甘振磊
- 作品数：74 被引量：452H指数：11
- 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：贵州省农业攻关项目贵州省农业科技攻关项目贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪博卡病毒的研究进展被引量：1
- 2012年
- 猪博卡病毒属于细小病毒科细小病毒亚科博卡病毒属,单链线性DNA病毒。该病毒于2009年在瑞典患有仔猪断奶后多系统衰竭综合征的猪群中被发现。在我国,多省市发病猪场也相继检测出猪博卡病毒。猪博卡病毒作为一种新型病毒,人们对其的研究仍处于初步探索阶段。文章结合现有的文献资料及研究成果,分别从猪博卡病毒的发现、分子特征、流行病学、临床症状、诊断方法以及防治方法等方面进行了阐述,以期为有效防控规模化猪场猪博卡病毒的发生提供一定的理论依据。
- 郝飞汤德元罗险峰李春燕曾智勇甘振磊王凤刘建
- 禽流感病毒基因组及检测方法概述被引量：1
- 2011年
- 禽流感(Avian Influenza,AI)是A型流感病毒引起的一种禽类传染病,同时也是一种人和动物之间的高度传染性疾病,不但造成了养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全构成了威胁。因此,对禽流感病毒基因组的研究显得十分重要,以为快速、准确的基因诊断等检测技术方法奠定基础。近年来,禽流感病毒检测技术发展迅速,本文就AIV基因组及其检测方法进行了综述。
- 刘志杰李如举周莉曾智勇汤德元王彬甘振磊王凤
- 关键词：禽流感病毒基因组
- 猪瘟病毒贵州流行株E2基因原核表达及其免疫原性的研究被引量：7
- 2011年
- 本研究根据GenBank登录的猪瘟病毒Shimen和C株的E2基因序列设计1对特异引物,采集来自贵州的疑似猪瘟病死猪组织,提取总RNA,进行RT-PCR扩增,将扩增产物测序后进行核苷酸序列比较分析。并将RT-PCR产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-E2,经双酶切鉴定、核苷酸序列分析后,将E2基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建猪瘟病毒E2基因原核表达质粒pET-32a-E2,将构建好的原核表达质粒pET-32a-E2转化至宿主菌BL21中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳、Western blot分析,得到了约58ku的条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化目的蛋白,将目的蛋白加入弗氏佐剂免疫小鼠,免疫后采血检测抗体,结果显示目的蛋白能诱导小鼠产生一定抗体水平,该研究为猪瘟亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 汤德元李春燕罗险峰黄涛曾智勇甘振磊王凤
- 关键词：猪瘟病毒E2基因原核表达免疫原性
- 猪细小病毒病诊断技术研究进展被引量：7
- 2012年
- 猪细小病毒病是由猪细小病毒(PPV)感染引起的猪的重要传染病之一。该病主要感染母猪特别是初产母猪及血清学阴性经产母猪,导致母猪流产、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及病弱仔猪等,而感染母猪本身无明显症状。该病呈地方性流行,严重地影响着养猪业的发展。由于猪细小病毒常与其他病毒如猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染,导致断奶仔猪多系统衰竭综合征。临诊上本病与猪伪狂犬病、猪乙型脑炎和猪布鲁氏菌病的症状极为相似,故仅靠临诊确诊较为困难。目前对本病的诊断方法主要有临床诊断、病原学诊断、血清学诊断以及分子生物学诊断等。特别是分子生物学诊断方法以其灵敏度高、特异性强而被人们所重视。主要针对该病近年来诊断方法的研究进展进行阐述,从而为猪细小病毒病的诊断提供参考。
- 刘建汤德元罗险峰李春燕甘振磊王凤郝飞
- 关键词：猪细小病毒分子生物学诊断
- 规模化猪场主要病毒性腹泻病的临床表现及病理变化
- 2012年
- 对规模化猪场危害最大的病毒性腹泻病主要有轮状病毒感染、猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻3种。对于该类疫病,猪群有时单一感染其中的某一病毒致病,有时混合感染多种病毒致病,但这些传染病一旦在规模化猪场暴发,就很难得到有效控制,将会带来严重的经济损失。对规模化猪场的主要病毒性腹泻病的临床表现及病理变化进行了综述,以期为规模化猪场预防和控制该类疫病的发生提供一些参考依据。
- 郝飞罗险峰汤德元曾智勇李春燕甘振磊王凤刘建
- 关键词：规模化猪场病毒性腹泻病病理变化
- 猪伪狂犬病基因工程疫苗的研究进展被引量：6
- 2013年
- 猪伪狂犬病(PR)是由疱疹病毒目伪狂犬病毒引起的多种家畜和野生动物发病的一种急性传染病。猪感染后表现为仔猪神经症状、严重的呼吸道疾病以及母猪发生流产、死产和产仔数下降等症状。现阶段该病存在潜伏感染、高感染率和高发病率等特点,给其防治带来了巨大困难,同时给世界养猪业造成了巨大的损失。在该病的防治过程中,疫苗免疫接种起着至关重要的作用。本文对当今广泛应用的猪伪狂犬病基因工程疫苗的研究现状和进展进行综述,以期为猪伪狂犬病的预防、净化和根除提供参考。
- 郝飞汤德元曾智勇李春燕罗险峰甘振磊刘建王洪光
- 关键词：伪狂犬病病毒基因工程疫苗
- 长白猪IL-4基因克隆及真核表达载体的构建
- 2010年
- 将长白猪外周血淋巴细胞在刀豆素A(ConA)的刺激下培养24h后,提取其总RNA,应用RT-PCR技术扩增白细胞介素-4(IL-4)cDNA,克隆到pMD19-T载体并测序。将构建好的载体双酶切并回收目的片段与pcDNA3.1(+)载体连接并转化入Top10中构建真核表达载体,真核表达载体经双酶切及测序结果表明:克隆的IL-4cDNA全长为411个碱基,其中ORF为402个碱基,编码133个氨基酸,与GenBank公布的猪IL-4比对同源性为100%,从而证实成功构建了长白猪IL-4cDNA真核表达载体。
- 王彬汤德元李春燕曾智勇王凤甘振磊周厚品
- 关键词：长白猪真核表达载体
- 伪狂犬病病毒Guizhou-DY株gE基因主要抗原表位区原核表达及免疫原性研究
- 2013年
- 根据GenBank公布的伪狂犬病病毒GDSH株(EF552427)的gE基因序列设计1对特异引物,对伪狂犬病病毒Guizhou-DY分离株的gE基因进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-TgE636,经双酶切鉴定、核苷酸序列分析后,将gE基因主要抗原表位区亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建原核表达质粒pET-32a(+)-gE636,并将其转化至BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳、Western blot分析,得到了约42.7 ku的条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化目的蛋白,将目的蛋白加入弗氏佐剂免疫小鼠,免疫后采血检测抗体,结果显示目的蛋白能诱导小鼠产生一定的抗体,该研究为伪狂犬病亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 郝飞汤德元李春燕曾智勇罗险峰甘振磊刘建王洪光
- 关键词：伪狂犬病病毒GE基因原核表达免疫原性
- LAMP技术在猪传染病检测中的应用被引量：2
- 2013年
- 环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,简称LAMP)技术是利用4个特殊设计的引物和具有链置换活性的DNA聚合酶,在恒温条件下特异、高效、快速地扩增DNA的新技术。该技术在1h内能扩增出109个靶序列拷贝,扩增产物是一系列反向重复的靶序列构成的茎环结构和多环花椰菜样结构的DNA片段的混合物。LAMP技术以其特异性强、灵敏度高、快速、准确和操作简便等优点在核酸的科学研究、疾病的检测与预防以及动物胚胎的性别鉴定等领域得到了日益广泛的应用。本文主要综述了LAMP技术在猪传染病检测中的作用,使之能为该技术的深入研究和应用提供参考。
- 李春燕汤德元张晓杰曾智勇罗险峰甘振磊
- 日本乙型脑炎病毒NS1基因及其疫苗的研究进展被引量：4
- 2012年
- 日本乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的严重的人畜共患传染病。乙型脑炎病毒的三种糖基化蛋白PrM、E和NS1是其主要免疫保护性抗原,其中PrM和E蛋白是日本乙型脑炎病毒的结构蛋白,其结构和相关疫苗研究的报道较多。NS1蛋白是日本乙型脑炎病毒的非结构蛋白,其主要参与病毒复制的早期阶段,推测可能参与病毒组装和释放。可诱导补体依赖性溶细胞反应,不能产生中和抗体,能诱发机体在非中和性抗体存在的情况下产生保护性免疫。在接种乙脑病毒的细胞的细胞内、细胞表面及上清液中均含有大量的NS1蛋白。对小鼠接种NS1蛋白或NS1蛋白特异性抗体,均能让小鼠产生对乙脑病毒感染的保护性免疫作用。本文主要就乙型脑炎病毒非结构基因NS1及其免疫疫苗的研究进展进行综述,为其更进一步深入研究JEVNS1基因及其相关疫苗奠定基础。
- 王凤汤德元李春燕曾智勇甘振磊刘建郝飞
- 关键词：日本乙型脑炎病毒NS1基因相关疫苗
