王业增
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
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- 正常成人胰岛移植治疗糖尿病的实验研究
- 2013年
- 目的探讨正常成人胰岛移植治疗糖尿病的作用。方法 2012年1月至2013年1月健康成人胰腺供体共13例。获取胰腺后经胶原酶消化并进行胰岛提取纯化,将纯化后的胰岛移植到糖尿病裸鼠肾包膜下为实验组,生理盐水代替胰岛移植为对照组,各13只。术后通过检测糖尿病裸鼠的血糖变化和组织学检查来判定胰岛移植后的存活情况和纠正血糖的效果。结果成人胰腺消化后胰岛产量为纯化前(3608±403)IEQ/g,纯化后(2820±318)IEQ/g,纯度为85%。实验组84.6%(11/13)糖尿病裸鼠在移植术后第1天,血糖降至正常,对照组血糖无明显变化。两组糖尿病裸鼠存活时间:实验组存活时间35～57d,中位存活时间46d。对照组存活时间5～12d,中位存活时间7d。两组比较差异具有统计学意义,Log-rank(Mantel-Cox)值为8.74,P值为0.0012。结论成人胰腺消化后,可得到高纯度活力正常的胰岛,并能纠正糖尿病裸鼠的高血糖。正常成人胰岛移植可能成为临床糖尿病患者的一种有效治疗方法。
- 杨学伟向广阳王业增蒋小峰薛平
- 关键词：糖尿病胰岛
- 大鼠胸腺石蜡切片自发荧光的去除方法及应用
- 2016年
- 目的研究高效去除大鼠胸腺石蜡切片自发荧光的方法,并探索其在免疫荧光染色中的应用。方法应用硼氢化钠、台盼蓝、苏丹黑B对大鼠胸腺组织的石蜡切片进行处理并在荧光显微镜下观察自发荧光猝灭情况;并通过免疫荧光双标法对胸腺CD103及CD4阳性细胞进行染色探究其实用价值。结果经硼氢化钠处理后的切片红、绿、蓝三种颜色的自发荧光均较对照组明显减弱,且可增强胸腺组织切片免疫荧光染色效果。其他两种试剂处理后的石蜡切片自发荧光的强度与对照组无明显差异。结论硼氢化钠能显著的减低胸腺石蜡切片的自发荧光,可使免疫荧光特异性染色更加鲜明。
- 黄启顺钟永豪王业增陈德
- 关键词：胸腺石蜡切片自发荧光免疫荧光硼氢化钠
- 重组腺相关病毒介导转化生长因子βⅡ型受体基因对肝癌生长和转移的影响
- 背景及目的： 肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)恶性程度高,具有高复发转移率,严重影响着其远期疗效,因此需要寻找新的治疗手段来有效地降低其复发转移。转化生长因子βⅡ型受体(Transfo...
- 王业增
- 关键词：肝细胞癌重组腺相关病毒肿瘤生长基因治疗
- 文献传递
- 五指山小型猪胰岛分离和纯化的初步研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨封闭群五指山小型猪胰岛的分离和纯化,并在体外检测分离纯化后的胰岛对高低糖刺激反应来判定胰岛功能。方法 7只雄性五指山小型猪和6只普通成年猪的胰腺分别被用于胰岛分离纯化实验研究。胰腺获取后,胰管插管并注入消化液(胶原酶V,1.8g/L),胰腺充分灌注后,切成碎块并转入消化罐内消化,消化液过滤后并经梯度离心后,收集纯化的胰岛,经双硫宗(DTZ)染色后计数,并在不同浓度葡萄糖培养液里检测释放的胰岛素浓度来判定胰岛的活性。结果小型猪胰腺解剖上更接近人类,胰腺消化时间平均为(30±8)min,消化程度为(70±8)%,胰岛产量纯化前为(5500±1025)IEQ/g,纯化后为(4120±625)IEQ/g,纯度为85%,活力为80%;取自屠宰场猪胰岛产量纯化前为(2500±625)IEQ/g,纯化后为(1720±435)IEQ/g,活力为60%。镜下观察,小型猪胰岛镜下可被DTZ染色呈红色,纯化后的胰岛大小一致,形态完整,体外培养小型猪胰岛在低糖和高糖刺激下胰岛素释放分别为(1.346±0.128)ng/mL和(2.565±0.208)ng/mL,差异有显著性意义(P<0.05),刺激指数为(1.908±0.152),而取自屠宰场猪胰岛素释放分别为(1.246±0.18)ng/mL和(1.4±0.208)ng/mL,差异无显著性。结论封闭群五指山小型猪胰腺解剖结构和人类相似,分离纯化后的胰岛产量高,功能良好,适合异种胰岛移植。
- 蒋小峰钱滔来向广阳王业增陈松伟杨学伟章乐虹陈德
- 关键词：小型猪胰岛异种
- 五指山小型猪胰岛对糖尿病大鼠的治疗作用
- 2012年
- 目的:探讨小型猪胰岛治疗糖尿病大鼠的作用和功效.方法:成年健康♂五指山小型猪和普通家猪作为胰岛供体.胰腺获取后经胶原酶消化后进行胰岛提取纯化,纯化后的胰岛通过门静脉移植到糖尿病SPF大鼠的肝内,术后每天肌注环孢菌素(20mg/kg)作为免疫抑制剂,并通过检测糖尿病大鼠的血糖变化和肝脏组织学检查来判定胰岛移植后的存活情况和纠正胰岛移植的效果.结果:五指山小型猪胰腺消化后胰岛产量为4608 IEQ/g±593 IEQ/g,纯化后为3820 IEQ/g±718 IEQ/g,纯度为85%,取自屠宰场猪胰岛产量为纯化前为3500 IEQ/g±625 IEQ/g,纯化后为2720 IEQ/g±435 IEQ/g,纯度为80%.两组84.6%糖尿病大鼠在移植术后第1天,血糖降至正常.维持时间:小型猪胰岛术后存活时间为3-5d(中位存活时间:4.5d),普通家猪胰岛存活时间为2-4d(中位存活时间:3.7d).经Kaplan-Meier分析,两组胰岛存活时间无差别.结论:封闭群五指山小型猪分离纯化后的胰岛产量高,功能良好,可以纠正糖尿病大鼠的高血糖,适合作为异种胰岛移植的理想供体.
- 蒋小峰Thomas Linn向广阳王业增钱滔来曹良启杨学伟章乐虹陈德
- 关键词：小型猪胰岛异种
- 胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响被引量：4
- 2011年
- 目的观察胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛的最佳消化液的胶原酶浓度。方法 75只雄性SD大鼠按胶原酶浓度分为5组：Ⅰ组（0.5 mg/ml）、Ⅱ组（0.75 mg/ml）、Ⅲ组（1.0 mg/ml）Ⅳ组（1.2 mg/ml）和Ⅴ组（1.5 mg/ml）,每组15只。通过胆灌注胶原酶V来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,并利用葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能。结果分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活性率为90%左右,体外培养生长良好。随着胶原酶的浓度增加,胰岛数量和胰岛当量明显增加（P〈0.05）,并且最大直径的胰岛数量也在增加（P〈0.05）,在胶原酶浓度1.0 mg/ml时获得的胰岛产量最高,其次为1.2 mg/ml,在其他浓度时,胰岛产量都较低（P〈0.05）。在低糖和高糖刺激下胰岛素的释放分别为（1.346±0.128）ng/ml和（2.565±0.208）ng/ml,差异具有显著性意义（P〈0.05）,刺激指数为（1.908±0.152）,提示胰岛细胞功能良好,电镜照片显示胰岛生长状况良好。结论进行大鼠胰岛分离纯化时最适宜的胶原酶浓度为1.0~1.2 mg/ml,可获得稳定高产量的胰岛,过低和过高的浓度都是不适宜的。
- 蒋小峰高玲钱滔来陈松伟王业增向广阳钱世鹍陈德
- 关键词：胰岛
