袁小亮
- 作品数：54 被引量：134H指数：6
- 供职机构：赣南医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金赣州市指导性科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 结核分枝杆菌katG基因突变对异烟肼耐药性的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨结核分枝杆菌katG基因突变TGG328TTT(Trp328Phe)对异烟肼耐药性的影响。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv和临床突变株DNA为模板,采用PCR扩增野生型和双突变型(含Trp328Phe与Met420Thr)katG基因,采用重叠延伸PCR技术构建单突变型(Trp328Phe)katG基因。将各katG基因重组至质粒pET22b(+),再导入表达宿主菌BL21(DE3)pLySs中,IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法对重组KatG蛋白进行分离纯化。通过各重组KatG蛋白与过氧化氢和邻联大茴香胺反应,检测受试菌过氧化氢酶和过氧化物酶的活性。结果成功获得纯化的KatG蛋白。相比野生型KatG(19.05U/mg和7.05×10-3 U/mg),单突变型KatG(10.50U/mg和2.23×10-3 U/mg)过氧化氢酶和过氧化物酶活性分别下降44.9%和68.3%,双突变型KatG(11.88U/mg和3.31×10-3 U/mg)则分别下降37.6%和53.0%。结论 katG基因(Trp328Phe)突变引起KatG酶活性部分缺失,与异烟肼耐药有关,可作为耐药菌株基因检测的标志用于基因芯片的开发。双突变时KatG蛋白活性较高,提示katG-328TTT具有代偿性突变的作用。
- 郑文争张天托朱家馨袁小亮黄育波黄静彭宣宪
- 关键词：结核分枝杆菌KATG基因异烟肼耐药性
- 江西省结核分枝杆菌耐二线抗结核药的分子学特征被引量：3
- 2013年
- 目的初步明确江西省耐二线抗结核药相关基因突变的特征,评价等位基因特异性多重PCR(multiplex allele-specific polymerase chain reaction,MAS-PCR)检测二线抗结核药耐药性的可行性。方法采用DNA测序方法和MAS-PCR技术,对江西省52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌进行耐药相关基因突变位点检测。结果DNA测序分析:39株耐氧氟沙星(Ofx)菌株中,32株存在gyrA基因错义突变,2株发生gyrB基因错义突变。29株耐卡那霉素(Km)或卷曲霉素(Cm)菌株中,22株为rrs1401位点A→G突变。52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌,40株为北京基因型(76.92%,40/52),其中17株北京基因型菌株发生gyrA-GAC94GGC突变(42.50%,17/40),19株北京基因型菌株发生rrs-A1401G突变(47.50%,19/40)。北京基因型与基因突变类型gyrA-GAC94GGC和rrs-A1401G无明显相关性(χ2=1.16、1.92,P值均>0.05)。MAS-PCR检测Ofx耐药株的敏感度为61.54%(24/39),检测Km或Cm耐药株的敏感度为79.31%(23/29)。结论gyrA基因94位密码子突变是江西省结核分枝杆菌Ofx耐药的主要机制;rrs-A1401G突变则是Km或Cm耐药的主要原因。MAS-PCR方法对于快速检测二线抗结核药的耐药性有一定的临床应用价值。
- 袁小亮张天托朱家馨郑文争雷建平涂少华罗一钧刘惟优
- 关键词：分枝杆菌结核抗生素类抗结核卡那霉素聚合酶链反应
- miR-23a对肺腺癌细胞株A549顺铂耐药性的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨miR-23a对肺腺癌细胞株A549顺铂耐药的影响。方法人工合成miR-23a模拟物mimics和抑制剂inhibitor,用脂质体转染法将其转入A549细胞中,荧光定量PCR检测miR-23a的表达情况;MTT法检测顺铂对A549细胞的半数抑制浓度(IC_(50))和转染后细胞对顺铂药物敏感度的改变;RT-PCR、Western blot检测MDR1、bcl-2基因及其产物P-gp、bcl-2蛋白的表达。结果荧光定量PCR证实转染成功。MTT结果表明顺铂对A549细胞的IC50值为5.2μg/m L。MTT结果表明转染miR-23a mimics的细胞增殖增加,顺铂药敏性降低;而转染miR-23a inhibitor的细胞增殖减少,顺铂药敏性增加。RT-PCR、Western blot结果表明高表达miR-23a可促进MDR1、bcl-2基因及其蛋白的表达,而低表达miR-23a可抑制MDR1、bcl-2的表达。结论 miR-23a可能在肺癌顺铂化疗耐药中有重要作用,抑制miR-23a的表达可增加顺铂对肺癌细胞的敏感性,并降低耐药基因MDR1和bcl-2基因及蛋白的表达。
- 李杰罗耀玲黄铀新刘惟优袁小亮赖庆文
- 关键词：A549细胞顺铂耐药性
- 呼出气挥发性有机物在COVID-19中的研究进展被引量：2
- 2022年
- 新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019, COVID-19)是一种传染性极强的呼吸道疾病,可通过人类呼出的气体感染,对全球公共卫生产生巨大影响。COVID-19的早期诊断和阳性病例的隔离已被证明是遏制感染蔓延的基础。尽管基于聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)的方法仍然是诊断COVID-19的金标准,但对快速和大规模诊断的迫切需求促使了替代诊断方法的发展。挥发性有机化合物(volatile organic compounds, VOC)已经显示出作为各种疾病的生物标志物的巨大潜力,VOC谱可以在感染过程中被病原体本身、宿主-病原体相互作用或宿主免疫反应改变。基于呼出气VOC的检测技术提供了一种简单、快速、无创、即时的诊断方法,可望用于大规模筛查,并最终优化COVID-19的防控策略,是一种很有前途的替代方法。本文综述了VOC检测COVID-19的作用原理、研究现状、存在的不足以及展望。
- 吴超玲陈远荣付亮邓国防袁小亮
- 关键词：呼出气挥发性有机化合物生物标志物
- 环介导等温扩增技术在支气管扩张症急性加重期常见感染病原体检测中的应用被引量：1
- 2022年
- 目的探讨在支气管扩张症急性加重期常见感染病原体检测中应用环介导等温扩增(LAMP)技术的价值。方法选择2021年1月-2021年12月赣南医学院第一附属医院收治的支气管扩张症患者218例。收集患者痰液,均进行痰细菌培养和LAMP技术。结果218例患者共留取合格痰标本218份,致病菌阳性者34例(15.60%);共分离出病原菌43株,其中38株革兰阴性菌,占比88.37%,5株革兰阳性菌,占比11.63%。218例患者LAMP方法扩增的产物,致病菌阳性者93例,阳性率为42.66%;共分离出病原菌153株,其中细菌119株,革兰阴性菌为100株,占比65.36%,革兰阳性菌19株,占比12.42%,其余34株为非典型病原菌,占比22.22%。以痰培养为金标准,肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、流感嗜血杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌敏感度分别为75.00%,70.00%,83.33%,66.67%,66.67%,66.67%;特异度分别为92.86%,84.62%,97.64%,85.58%,95.35%,93.02%。结论在支气管扩张症急性加重期常见感染病原体检测中应用LAMP能够特异、高效、快速明确病原菌,可为临床合理选择抗生素提供参考,具有广阔的应用前景。
- 饶运帷左慧敏文慧兰袁小亮
- 关键词：支气管扩张症环介导等温扩增技术病原体
- 急性胰腺炎合并肝功能损害86例临床分析被引量：2
- 2009年
- 目的探讨急性胰腺炎并发肝损害的临床特点。方法对合并肝损害86例急性胰腺炎患者的临床资料进行分析,包括一般资料、实验室检查指标、病程及预后。结果86例急性胰腺炎合并肝损害患者中胆源性病因占58%,且由胆源性与非胆源性急性胰腺炎合并肝损害者肝功能指标比较,ALT、TBIL有统计学意义(P<0.05);86例中MAP组与SAP组、死亡组与存活组肝功能指标比较均是TBIL、ALB有统计学意义(P<0.05);合并肝损害急性胰腺炎患者住院天数明显延长、发展成重症急性胰腺炎上升和病死率增加。结论要重视急性胰腺炎肝损害的发生率及损害程度,肝损害延长胰腺炎的病程,影响其预后。
- 周文辉薛云平袁小亮
- 关键词：急性胰腺炎肝功能损害
- 江西地区结核分枝杆菌耐二线抗结核药的分子学特征
- 目的初步明确江西地区耐二线抗结核药相关基因突变的特征,评价等位基因特异性多重PCR(multiplex allele-specific polymerase chain reaction,MAS-PCR)检测二线抗结核药...
- 袁小亮张天托朱家馨郑文争雷建平涂少华罗一钧刘惟优
- 关键词：结核分枝杆菌抗药性基因突变氧氟沙星卡那霉素
- 文献传递
- 新型隐球菌感染性疾病的临床特点分析
- 2019年
- 目的探讨新型隐球菌感染的临床特点,提高本院对该病的临床诊治水平。方法回顾性分析赣南医学院第一附属医院2012年1月至2017年12月收治的27例诊断为新型隐球菌感染的病例资料。结果 27例患者中,25例为隐球菌性脑膜炎,1例为胸壁软组织感染,1例为肺部隐球菌感染。25例隐球菌性脑膜炎患者主要以头痛(24/25,96%)、恶心(19/25,76%)和发热(15/25,60%)症状入院;多有不同程度的颅内压增高,平均值为(304±90)mmH2O,17例颅内压>250 mmH2O。脑脊液蛋白水平为(904±621.02)mg/L,明显升高,葡萄糖含量为(1.61±1.02)mmol/L,明显降低。首次腰穿脑脊液涂片墨汁染色阳性者20例(20/25,80%),10例(10/25,40%)脑脊液培养出新型隐球菌。多数患者接受两性霉素B联合氟康唑抗真菌治疗,20例患者治疗后4例痊愈,9例病情好转,1例死亡,6例无效。结论本院隐球菌感染患者HIV检测均阴性,隐球菌感染患者临床表现缺乏特异性,发病到确诊时间长,多次腰穿行脑脊液检查可提高隐球菌感染的诊断率。
- 宋英赖锐刘惟优袁小亮
- 关键词：隐球菌感染
- 结核分枝杆菌katG ACT271CCT基因突变与异烟肼耐药关系的研究
- 目的：探讨结核分枝杆菌katG基因突变ACT271CCT(Thr271Pro)对异烟肼耐药性的影响。方法：应用重组基因技术和分子对接技术,共同评价结核分枝杆菌katG ACT271CCT(Thr271Pro)对异烟肼耐药...
- 杨寿慧辛丽花李杰刘惟优袁小亮
- 关键词：结核分枝杆菌KATG基因异烟肼
- 肿瘤微环境中树突状细胞亚群研究进展
- 2022年
- 树突状细胞(DC)是肿瘤微环境(TME)重要组成部分。DCs是功能最强大的抗原呈递细胞(APCs),可以直接向CD8+T细胞提呈肿瘤抗原,诱导分化成效应性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs),从而起到杀伤肿瘤的作用。DCs也可以被肿瘤重新编码生物学特性,对肿瘤的进展起到促进作用。了解TME中DCs的亚群,对进一步探索DCs与肿瘤之间相互作用关系及靶向DC亚群的癌症免疫疗法有较大意义。
- 陈瑞芝袁小亮
- 关键词：树突状细胞肿瘤微环境免疫治疗
