王春毅
- 作品数：27 被引量：61H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Ad-delE1b55kD-shRNA/Survivin-EGFP的构建及鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的构建特异性强,转染率高,针对人Survivin进行RNA干扰的肿瘤增殖型腺病毒载体(Ad-delE1b55kD-shRNA/Survivin-EGFP)。方法将针对人Survivin的shRNA的基因序列及EGFP基因序列克隆至肿瘤增殖型腺病毒穿梭质粒pAd-delE1b55kD;HEK-293细胞中包装出毒得到重组腺病毒Ad-delE1b55kD-shRNA/Survivin-EGFP并测序鉴定。用重组腺病毒感染结肠癌细胞HT-29并检测转染率,用RT-PCR和Westernblot分别检测转染后的HT-29细胞中SurvivinmRNA和蛋白表达的变化。结果序列测定证明针对人Survivin的shRNA序列及EGFP序列被成功构建到肿瘤增殖型腺病毒载体中;Ad-delE1b55kD-shRNA/Survivin-EGFP对结肠癌细胞HT-29的转染效率显著高于增殖缺陷型腺病毒载体和脂质体载体(P<0.01);而对肝细胞的转染率则显著低于对结肠癌细胞株HT-29的转染(P<0.01)。与复制缺陷型腺病毒载体和脂质体载体比较,转染Ad-delE1b55kD-shRNA/Survivin-EGFP后,HT-29细胞中SurvivinmRNA拷贝数及蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论构建成功携带针对人Survivin的shRNA的肿瘤增殖型腺病毒载体Ad-delE1b55kD-shRNA/Sur-vivin-EGFP,其能选择性地高效转染结肠癌细胞株HT-29并有效干扰Survivin,且较之增殖缺陷型腺病毒载体和脂质体载体具有更高的干扰效率。
- 王春毅傅仲学
- 关键词：RNA干扰存活素
- 结直肠肿瘤择期手术后应用鼻胃管胃肠减压有效性与安全性的meta分析被引量：3
- 2012年
- 目的探讨结直肠肿瘤择期手术后应用鼻胃管胃肠减压的有效性和安全性。方法全面检索国内外公开发表的评价结直肠肿瘤择期手术后鼻胃管胃肠减压的随机对照试验(RCTs)文献,根据标准纳入文献,提取临床指标,进行meta分析。结果最终纳入6项RCTs(736例),大部分试验的病例组特征上具有可比性。非鼻胃管胃肠减压(non-NGD)组较鼻胃管胃肠减压(NGD)组胃肠功能恢复时间短[加权均数差WMD=-1.15,95%CI(-1.87～-0.43),P=0.002],住院时间少[WMD=-2.43,95%CI(-3.75～-1.10),P=0.000 3],虽呕吐发生多[RR=2.12,95%CI(1.19～3.78),P=0.01],但肺部感染发生少[RR=0.17,95%CI(0.03～0.95),P=0.04]。两组发生伤口感染[RR=0.76,95%CI(0.29～1.99),P=0.58]和鼻胃管再置[RR=1.85,95%CI(0.89～3.88),P=0.10]差异无统计学意义。结论结直肠肿瘤手术后不应用鼻胃管是安全的,常规应用鼻胃管并不能给患者带来更多益处,反而会增加并发症(如肺部感染)的发生。
- 刘洪王春毅钱江傅仲学
- 关键词：结直肠肿瘤直肠结肠切除术META分析
- 多原发结直肠癌63例临床分析被引量：3
- 2010年
- 目的探讨多原发结直肠癌(MPCC)的临床病理特点、诊断、治疗及预后。方法回顾性总结本院63例MPCC患者的临床资料,分析肿瘤发生、分布及治疗与预后。结果 MPCC占同期收治的结直肠癌的2.1%(63/3021),其中同时性结直肠癌(SC)31例(49.2%),异时性结直肠癌(MC)32例(50.8%)。男女比例为2.5∶1。癌灶分布以直肠、乙状结肠为多。病理类型以腺癌为多,占77.8%(105/135);黏液腺癌次之,占13.3%(18/135)。TNM分期以Ⅱ期最多,占47.4%(64/135)。术前纤维结肠镜诊断34例(54.0%)。SC组术前纤维结肠镜诊断12例(38.7%),术中探查诊断12例(38.7%);MC组术前纤维结肠镜诊断22例(68.7%),术中探查诊断2例(6.25%)。SC组术后5年生存率为45%(9/20),MC组首次癌术后5年生存率为72.4%(21/29)。结论 MPCC与结直肠腺瘤之间有密切关系,应重视纤维结肠镜随访,对合并的腺瘤或息肉,应及时治疗,防止腺瘤癌变,减少异时癌的发生。诊断上对于结直肠癌患者应着重强调术前纤维结肠镜活检;治疗上应争取早期行根治性切除术。
- 董纯秀彭波刘月程勇王春毅
- 关键词：多原发癌结直肠癌预后
- 肿瘤增殖型腺病毒介导的shRNA干扰结肠癌细胞HT-29 Survivin基因的时效性研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨携带针对人Survivin的shRNA的肿瘤增殖型腺病毒Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP介导的RNA干扰对结肠癌细胞HT-29中Survivin基因的时效性。方法用Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP转染结肠癌细胞株HT-29(以携带相同shRNA的增殖缺陷型腺病毒和脂质体载体为对照),于转染后1d、7d、14d、28d分别检测其携带的外源性EGFP基因的表达及被转染HT-29细胞中Survivin mRNA和Survivin蛋白的表达。结果在转染后第7d,实验各组的外源性EGFP基因均有较高表达,Survivin mRNA及Survivin蛋白的表达被抑制,Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP组的EGFP基因表达明显高于其他两种载体;在转染后第14d,后二者EGFP基因表达、Survivin mRNA及Survivin蛋白表达的抑制作用显著下降,而Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP组的上述作用仍然很强;转染后28d,后二者EGFP基因表达、Survivin mRNA及Survivin蛋白表达的抑制作用基本消失,而Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP组仍然保持很高的EGFP表达率和RNA干扰效率。结论Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP介导RNA干扰能长时间高效沉默结肠癌细胞HT-29中的Survivin基因。
- 王春毅傅仲学
- 关键词：RNA干扰SURVIVIN结肠癌
- 高选择性RNA干扰抑制survivin基因对在体结肠癌的治疗作用被引量：3
- 2013年
- 目的探讨肿瘤增殖型腺病毒Ad-delE1b55KD-shRNA/survivin-EGFP介导的针对survivin的高选择性RNA干扰对在体结肠癌细胞HT-29增殖和凋亡的影响。方法用携带针对人survivin的shRNA的肿瘤增殖型腺病毒Ad-delE1b55KDshRNA/survivin-EGFP转染结肠癌细胞HT-29裸鼠移植瘤模型,以携带相同shRNA的复制缺陷型腺病毒和脂质体载体为对照,检测移植瘤体变化,以及TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率。结果 Ad-delE1b55KD-shRNA/survivin-EGFP介导的高选择性RNA干扰使结肠癌裸鼠移植瘤的瘤体减小、移植瘤细胞凋亡率显著增加,且高于目前常用的复制缺陷型腺病毒载体和脂质体载体(P<0.05)。结论 Ad-delE1b55KD-shRNA/survivin-EGFP介导的高选择性RNA干扰能高效地诱导结肠癌细胞凋亡并抑制其增殖。
- 王春毅傅仲学
- 关键词：SURVIVIN结肠肿瘤
- 慢病毒介导DLC-1基因转染SW480细胞系的β-catenin表达水平变化及意义被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨慢病毒介导肝癌缺失基因-1(Deleted in liver cancer-1,DLC-1)转染结肠癌SW480细胞系对β-catenin表达水平的影响及意义。方法:用携带DLC-1基因的重组慢病毒转染结肠癌SW480细胞系;采用Real-time PCR及Western blot法检测SW480细胞系中DLC-1及β-catenin的表达水平,MTT法检测SW480细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Transwell小室法检测SW480细胞迁移和侵袭能力。结果:DLC-1重组慢病毒转染SW480细胞系中,过表达的DLC-1下调β-catenin表达水平,抑制SW480细胞的增殖、迁移及侵袭,并诱导其凋亡。结论:DLC-1基因可能通过下调β-catenin的表达来调节结肠癌SW480细胞系的增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为,DLC-1在结肠癌的发生、发展中可能发挥了十分重要的作用。
- 王春毅王佳林刘洪傅仲学
- 关键词：DLC-1结肠癌
- 肿瘤选择增殖型腺病毒载体研究进展
- 2006年
- 近年来,人们利用肿瘤细胞与正常细胞之间某些生物学性状的差异,构建了肿瘤选择增殖型腺病毒(CRAd)。其仅在肿瘤细胞中增殖,对正常细胞损伤小,以其为载体具有特别的优势。现就肿瘤CRAd的研究进展作一综述。
- 王春毅傅仲学
- 关键词：肿瘤基因
- 盆腔MRI评估对局部进展期直肠癌患者新辅助放化疗后手术时机选择的影响
- 2022年
- 目的研究术前盆腔增强MRI评估对局部进展期直肠癌患者新辅助放化疗(nCRT)后nCRT手术时机的影响。方法回顾性分析重庆医科大学附属第一医院2017年1月-2019年12月收治的局部进展期且完成nCRT的直肠癌患者85例,根据盆腔磁共振评估的环周切缘(CRM)、直肠壁外血管侵犯(EMVI)情况及手术间隔时间,分为A1组(CRM、EMVI均为阳性、手术间隔时间8~10周)20例、A2组(EMVI、CRM均为阳性、手术间隔时间11~12周)24例、B1组(CRM、EMVI其中一个为阳性、手术间隔时间8~10周)23例和B2组(CRM、EMVI其中一个为阳性、手术间隔时间11~12周)18例。比较各组临床特征、手术和病理结果,并对病理完全缓解(pCR)进行单因素和多因素分析。结果各组性别、年龄、BMI、nCRT前CEA水平、肿瘤分期、肿瘤下缘距肛缘距离比较,差异均无统计学意义(P>0.05);A1组住院费用和保肛数多于A2组,B1组预防性造瘘数多于B2组,差异有统计学意义(P<0.05);各组手术方式、手术时间、术中出血量、术后住院时间、病理退缩分级TRG、pCR、病检淋巴结总数、病检淋巴结阳性数、吻合口瘘、感染、肺炎、肠梗阻比较,差异无统计学意义(P>0.05);单因素分析显示,nCRT前CEA水平是pCR的影响因素(P<0.05);多因素分析显示,手术时间间隔、nCRT前CEA水平、BMI、EMVI、临床T分期均不是pCR的独立预测因素。结论对于局部进展期直肠癌患者,在CRM、EMVI均为阳性时选择8~10周手术,可获得更高的保肛机会;在CRM、EMVI其中一个为阳性时,选择11~12周手术,可减少预防性造瘘的比例,提高pCR率。
- 刘婷王春毅
- 关键词：局部进展期直肠癌新辅助放化疗手术时机
- DLC-1过表达抑制结肠癌细胞生长及与Wnt/β-catenin信号通路的关系被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨在结肠癌细胞中抑癌基因DLC-1的作用及其与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法:以结肠癌SW480细胞系为实验对象,分为实验组(pc DNA3.1(+)-DLC-1组),阴性对照组[pc DNA3.1(+)组]及空白对照组(SW480组)。用携带抑癌基因DLC-1的重组慢病毒表达载体转染各组,用MTT法检测各组细胞增殖活性,用流式细胞仪检测各组凋亡率,用real-time PCR及Western blot分别检测各组Wnt/β-catenin信号通路相关基因β-catenin、GSK-3β和c-myc的表达水平。结果:慢病毒介导DLC-1过表达使结肠癌细胞SW480的增殖受到抑制,增殖率为0.546,凋亡率明显增加,为42.422+3.413。转染DLC-1基因的结肠癌SW480细胞中β-catenin和c-myc的m RNA及蛋白表达水平较空白对照组及阴性对照组均明显下降,而GSK-3β的m RNA及蛋白表达水平较空白对照组及阴性对照组则明显上升,差异具有统计学意义(P均=0.000)。结论:慢病毒介导DLC-1过表达在结肠癌中有明显的抑癌作用,这种作用与Wnt/β-catenin信号通路密切相关。DLC-1可能是Wnt/β-catenin信号通路的上游调节因子。
- 王春毅王佳林刘洪傅仲学
- 关键词：DLC-1抑癌基因结肠癌WNT/Β-CATENIN信号通路
- 人结肠癌细胞系裸小鼠淋巴结转移的观察被引量：2
- 2008年
- 目的建立人结肠癌细胞系裸小鼠爪垫淋巴道转移动物模型，并评价卡培他滨抗癌药物效果。方法裸小鼠爪垫皮下注射人结肠癌HCT-116细胞，在1～6周及8周取材，进行HE染色及CEA免疫组化检测，观察种植瘤的成瘤率、生长情况、淋巴结转移规律，并口服卡陪他滨抗癌药物观察其疗效。结果种植1周后成瘤率100％。肿瘤在3～4周成指数生长。3周时见第一级帼窝腹股沟淋巴结转移（2／5），到6周时100％转移，其中腹股沟淋巴结转移阳性率76．9％（10／13）；5周时见第二级髂血管旁淋巴结转移（1／5）；到8周时见第三级肾门淋巴结转移（1／5），髂血管旁淋巴结转移（3／5），但均未见肝肺远处转移。淋巴结转移发生在肿瘤指数生长之前，HE染色及CEA免疫组化染色证实淋巴结有弥漫性癌细胞转移浸润。口服化疗药物卡培他滨能有效抑制肿瘤生长及淋巴结转移。结论成功建立了人结肠癌裸小鼠爪垫淋巴道转移模型。此模型快速简便、转移集中、转移率高，且应用此模型能够评价抗癌药物卡培他滨抗癌疗效。
- 涂经楷傅仲学叶晓莉赵立波王春毅周建荣汪斌
- 关键词：人结直肠癌淋巴道转移裸鼠模型卡培他滨
