王敏杰
- 作品数：16 被引量：59H指数：4
- 供职机构：中国林业科学研究院林业研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- NAC1启动子驱动GFP表达的组织特征及对生长素和赤霉素的反应被引量：3
- 2006年
- 将拟南芥中转录因子基因NACl上游调控区1 kb克隆到pRD420质粒,构建由NACl启动子驱动绿色荧光蛋白基因(GFP)表达的植物表达载体,并以此载体转化烟草,对阳性转基因植株研究表明,GFP在根部有较高水平的表达．进一步用生长素、生长素拮抗剂NPA和赤霉素处理,荧光强度的变化表明:该调控区受生长素作用的同时也受赤霉素诱导．初步说明NACl基因不仅是一个生长素反应基因,同时可能也是一个赤霉素反应基因．
- 王友华段留生卢孟柱李召虎王敏杰翟志席
- 关键词：生长素赤霉素NACLGFP
- 具有光肩星天牛内切聚葡糖酶结合活性短肽的筛选被引量：2
- 2006年
- 内切葡聚糖酶(endoglucanases)是光肩星天牛幼虫肠道的主要纤维素消化酶。本研究以光肩星天牛内切葡聚糖酶的同工酶AgEG2为靶分子,从随机多肽噬菌体展示库中筛选与AgEG2有亲和活性的短肽,通过3轮筛选,短肽序列TPHRSPL出现频率为33.7%,而且展示该短肽的噬菌体均对AgEG2有很高的结合能力。进一步合成短肽TPHRSPL,并对肠道纤维素酶提取液进行了W estern分析,结果表明该短肽能特异结合内切葡聚糖酶的同工酶AgEG1和AgEG2,而与粗酶液中其它蛋白组分均无结合特性。表明筛选获得的短肽TPHRSPL对光肩星天牛内切葡聚糖酶具有特异结合亲和性。该短肽为研究光肩星天牛纤维素酶的特性及开发天牛的生物防治制剂奠定了基础。
- 陈敏卢孟柱王敏杰张志毅
- 关键词：光肩星天牛内切葡聚糖酶短肽亲和性
- 利用拟南芥基因芯片和突变体对木材形成相关基因的初步分析被引量：4
- 2011年
- 木材形成是木本植物特有的生物学过程,拟南芥在适当的诱导条件下也能形成类似"木材"的维管组织,因而可以借助拟南芥丰富的基因资源研究木材形成的分子机制。利用前期建立的毛白杨次生维管系统再生实验体系,通过拟南芥表达谱芯片分析再生过程中的基因表达变化,获得149个差异表达基因。选择其中转录因子等调控基因及功能未知基因共89个基因的总计151个拟南芥突变体,经次生诱导培养发现,20个突变体的发芽率或成活率降低,10个突变体表型变化明显,出现维管系统次生生长发育受到抑制、生长速度减慢等,推测这些基因参与调控拟南芥的次生生长。将木本植物与草本植物的研究体系相结合,利用拟南芥次生生长诱导体系研究木材发育相关基因功能,为木材发育的基因功能研究提供一条可行、有效,快速解析基因功能的新途径。
- 杨海峰王敏杰赵树堂唐芳卢孟柱
- 关键词：拟南芥突变体基因
- 拟南芥MYB基因对次生维管系统发育的影响被引量：4
- 2010年
- 根据拟南芥ATH1全基因芯片分析毛白杨维管再生过程中基因表达谱的结果,选取了在芯片中特异表达且表达量较高的MYB转录因子家族的7个基因,通过拟南芥突变体研究其对次生维管系统发育的影响及与木材形成相关的关系。通过"三引物法"的纯杂合鉴定和切片显微观察,发现其中1个突变系只有纯合突变体没有杂合体,并且茎基部维管束间纤维细胞壁和野生型相比明显增厚,细胞数量减少,细胞腔也随之减小,推测该突变体可能与次生壁的沉积有关系。
- 唐芳王敏杰杨海峰赵树堂卢孟柱
- 关键词：拟南芥突变体MYB木材形成次生壁
- 杨树维管组织特异启动子的克隆与启动活性分析被引量：3
- 2010年
- 启动子在基因表达调控中起关键性作用,它在很大程度上决定所控基因表达的时间、空间和强度。依据拟南芥ATH1芯片分析杨树维管形成时期特异表达基因的结果,选取了差异表达基因NST3,通过BLAST比对在杨树EST数据库(PopulusDB)中找到同源性较高的基因NAC068。以毛白杨为材料,在其基因组中克隆得到该基因5'侧翼区901 bp长的片段,命名为pProNAC068,将该片段置换pBI121载体中的CaMV35S启动子,并在84K杨中检测报告基因GUS的表达情况。经过GUS活性检测分析发现:该启动子可以控制外源基因在次生维管组织中特异表达,从而为基因工程中有目的的控制外源基因在维管组织中的表达奠定基础。
- 贺郭王敏杰陈洪亮赵树堂卢孟柱
- 关键词：维管组织启动子GUS染色基因工程
- 杨树PtSEP基因用于植物早开花诱导的方法
- 本发明公开了一种杨树PtSEP基因用于植物早开花诱导的方法，用杨树的PtSEP基因作为目的基因，克隆其cDNA全长，构建所述PtSEP基因的超表达载体并转入植物，用于提前烟草等植物的开花时间，利用转基因技术用于植物特别是...
- 卢孟柱唐雯戚晓利赵树堂王敏杰胡建军郭伟
- nanoLC-MS/MS分析毛白杨次生维管系统及其再生过程的蛋白质组
- 木材形成是一个复杂的生物学过程,涉及大量木材形成相关基因在维管形成层中的有序表达,研究木本植物次生维管系统蛋白质组有助于揭示木材形成过程中的相关基因及其功能。本课题组建立的毛白杨（Populus tomentosa）次生...
- 陈加飞王敏杰赵树堂卢孟柱
- 文献传递
- 通过RNAi技术抑制杨树c3h基因表达提高糖转化效率被引量：2
- 2012年
- 利用克隆得到的毛白杨c3h1基因构建其RNAi抑制表达载体,通过根癌农杆菌介导的叶盘法转化银腺杨无性系84 K,Realtime PCR检测表明其转基因株系323、325和322中c3h1基因表达量较野生型植株分别下调89.04%、82.22%和68.38%;茎横切片组化染色和显微结构观察表明转基因植株木质部发育和木质素沉积方式发生了改变;木质素、纤维素含量测定及苯酚—硫酸法总糖含量与HPLC法可溶性总糖和单糖含量检测结果表明:转基因植株木质素含量平均降低23.00%,最高可达39.71%;酸前处理效率最高提高了41.39%;未经酸处理直接酶解的糖化效率是对照植株的2.34～2.72倍,322株系和323株系比对照植株经酸前处理后再酶解的糖化效率高出81.18%和375.53%。
- 杨少宗杨少宗柳新红赵树堂王敏杰
- 关键词：RNA干扰杨树木质素
- 乳牛肝菌属分离株分子鉴定及其遗传关系的研究被引量：2
- 2008年
- 本文采用ITS序列分析方法和ITS-RFLP分子标记方法对内蒙古大青山地区分离获得的27个乳牛肝菌属(Suillusspp.)真菌菌株进行了分子鉴定和遗传关系研究。通过ITS序列比对鉴定出SP1、SP2、SP3、SP4、SP5、SP6、SP7、SP8、SP9、SF1、SF2、SF3、P.Lac-1、P.Lac-2、3′、3″、3#菌株属于褐环乳牛肝菌(Suillus luteus)。27株乳牛肝菌属真菌分为3个遗传类型,且每个遗传类型在分类上属于同一个种。樟Ⅱ和1"与其余菌株的遗传距离较大,其原因可能是宿主和生境的影响。序列分析方法能够更准确地分析出遗传差异,但ITS-RFLP方法更简单、实用,可以用于初步的菌株鉴定。两种方法结合可以更有效和准确地鉴定外生菌根真菌和研究其遗传关系。
- 冯锦霞王敏杰闫伟
- 关键词：外生菌根真菌ITS分子鉴定ITS-RFLP
- 毛白杨PtCDD基因5′片段的原核表达及功能分析(英文)被引量：3
- 2008年
- 根据GenBank中毛白杨钙离子依赖型脱氧核糖核酸酶(PtCDD)基因序列,以毛白杨形成层区域的cDNA为模板,经PCR扩增出该基因上游637 bp的cDNA片段。将该片段与PET-30b(+)载体连接,构建杨树PtCDD基因片段原核表达载体并进行表达研究,获得大量的PtCDD-(HIS)6融合蛋白。并进一步对该蛋白进行纯化和功能检测。结果表明:PtCDD基因片段能够在大肠杆菌体内表达出具有DNase功能的蛋白,克服了因表达全酶可能强烈降解DNA所带来的不能最终获得表达产物的问题,为今后PtCDD蛋白的抗体制备以及进一步研究奠定了基础。
- 曹秀利杜娟王敏杰赵树堂卢孟柱
- 关键词：毛白杨原核表达融合蛋白
