度的小分子单克隆抗体的免疫分析方法的建立,对中药小分子化合物的的研究具有重要的意义,其中,小分子人工抗原的合成是中药小分子抗体制备的关键步骤。采用高碘酸钠氧化法分别合成连翘苷免疫抗原(FRn-BSA)和包被抗原(FRn-OVA),通过紫外光谱和薄层色谱法检测到连翘苷成功与BSA/OVA偶联,小鼠经FRn-BSA免疫后,体内可产生抗连翘苷抗体,效价在1:8 000左右,线性范围为1-100 mg·L-1。成功合成的连翘苷人工抗原,可为下一步的单克隆抗体制备以及相应免疫方法的建立奠定基础。
- 任雅君屈会化成金俊贺娜娜冯盛岚赵灵灵赵琰王庆国
- 关键词:连翘苷人工抗原
- 芍药苷人工抗原的合成与鉴定被引量:5
- 2014年
- 利用高碘酸钠法合成芍药苷免疫抗原PF-BSA和包被抗原PF-OVA,并通过紫外光谱检测芍药苷成功与BSA/OVA偶联。小鼠经PF-BSA免疫后,体内可产生抗芍药苷抗体,酶联免疫分析法分析证明其免疫小鼠所得抗体效价达1∶12 800,半数抑制浓度为0.791 mg·L-1,且与黄芩苷等9种中药小分子交叉反应极低。芍药苷人工抗原的合成及抗体的获得为建立ELISA和研制免疫检测试剂盒奠定了基础。
- 屈会化赵妍苏歆贺娜娜孙晔孔慧赵琰王庆国
- 关键词:芍药苷人工抗原
- ic-ELISA法测定不同厂家双黄连口服液中黄芩苷的含量被引量:4
- 2014年
- 目的:建立一种快速、灵敏的黄芩苷免疫分析检测方法,并采用该新方法比较不同厂家双黄连口服液中黄芩苷含量的差异。方法:利用黄芩苷单克隆抗体,通过对线性关系、精密度、加样回收率等方法学指标的考察,建立黄芩苷的ic-ELISA分析方法。结果:该研究建立的线性范围为256~4 096 ng/m L,板间差异不超过8.8%,板内差异最大为3.8%,平均回收率为100.1%(RSD为4.3%)。不同厂家生产的双黄连口服液中黄芩苷含量均符合2010年版中国药典一部规定。结论:该研究所建立的ic-ELISA方法准确、简便、可行,重现性好,为黄芩苷的含量测定提供了一种新方法,且新方法测得不同厂家的双黄连口服液中黄芩苷的含量没有显著差异。
- 赵灵灵屈会化冯盛岚贺娜娜成金俊任雅君赵琰
- 关键词:黄芩苷双黄连口服液
- 牡荆素人工抗原的合成与免疫原性的鉴定被引量:1
- 2015年
- 目的合成牡荆素的人工抗原,并对其免疫原性进行了鉴定。方法利用高碘酸钠氧化法偶联牡荆素制备牡荆素-牛血清白蛋白的免疫抗原和牡荆素-卵清蛋白的包被原;用紫外分光光度法和薄层色谱法鉴定小分子与载体蛋白偶联反应,并用间接ELISA测定免疫抗原免疫小鼠抗体效价,间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测抗体特异性。结果紫外扫描和薄层色谱结果表明牡荆素与牛血清白蛋白/卵清蛋白偶联成功,小鼠经牡荆素-牛血清白蛋白免疫后,体内产生了抗牡荆素抗体,效价在1∶16 000以上,线性检测范围为0.028 8-18μg/m L。结论合成的牡荆素人工抗原和专属酶联免疫分析法可用于后续的单克隆抗体的制备。
- 冯盛岚屈会化贺娜娜赵灵灵任雅君成金俊赵琰王庆国
- 关键词:牡荆素牛血清白蛋白卵清蛋白免疫分析法
- 基于抗大豆苷单克隆抗体的Ic-ELISA方法的建立被引量:1
- 2015年
- 目的:建立大豆苷的快速免疫分析检测方法。方法:该研究通过大豆苷单克隆抗体与葛根素、芦丁等共9种中药小分子的交叉反应证明该抗体具有特异性,并以制备出的大豆苷特异性单克隆抗体为基础,建立了大豆苷间接竞争酶联免疫分析方法(Ic-ELISA),并用此方法检测大豆中大豆苷的含量。结果:抗体与葛根素的交叉反应率为115%,与芦丁、甘草酸、栀子苷等小分子无交叉反应。该方法线性范围为10~10 000 ng·m L^-1,孔内差和板间差均小于6.3%,平均回收率为105.4%%。采用该方法检测大豆中大豆苷的含量,所得结果与HPLC法的结果一致。结论:该研究建立了大豆苷的Ic-ELISA方法,可为含大豆苷的中药及复方的质量控制分析提供更加快速灵敏的检测方法。
- 贺娜娜屈会化冯会宾冯盛岚赵灵灵成金俊任雅君赵琰
- 关键词:大豆苷单克隆抗体
- 用于检测和测定木犀草苷的抗体、方法和试剂盒
- 本发明提供包括木犀草苷或其衍生物的半抗原,与赋予抗原性的载体物质结合的前述半抗原的免疫原,与标记试剂结合的前述半抗原的偶联物(包被原),以及抗前述免疫原的抗体,该抗体能与完整的木犀草苷中的至少一种结构性抗原决定部位结合。...
- 赵琰屈会化王庆国贺娜娜赵灵灵张越单文超赵妍任雅君冯会宾
- 文献传递
- 间接竞争酶联免疫分析法测定葛根中葛根素的含量被引量:4
- 2015年
- 目的利用间接竞争酶联免疫分析法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)测定葛根中葛根素的含量。方法利用抗葛根素单克隆抗体,通过线性关系、精密度、回收率的考察,建立葛根素的ic-ELISA分析方法。结果该方法的线性范围为15.6~500ng/m L,孔间差和板间差均不大于3.5%,平均回收率为101.8%,并且该法检测结果与高效液相色谱法检测结果一致。结论本实验为葛根质量控制以及含葛根药材的中药复方中葛根素的含量测定提供了一种新技术方法。
- 单文超冯会宾赵琰曾文浩贺娜娜赵妍孙晔屈会化
- 关键词:葛根素
- 黄连解毒汤配伍研究进展
- 黄连解毒汤首载于葛洪《肘后备急方》,王焘《外台秘要》始冠以"黄连解毒汤"之名。本方由黄连、黄芩、黄柏、栀子4味中药按质量比3:2:2:3比例配伍组成,其中以黄连泻心火、兼泻中焦之火为君;黄芩清肺热、泻上焦之火为臣;黄柏泻...
- 贺娜娜单文超屈会化赵琰王庆国
- 文献传递
- 用于检测和测定鹅去氧胆酸的抗体、方法和试剂盒
- 本发明提供包括鹅去氧胆酸或其衍生物的半抗原,与赋予抗原性的载体物质结合的前述半抗原的免疫原,与标记试剂结合的前述半抗原的偶联物(包被原),以及抗前述免疫原的抗体,该抗体能与完整的鹅去氧胆酸中的至少一种结构性抗原决定部位结...
- 屈会化赵琰王庆国冯会宾任雅君张越贺娜娜
- 文献传递
- 葛根素与大豆苷免疫亲和高效色谱(IAC-HPLC)敲除技术的建立
- 目的:利用葛根素单克隆抗体,建立葛根素与大豆苷免疫亲和高效色谱敲除技术(IAC-HPLC)及大豆苷的icELISA分析方法。方法:1利用腹水诱导法生产葛根素单克隆抗体,通过ELISA测定抗体的效价等参数。2利用辛酸法纯化...
- 贺娜娜
- 关键词:葛根素大豆苷单克隆抗体酶联免疫分析法
- 文献传递