程葆华
- 作品数：41 被引量：87H指数：5
- 供职机构：济宁医学院精神卫生学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学政治法律更多>>
- 共振能量转移(RET)技术的发展及应用
- 2012年
- 蛋白质间的相互作用是生命活动的基本形式之一,这种作用对细胞内信号转导,基因的转录激活等有重要意义。传统的检测方法存在损伤细胞结构、不能实时动态观察蛋白相互作用的缺点。RET技术的发展,解决了上述问题,为我们更好的研究蛋白质相互作用提供了强有力的工具。本文从FRET和BRET的基本原理、新型RET技术的发展等方面进行介绍,并将FRET和BRET进行比较,以便更好的选择研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法。
- 张宁程葆华陈京白波
- 关键词：RETFRET荧光蛋白
- 猫脑出血血肿周围组织糖代谢的^(18)F-FDGPET/CT研究被引量：7
- 2004年
- 目的:研究猫脑出血后血肿周围脑组织糖代谢的变化规律。方法:14只猫作为实验对象,取自体股动脉血1.0 ml,在立体定向仪下注入猫右侧基底节处,制作猫脑出血模型,模型组按脑血肿手术形成后的时间分为2、6、12、24、48、72、120 h共7组,每组2只;对照组2只,除不注血外,手术操作同模型组。每组动物行MR检查后,从股静脉注入18F-FDG 5 mCi,40 min后行PET/CT检查,并依据PET图像,对血肿周围脑组织进行放射计数的统计与分析。结果:①PET/CT能较清楚地显示猫脑正常结构及血肿、血肿周围组织的代谢变化;②从PET图像上观察,血肿形成2 h,血肿周围脑组织18F-FDG浓聚程度已发现明显减低,并明显低于镜像侧,术后6 h达最低水平,72 h开始明显恢复,120 h双侧接近一致并开始恢复至对照组水平;③模型组血肿周围脑组织18F-FDG放射计数值的分布呈现2-48 h低计数,72 h计数开始升高,120 h时双侧接近并开始恢复至对照组水平。结论:血肿形成后2-48 h双侧脑组织糖代谢率明显降低,且患侧明显低于镜像健侧,72 h开始恢复,120 h接近于对照组。
- 林祥涛刘树伟刘庆伟姚树展侯中煜宁国庆柳澄杨贞振山东省医学影像学研究所程葆华
- 关键词：脑出血糖代谢正电子发射计算机断层显像
- Apelin-17通过激活β1/2-arrestin-ERK1/2信号通路降低MPP+诱导内质网应激引起SH-SY5Y细胞的凋亡被引量：1
- 2021年
- 内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)与帕金森病(Parkinson’s disease,PD)发展进程密切相关。Apelin是已被证实具有明显神经保护作用的内源性多肽,但其保护机制尚不清楚。该研究探讨Apelin-17降低1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)对SH-SY5Y细胞凋亡的分子机制。实时无标记动态细胞分析(real time cell analysis,RTCA)实验数据表明,0.1μmol/L Apelin-17预处理2 h,MPP+诱导的SH-SY5Y细胞(Apelin-17预处理组)指数明显高于MPP+处理组(P<0.05),PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组的细胞指数显著低于Apelin-17预处理组(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,Apelin-17预处理组细胞凋亡率低于MPP+处理组(P<0.05),而PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组的细胞凋亡率高于Apelin-17预处理组(P<0.05)。CCK-8试剂盒检测结果显示,Apelin-17预处理组的细胞活力相对于MPP+处理组明显升高(P<0.05),与Apelin-17预处理组比较,PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组的细胞活力显著降低(P<0.05)。LDH检测数据表明,与MPP+处理组比较,Apelin-17预处理组的乳酸脱氢酶释放量显著降低(P<0.05),而PD98059与β1/2-arrestin siRNA实验组乳酸脱氢酶释放量显著高于Apelin-17预处理组(P<0.05)。Western印迹结果证明,与MPP+处理比较,Apelin-17预处理组显著降低了内质网应激反应中PERK独立介导的信号通路中p-eIF2α、ATF4、CHOP的表达水平(P<0.05),与凋亡密切相关的切割胱天蛋白酶12(cleaved-caspase-12)蛋白表达也显著下调,而抑制细胞凋亡相关的Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。同时,与促进细胞增殖密切相关蛋白Phospho-pERK1/2的表达水平显著升高(P<0.05)。ERK1/2信号通路抑制剂PD98059加入Apelin-17预处理后会反转上述实验现象,同时加入β1/2-arrestin siRNA后,Phospho-pERK1/2与Bcl-2蛋白表达水平相较于Apelin-17预处理组显著降低(P<0.05),而CHOP的表达水平升高(P<0.05)。综上所述,本文的研究结果表明,Apelin-17通过β1/2-arrestin信号通�
- 姜云璐王丹王春梅刘苏莹陈京程葆华黄根泉
- 关键词：内质网应激
- Apelin调控内质网应激的研究进展
- Apelin(APJ endogenous ligand)是孤儿G蛋白偶联受体-血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白(recep-tor protein related to the angiotensin-Ⅱprotein o...
- 朱俊鸽程葆华王春梅
- 关键词：内质网应激蛋白表达
- Apelin-13对局灶性脑缺血-再灌注损伤大鼠行为和认知功能的影响被引量：3
- 2017年
- 目的观察侧脑室注射Apelin-13对脑缺血-再灌注大鼠模型(ischemia/reperfusion,I/R)行为学和认知功能的影响。方法利用改进的Longa法制作大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。将SD大鼠随机分为假手术组、MCAO模型组、Apelin-13干预组,每组6只,疲劳转棒检测大鼠行为学变化,Morris水迷宫检测大鼠认知功能变化,免疫印迹检测脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和Ras基因家族成员A(ras homolog gene family member A,RhoA)改变情况,ELISA检测乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)水平。结果与假手术组相比较,MCAO模型大鼠转棒时间明显下降,认知功能受损,逃避潜伏期增加,穿台次数减少,BDNF表达下降,而RhoA表达和AChE活性升高,差异具有统计学意义(均P<0.05);与MCAO模型大鼠相比较,Apelin-13干预组运动功能改善,转棒时间明显延长,认知功能提升,逃避潜伏期降低,穿台次数增加,并抑制了BDNF表达的降低和RhoA表达的升高,减轻了AChE活性升高,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论侧脑室注射Apelin-13可改善局灶性脑缺血-再灌注损伤大鼠行为和学习记忆功能,其机制可能是通过上调海马BDNF表达、抑制RhoA表达和AChE活性来实现。
- 白波程葆华王春梅潘衍有陈京
- 关键词：缺血性脑卒中APELIN-13脑缺血-再灌注损伤行为学
- D-β-羟基丁酸对6-羟基多巴引起的PC12细胞线粒体功能障碍的影响
- 本文观察了D-β-羟基丁酸(D-β-hydroxybutyrate,DβHB)对6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)引起的PC12细胞线粒体功能障碍的影响。首先给予PC12细胞浓度为DβHB(...
- 程葆华刘树伟邴国英李振平
- 炎性因子在脑缺血——再灌注不同时期的基因表达被引量：6
- 2014年
- 目的 探讨白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和细胞间黏附分子1（ICAM-1）在脑缺血一再灌注不同时期的基因表达。方法 将Wistar大鼠随机分为假手术组和脑缺血30 min再灌注6 h（IR6h）、12h（IR12h）、24 h（IR24h）、48 h（IR48h）组。动物模型采用线栓法制备大鼠中动脉栓塞法,用RT-PCR法检测脑缺血一再灌注不同时间点IL-1β、TNF-α及ICAM-1的表达。结果 IL-1β、TNF-α及ICAM-1在假手术组脑组织内低水平表达。IL-1βmRNA的表达在脑缺血—再灌注6 h后即明显增高,12 b后表达开始减弱,24~48 h呈低水平增高。TNF-α在脑缺血—再灌注6 h表达开始上升,24 h达到高峰,48 h后开始下降。ICAM-1脑缺血—再灌注6 h表达开始升高,24 h达到高峰,48 h后仍维持较高水平。结论 炎症因子参与了脑缺血—再灌注性损伤,且具有明显的时间规律。
- 辛青程葆华王琳陈京白波
- 关键词：脑缺血炎症反应神经损伤
- Apelin-13对脑缺血再灌注大鼠行为学及脑内YAP蛋白表达的影响被引量：5
- 2015年
- 目的研究侧脑室注射Apelin-13对脑缺血再灌注损伤大鼠神经缺损程度及脑内（Yes—asso—ciatedprotein，YAP）表达的影响。方法健康成年Wistar雄性大鼠，采用双盲法随机分为对照组、脑缺血一再灌注组和Apelin-13干预组，每组3只大鼠。给予大鼠禁食禁水12h后，采用线栓法制作大鼠脑缺血一再灌注模型，缺血1h，再灌注24h，Apelin-13干预组于再灌注后经侧脑室注射Apelin-13。检测大鼠神经功能缺损程度进行行为学评定，取材进行TTc染色检测大鼠脑梗死体积，蛋白免疫印迹法检测大鼠脑组织各部位YAP的表达变化。结果与脑缺血再灌注组相比[（2．67±0．33）分]，Apelin-13干预组大鼠神经缺损评分[（1．67±0．33）分]有所降低，症状减轻，差异有统计学意义（P〈0．05），脑梗死体积减小[（30．60±1．42）％vs（23．70±2．20）％，P〈0．05]，脑组织各部位YAP表达均上调，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Apelin-13通过调节YAP的表达在大鼠脑缺血一再灌注损伤中发挥治疗效果，具有一定的神经保护作用。
- 闫晓鸽丁良才王春梅程葆华陈京白波
- 关键词：APELIN-13脑缺血-再灌注损伤行为学
- G蛋白偶联受体寡聚化检测技术——共振能量转移技术和蛋白质片段互补技术被引量：1
- 2012年
- 蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interactions,PPIs)在细胞内信号途径的分子机制中具有重要作用,文章叙述了活细胞中以非侵入性荧光和生物发光为基础检测特异性PPIs的方法如FRET、BRET、BiFC和BiLC,上述技术广泛应用于G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)寡聚化的研究,单独或联合应用这些新技术是研究两个蛋白或多个蛋白PPIs的最佳方法,文章描述了上述生物技术的最新进展及其优缺点,着重阐述在PPIs方面的应用。
- 程葆华白波亚白柳陈京
- 关键词：G蛋白偶联受体
- NMDA受体在酒精成瘾复发中的作用
- 目的 研究NMDA受体在酒精成瘾治疗过程中酒精撤退后复饮中的作用.方法 C57BL/6小鼠以蔗糖撤退配合乙醇(0％、5％、10％、12.5％、15％)诱导酒精主动摄取,记录基础摄入量,之后进行乙醇蒸汽被动吸入(5d)+撤...
- 武菲程葆华白波
- 关键词：酒精成瘾NMDA受体复发
