石淙
- 作品数：16 被引量：62H指数：4
- 供职机构：南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：江西省科技支撑计划项目江西省自然科学基金江西省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 体外定点突变PCR法构建abl T315I突变的重组质粒标准品被引量：1
- 2013年
- 目的利用聚合酶链反应(PCR)定点突变技术构建含人类abl基因第6号外显子片段的野生型及含T315I突变型重组质粒,作为检测abl T315I基因突变的阳性对照和阴性对照标准品。方法先设计包括突变位点的两对引物,以健康人外周血基因组DNA为模板,扩增获得野生型和突变型abl基因第6号外显子片段,将其插入pSG5M-flag载体质粒中,并将所获重组质粒分别进行酶切与测序鉴定,通过紫外分光光度计检测标本的浓度和纯度。结果DNA测序表明在预期位点上发生突变,abl基因第315位氨基酸密码子由苏氨酸(Thr)残基突变为异亮氨酸(Ile)残基,所构建abl基因野生型和突变型质粒,经酶切和测序鉴定与目的片段完全一致。结论PCR技术诱导定点突变准确、高效。所构建含野生型和T315I突变的abl基因重组质粒,可为检测abl基因T315I突变提供阴性和阳性对照以及质控品,同时也为T315I突变的相关研究奠定了基础。
- 石淙张长林简正伟江梅闻芳万腊根
- 关键词：定点突变阳性对照
- Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类和手工分类的比较被引量：1
- 2013年
- 目的探讨Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类和手工分类结果的差异,以验证该仪器白细胞分类结果的准确性。方法取Sysmex XE-2100D血细胞分析仪检测后未触犯推片规则的20份病人标本,重复检测2次。对每份标本分别制作2张血涂片,由两位有经验的检验人员进行人工分类,每张涂片分类200个细胞。比较仪器分类的平均值是否在手工分类结果 99%可信区间内,在可信区间内为合格。结果Sysmex XE-2100D进行中性粒细胞(N%)、淋巴细胞(L%)、单核细胞(M%)分类时合格率均为90%;进行嗜酸性粒细胞(E%)和嗜碱性粒细胞(B%)分类时其合格率分别为95%和75%。结论Sysmex XE-2100D血细胞分析仪进行白细胞分类准确性较高,对于未触犯推片规则的分类结果可以直接发报告。
- 简正伟石淙张长林江梅万腊根
- 关键词：白细胞分类手工法
- 检测PML/RARα基因的双重荧光定量PCR方法的建立被引量：2
- 2012年
- 目的建立在一个反应体系中同时检测融合基因PML/RARα和内参基因ABL的双重荧光定量PCR方法。方法从DNA聚合酶含量、Mg2+浓度和引物浓度等方面进行优化,建立检测PML/RARα和ABL基因双重荧光定量PCR体系,从分析灵敏度,批内、批间精密度以及检测临床样本阳性率等方面对双重荧光定量PCR反应体系进行性能评价,并同时和北京思尔成公司荧光定量PCR试剂盒进行比较,分析两者的一致性。结果成功构建双重荧光定量PCR反应体系,检测质粒灵敏度为103copies/ml,检测NB4细胞的灵敏度为10-3,反应体系批内、批间精密度Ct值的变异系数CV都小于5%,检测20例确诊为APL病人,其检测阳性率,和北京思尔成公司的PCR反应试剂一致。结论成功开发出稳定的双重荧光定量PCR试剂盒,其操作简单,成本低,误差小,能够有效地用于APL分子生物学分型诊断、用药指导、预后观察及MRD监测。
- 江梅万腊根简正伟石淙张长林
- 关键词：荧光定量PCRPML/RARΑABL急性早幼粒细胞白血病
- 江西省急性髓系白血病NPM1和FLT3-ITD基因突变分析
- 目的 检测急性髓系白血病患者NPM1和FLT3-ITD基因突变情况,分析其突变和临床之间的关系.方法 提取患者骨髓标本DNA,采用PCR技术检测FLT3-ITD和NPM1基因突变情况,分析基因突变与白血病FAB分型关系....
- 简正伟石淙闻芳万腊根张长林
- 关键词：急性髓系白血病
- PCR-RFLP联合AS-PCR检测abl基因T315I突变方法的建立
- 目的：建立聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)联合等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)检测abl基因T315I点突变的方法,以提高abl基因T315I基因突变的检出率.
方法：通过构建ab...
- 万腊根石淙简正伟江梅闻芳刘淑媛杨江慧徐群飞张长林
- 关键词：慢性粒细胞白血病基因突变
- 文献传递
- 酶切富集AS-PCR法检测bcr/abl融合基因T315I点突变及临床应用
- 目的: 慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)是一种起源于造血干细胞的克隆性骨髓增殖性肿瘤,90％以上患者可检测到特征性的Ph染色体及其分子标志bcr/abl融合基因,Ph...
- 石淙
- 关键词：BCR/ABL融合基因基因突变慢性粒细胞白血病
- 文献传递
- 检验危急值应用的调查与分析被引量：11
- 2014年
- 目的寻找更加科学的危急值项目和危急值界限。方法分析统计各危急值项目发生率、构成比及各临床科室的分布情况;对临床医师调查的结果进行分析讨论。结果危急值占总测试数的发生率为0.056%;其中发生率或构成比在前5位的依次是K+、CK-MB、血骨髓和CSF培养、GLU、APTT;危急值在各科室的分布情况与其疾病谱相一致;通过与临床医师讨论删除WBC作为危急值项目,增加Na+作为危急值项目,同时对部分危急值项目的界限进行了修改。结论应密切联系临床,对危急值项目及其界限进行调查评估,不断总结经验,做到持续改进。
- 万腊根万小菊杨江会刘淑媛石淙
- 关键词：危急值发生率构成比
- 江西省急性髓系白血病NPM1和FLT3-ITD基因突变分析被引量：2
- 2015年
- 目的检测急性髓系白血病患者NPM1和FLT3-ITD基因突变情况,分析其突变和临床之间的关系。方法提取患者骨髓标本DNA,采用AS-PCR技术检测FLT3-ITD和NPM1基因突变情况,分析基因突变与白血病FAB分型关系。结果在187例患者中,检测出52例NPM1基因突变,突变率为27.8%;有28患者被检测出FLT3-ITD基因突变,突变率为14.97%;同时具有NPM1和FLT3-ITD基因突变的有13例,突变率为6.95%。其中NPM1基因突变在M5、M2中较为多见,而FLT3-ITD基因突变在M1、M4中较为多见。结论检测NPM1和FLT3-ITD基因突变可以给临床治疗提供指导意义。
- 简正伟石淙闻芳万腊根张长林
- 关键词：急性髓系白血病
- 一种检测多种NPM1突变体的ARMS-PCR方法的建立被引量：3
- 2013年
- 本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3'末端的碱基与突变体A、B、C、D匹配,而与野生型NPM1不匹配;通过条件优化,建立检测多种NPM1突变的ARMS-PCR的方法。通过对该方法的检测范围、灵敏度的评估及与直接测序法的比较,判断该方法的可行性。结果表明,成功构建NPM1基因野生型和突变型A、B、C、D 5种重组质粒,经测序鉴定和目的片段一致。ARMS-PCR方法可以检测到ABCD 4种突变体,检测范围在103copies/ml-109copies/ml,其灵敏度为0.01%,而当突变体含量低于10%时采用直接测序则检测不出突变。结论:本研究建立了一种可以检测NPM1 4种高频突变的ARMS-PCR方法。该方法灵敏度高,可以检出95%以上的突变,为临床检测NPM1基因突变提供一种新型的检测方法。
- 简正伟徐芬石淙万腊根张长林
- 关键词：急性髓系白血病
- 血液检验检测系统的性能验证
- 本文就血液检验检测系统的性能进行了研究，详细阐述了包括血细胞分析仪、尿沉渣分析仪、尿干化学分析仪、血液凝固分析仪等血液检测仪器在内的性能，验证了这些仪器的精密度。
- 万腊根石淙张世锟胡意
- 关键词：血液检验检测仪器性能分析精密度
- 文献传递
