胡仕良
- 作品数：9 被引量：35H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项陕西省重大科技创新专项计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 西农萨能羊脂肪酸合酶基因(FASN)启动子元件的定点突变分析
- 脂肪酸合酶(FASN)是哺乳动物脂肪酸合成过程中的关键酶，它利用乙酰-COA、丙二酸单酰-CoA和还原型辅酶Ⅱ(NADPH)催化饱和脂肪酸的合成，且与乳脂的分泌途径紧密相关。FASN在提高乳类的风味和品质方面具有重要作用...
- 李君罗军胡仕良许会芬姚大为
- 关键词：重叠延伸PCR定点突变
- 西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞LPL基因特征与功能的初步研究
- 脂蛋白脂酶（Lipoprotein lipase, LPL）能够催化水解血浆中循环的乳糜微粒和极低密度脂蛋白以及羊奶中的甘油三酯成分，释放出非酯化的游离脂肪酸和单酸甘油酯供组织利用。本研究采用反转录PCR和RACE技术，...
- 胡仕良
- 关键词：脂蛋白脂酶RT-QPCR乳腺上皮细胞
- 西农萨能羊Ets-1基因cDNA的克隆与序列分析
- Ets转录调控因子通过调节细胞的增生、分化、凋亡及细胞与细胞间的相互作用，在许多生理和病理过程中发挥重要作用。Ets转录因子受多种信号通路的调控，如：MAP激酶(Erk，p38和JAK)、Ca2+依赖的信号通路、TGF—...
- 石恒波罗军李君许会芬胡仕良
- 西农萨能奶山羊INSIG-1编码区的克隆、序列特征分析和组织表达被引量：8
- 2013年
- 【目的】克隆西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG-1)编码区,并对其进行序列特征分析和组织表达规律研究。【方法】提取西农萨能奶山羊总RNA,反转录cDNA后进行PCR反应,对克隆得到的INSIG-1序列进行生物信息学分析。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测INSIG-1在皮下脂肪、胸部肌肉、乳腺、肝脏、肾脏、心脏、肺、脾脏、瘤胃、小肠10个组织中的表达情况。【结果】获得西农萨能奶山羊INSIG-1基因1 014bp序列(Gen-Bank登录号JQ665439),其中编码区序列长度为831bp,编码276个氨基酸。西农萨能奶山羊INSIG-1编码区与牛(GenBank登录号NM_001077909)的亲缘关系最近,相似性达97%,编码氨基酸序列的相似性达90%,而与小鼠(GenBank登录号NM_025836)的亲缘关系较远。预测INSIG-1蛋白质分子量为29.70ku,理论等电点为8.99;IN-SIG-1蛋白质具有5个跨膜螺旋结构,且有较强的疏水性,不含信号肽。RT-qPCR检测结果表明,在西农萨能奶山羊10个组织中INSIG-1均有表达,其中在肝脏中的相对表达量最高,皮下脂肪、胸部肌肉、肺次之,在心脏中的相对表达量最低。【结论】克隆得到了西农萨能奶山羊的INSIG-1基因,并探明了其组织表达规律。
- 王慧罗军胡仕良席利萌张犁苹李芳孙雨婷
- 关键词：西农萨能奶山羊实时荧光定量PCR
- 不同能量蛋白水平日粮对妊娠后期西农萨能羊生产性能和血液生化指标的影响被引量：10
- 2013年
- 本试验旨在研究不同能量蛋白水平日粮对妊娠后期西农萨能羊生产性能和血液生化指标的影响,以筛选出妊娠后期母羊最适的营养水平。试验采用2×2两因子完全随机区组试验设计,将60只处于妊娠期90 d、体重(60±2.4)kg的经产母羊随机分成4组,每组15个重复。日粮干物质蛋白水平分别设为14%、16%;能量水平分别为12.2 MJ/kg.DM和13.3 MJ/kg.DM。结果显示,试验母羊血浆总蛋白和尿素氮含量均与粗蛋白摄入量成正比,血浆白蛋白的含量则与之相反(P>0.05)。低蛋白高能量(14%、13.3 MJ/kg.DM)试验组的母羊具有较高产羔率(227%)、成活率(94.118%),该组母羊所产羔羊具有最大平均初生重(4.10±0.14)kg该试验组初乳具有较高乳总干物质(21.73%)、乳脂(7.71%)和乳蛋白含量(9.30%)(P>0.05),较低的乳糖含量(P<0.05)。试验表明,蛋白、能量水平分别为14%、13.3 MJ/kg.DM的日粮为妊娠后期西农萨能母羊最优的日粮组合。
- 王慧王玉红魏安民胡仕良席利萌孙爽张犁苹罗军
- 关键词：妊娠后期能量蛋白水平
- 山羊Ets-1基因cDNA的克隆与序列分析被引量：1
- 2011年
- 根据GenBank已收录的牛(Bos taurus)、人(Homo sapiens)和小鼠(Mus musculus)等物种Ets-1基因序列的同源保守区域,设计特异性引物,采用RT-PCR和RACE技术,分离并克隆了西农萨能奶山羊(Capra hircus)Ets-1基因的cDNA序列。该序列全长2 263 bp(GenBank登录号HQ589338),包括5'UTR 331 bp,CDS 1 326bp和3'UTR 606 bp,编码441个氨基酸组成的蛋白质。核苷酸序列分析发现,山羊编码序列与牛、猪、人、小鼠等的相应序列同源性分别为98%、94%、92%和90%,3'UTR相应序列为96%、83%、81%和77%,5'UTR相应序列为98%、85%、82%和71%。氨基酸序列分析发现,山羊与牛、猪、人和小鼠的Ets-1的相似性较高,均在95%以上。蛋白质结构分析发现,其蛋白质分子量为50 340.8 D,等电点为5.08,具有典型的螺旋-转角-螺旋结构域,不存在跨膜结构,并且整个序列不含信号肽。
- 李君罗军许会芬胡仕良
- 关键词：山羊ETS-1基因克隆
- 奶山羊LXRα基因shRNA序列的筛选及腺病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2011年
- 【目的】构建针对奶山羊肝脏X受体α(Liver X receptorα,LXRα)基因的干扰腺病毒载体。【方法】根据奶山羊LXRα基因CDS区域设计小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA),分别构建pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA及pDsRed1/C1-LXRα载体,共转染HEK 293细胞,48h后观察其荧光蛋白表达量,筛选出具有明显干扰效应的shRNA。将具有明显干扰效应的shRNA载体与腺病毒骨架载体pAd/PL-DEST在LR ClonaseTMⅡ重组酶的作用下进行重组,经氨苄青霉素及氯霉素抗性筛选后获得重组腺病毒载体。将构建好的重组腺病毒载体经PacⅠ酶切线性化并回收后,转染HEK 293细胞,培养7～10d后收集细胞并反复冻融,收集细胞裂解液,反复扩增3次后,获得高滴度的重组腺病毒,测定其病毒滴度。【结果】①设计出了shRNA-490、shRNA-496、shRNA-509和shRNA-923 4条shRNA序列;②得到shRNA-490和shRNA-923 2条具有明显干扰效应的shRNA;③获得pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-490和pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-923 2个重组腺病毒载体,ScaⅠ酶切及测序结果均正确,2个腺病毒重组载体滴度均为5×108 PFU/mL。【结论】奶山羊LXRα基因重组shRNA腺病毒载体构建成功,为利用RNA干扰技术研究LXRα基因在乳腺上皮细胞中的功能奠定了基础。
- 钟瑜罗军王维胡仕良李君孙雨婷郝娟石恒波
- 关键词：RNA干扰腺病毒载体奶山羊
