贺云霞
- 作品数：8 被引量：31H指数：4
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- 鹅细小病毒VP2基因的克隆、序列分析及原核表达
- 该研究参考GenBank发表的GPV-B株全基因序列,借助Oligo4.1设计一对引物,采用PCR方法对国内GPV分离株H1株的VP2基因进行扩增,扩增产物与pMD18-T载体连接后测序,结果表明：H1株VP2基因核苷酸...
- 贺云霞
- 关键词：鹅细小病毒VP2基因原核表达PCR方法融合蛋白
- 文献传递
- 鹅细小病毒NS2基因的克隆和序列分析被引量：12
- 2003年
- 本研究参考GenBank发表的GPVB株全基因序列 ,设计并合成一对引物 ,通过PCR技术扩增出GPVH1株NS2基因 ,目的片段长约 1.4kb ,将目的片段克隆到pMD18_T载体后进行序列测定和分析 ,结果表明 :GPVH1株NS2基因全长135 6bp ,编码 4 5 1个氨基酸 ,与国外已发表的GPVB株相比核苷酸序列同源性为 98.75 % ,推导氨基酸序列同源性为98.6 7%。
- 邢明伟王君伟贺云霞布日额
- 关键词：鹅细小病毒NS2基因克隆
- 鹅细小病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达及纯化被引量：8
- 2004年
- 将鹅细小病毒 (GPV) VP2基因插入原核表达载体 p PROEX- HTb,获得重组表达质粒 p PROEX- HTb- VP2。将其转化大肠杆菌 DH5α,用 IPTG诱导表达 ,表达菌体蛋白中可产生与预期大小相符的约 72 0 0 0的蛋白。以光密度扫描对该表达产物进行定量分析 ,表达产物约占菌体总蛋白的 14 %。经 His- tag金属螯合层析纯化 ,获得纯度较高的 6 His- VP2融合蛋白。 Western- blot结果表明 ,所得蛋白与鹅抗 GPV高免血清有较好的免疫反应性 ,说明在 VP2的 N端融合 6个组氨酸不影响其与特异抗体结合的活性。
- 贺云霞王君伟王立群Ulrich Neumann
- 关键词：鹅细小病毒VP2基因原核表达纯化
- 鹅卵黄IgG的纯化及兔抗鹅IgG酶标抗体的制备被引量：9
- 2005年
- 采用三氯甲烷去脂、无水Na2SO4盐析、DEAE23纤维素层析相结合的方法纯化鹅卵黄IgG,SDS_PAGE检测表明,所得鹅卵黄IgG纯度可达93%;用纯化的IgG免疫家兔,抗血清经双向琼脂扩散,证明兔抗鹅IgG抗血清效价约1∶64,免疫电泳试验检测,证明得到了特异性抗血清,提取兔抗血清的IgG,用辣根过氧化物酶标记,制备了兔抗鹅IgG的酶标抗体,酶标抗体的效价为1∶6400。
- 贺云霞王君伟
- 关键词：提纯酶标抗体
- 检测鹅细小病毒抗体的重组原核表达检测抗原及制备方法
- 本发明提供的是一种检测鹅细小病毒抗体的重组原核表达蛋白抗原及其制备方法。本产品制备过程包括：(1)设计扩增GPV－VP3基因的特异性引物；(2)通过PCR扩增获得VP3基因片段；(3)对VP3基因进行克隆、测序鉴定；(4...
- 王君伟布日额李宝臣马波贺云霞李惠昕齐岩田丽红
- 文献传递
- 鹅细小病毒H1株VP2基因的克隆和序列分析被引量：4
- 2003年
- 参考GenBank发表的鹅细小病毒 (GPV)B株全基因序列 ,设计并合成一对引物 ,采用PCR方法对国内鹅细小病毒分离株H1(GPV_H1)株的结构蛋白VP2基因进行扩增 ,将扩增产物与pMD18_T载体连接并测序。结果表明 :H1株VP2的核苷酸序列全长 176 4bp ,编码 5 87个氨基酸 ,与GenBank发表的GPV_B株、GPV_SHM株、GPV_YG株、番鸭细小病毒 (MDPV)FRANCE株、FM株的VP2相比 ,核苷酸同源率分别为 98.6 %、96 .2 %、93.2 %、80 .3%、80 .0 % ,推导氨基酸序列同源率分别为 98.3%、97.5 %、96 .1%、88.2 %、87.4 %。
- 贺云霞王君伟王立群贾永清
- 关键词：鹅细小病毒VP2基因克隆
- 鹅细小病毒VP2基因原核及真核表达载体的构建被引量：9
- 2003年
- 将鹅细小病毒VP2基因克隆到原核表达载体 pPROEX HTb及真核转移载体pFASTBAC HTb中 ,重组真核转移载体在DH10BAC 中经转座作用 ,成功构建了表达VP2基因的原核表达载体pPROEX HTb VP2和杆状病毒表达载体BAC VP2。经限制性内切酶酶切及PCR分析 。
- 贺云霞王君伟马广鹏王立群Ulrich Neumann
- 关键词：鹅细小病毒VP2基因原核表达真核表达
- 检测鹅细小病毒抗体的重组原核表达检测抗原及制备方法
- 本发明提供的是一种检测鹅细小病毒抗体的重组原核表达蛋白抗原及其制备方法。本产品制备过程包括：(1)设计扩增GPV-VP3基因的特异性引物；(2)通过PCR扩增获得VP3基因片段；(3)对VP3基因进行克隆、测序鉴定；(4...
- 王君伟布日额李宝臣马波贺云霞李惠昕齐岩田丽红
- 文献传递
