王玉珍
- 作品数:5 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国科学院水生生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 应用噬菌体展示技术研究对虾白斑综合症病毒(WSSV)的结构蛋白
- 对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)是目前对虾养殖业最主要的病毒性病原之一。自上世纪90年代初发现以来,该病毒以其宿主范围广、毒力强、致死亡率高、传播速度快等特点,给全世界的...
- 王玉珍
- 关键词:对虾白斑综合症病毒噬菌体展示技术结构蛋白单链抗体
- 利用噬菌体展示技术制备识别酵母RNR3原核表达片段的单链抗体
- 2009年
- 选取酵母细胞RNR3蛋白序列中高保守片段:145-298位氨基酸序列,命名为RNR3h进行原核表达.并利用噬菌体展示技术从非免疫小鼠噬菌体展示抗体库中淘选到能与该原核表达产物特异性结合的单链抗体.得到的3种单链抗体均识别原核表达片段的空间抗原位点.为寻找酵母RNR1和RNR3的诱导表达水平与DNA损伤信号的相互关系,将真核生物RNRs发展为检测环境化学致癌物DNA损伤效应的生物标志物进行了尝试.
- 李佳宋波王玉珍饶瑜戴和平
- 关键词:噬菌体展示技术单链抗体
- 一种抗对虾白斑综合症病毒(WSSV)线性抗原表位单链抗体的筛选被引量:1
- 2008年
- 对虾白斑综合症病毒(WSSV)是全世界对虾养殖业最主要的病原体之一,虽然对该病毒的研究已较为深入,但目前仍无有效的防治方法。本研究应用噬菌体展示技术,构建了抗变性WSSV的单链抗体噬菌体展示文库,分别以WSSV病毒粒子和原核表达的囊膜蛋白VP28为靶分子对该文库进行淘选。经过数轮淘选后,得到5个能特异识别WSSV的单链抗体,且首次获得了能特异识别WSSV线性抗原表位的单链抗体P75E8。并通过免疫胶体金电镜分析,对5种单链抗体对应在病毒粒子上的表位进行了定位。为获取识别多种WSSV抗原的抗体提供了新的方法路线,也为获取特异性识别线性表位的单链抗体提供了一种新的淘选技巧。
- 王玉珍张晓华肖囡张敏戴和平
- 关键词:噬菌体展示技术
- 噬菌体展示随机十肽库的构建及抗WSSV单链抗体A1的模拟抗原表位的淘选和鉴定被引量:1
- 2006年
- 本实验以pCANTAB5E噬菌粒为载体,成功构建了较高容量的噬菌体展示随机十肽库,并将其应用于抗原模拟表位的淘选和鉴定。将一种特异识别对虾白斑综合症病毒(Whitespotsyndromevirus,WSSV)的单链抗体A1对十肽库和十五肽库分别进行淘选,结果得到一系列能与单链抗体A1特异性结合的阳性克隆。将这些阳性克隆所编码的多肽氨基酸序列与已知的单链抗体A1的抗原WSSV388片段氨基酸序列做比对,发现多数阳性多肽序列都与WSSV388片段序列的C端一处K????R??R?QS的氨基酸片段相似,由此推论单链抗体A1的模拟抗原表位可能是由该不连续氨基酸片段所构成的构象表位,而非线性表位。研究结果表明,噬菌体展示随机肽库技术是一种用于研究抗原表位结构的有效方法,有助于进一步探讨WSSV的结构蛋白的构象及功能,以及相应单链抗体与细胞受体相互作用的机理。
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- 关键词:模拟抗原表位
- 对虾白斑综合症病毒结构蛋白60B的原核表达和其基本氨基酸序列的初步分析
- 2007年
- VP60B是对虾白斑综合症病毒(WSSV)中含量很少的一个结构蛋白。VP60B的一段序列与腺病毒纤维蛋白(Adenovirus type 5 fiber protein)的knob domain的一段序列具有同源性。本试验将VP60B基因克隆到原核表达系统中,在低温条件下,诱导了VP60B蛋白的表达。结果显示VP60B在该系统主要是以包含体的形式存在。原核表达的VP60B不能被鼠抗WSSV多克隆血清所识别,预示该蛋白的免疫原性较弱。通过对VP60B氨基酸序列的分析,发现有一个跨膜区,这预示着该蛋白可能位于WSSV病毒的囊膜上。
- 李佳肖囡王玉珍袁丽徐涛张晓华戴和平
- 关键词:原核表达