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Ku80表达抑制细胞模型的建立及其功能检测被引量：3: 2007年; 目的建立利用RNAi技术抑制Ku80表达的HeLa细胞模型，探讨Ku80在放射生物学方面的功能。方法构建靶向抑制Ku80的siRNA表达质粒，转染HeLa细胞，筛选稳定表达的转化克隆；Westernblotting检测Ku80表达变化；6MVX线照射6Gy后，流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期；克隆形成实验检测细胞SF2、D0等值。结果构建的质粒转染HeLa细胞获得3个稳定转染克隆，Westernblotting分析表明2个阳性克隆Ku80蛋白抑制率分别达到89．3％和96．4％；Ku80表达抑制细胞受x线照射后48及72h的凋亡率高于对照细胞（P〈0．05），但4株细胞的细胞周期变化无统计学意义（P〉0．05）；2个阳性克隆细胞株的D0和SF2值明显降低，在D10剂量时的增敏比分别为1．315和1．365。结论运用RNAi技术建立的Ku80表达抑制克隆细胞可以成为简单实用的细胞模型；Ku80-siRNA可以抑制Ku80的表达，从而促进HeLa细胞对X线的敏感性。; 庄亮于世英黄晓园熊慧华熊华李小兰冷彦; 关键词：KU80 RNA干扰稳定转染细胞周期

RNAi沉默HIF-1α基因调控乏氧肺腺癌A549细胞放射敏感性和自噬能力被引量：1: 2013年; 背景与目的:乏氧导致肿瘤细胞放射敏感性下降是引起肿瘤放疗抵抗、复发转移的根源。HIF-1α基因在乏氧调控中起关键作用,但HIF-1α基因在乏氧肺腺癌放射敏感性中的作用及其与自噬的关系尚未阐明。本研究建立利用RNAi沉默HIF-1α基因的乏氧肺腺癌A549细胞模型,以此探讨HIF-1α对乏氧细胞放射敏感性和自噬的影响。方法:构建靶向抑制HIF-1α的shRNA表达质粒,转染乏氧A549细胞,筛选稳定表达的克隆细胞,将其命名为A549/HIF-1α-shRNA,同时设阴性对照A549/Neg-shRNA。克隆形成实验检测细胞D0、SF2、SER等值。Western-blot检测细胞照射前后HIF-1α、LC3、c-parp蛋白的表达。结果:乏氧A549细胞的SF2为0.62,高于常氧A549细胞,SER为1.45;乏氧A549细胞照射后LC3Ⅱ增加,c-parp下调。乏氧A549细胞HIF-1α表达增加;A549/HIF-1α-shRNA细胞HIF-1α表达降低;A549/HIF-1α-shRNA细胞的SF2为0.45,SER为0.72,低于A549/Neg-shRNA细胞;A549/HIF-1α-shRNA细胞照射后LC3Ⅱ降低,c-parp上调。结论:稳定转染及RNAi技术建立的HIF-1α表达抑制克隆可以成为简单实用的细胞模型;shRNA抑制HIF-1α的表达可提高乏氧A549细胞的放射敏感性,降低自噬活性。; 邹燕梅熊华肖志平于世英袁响林; 关键词：乏氧自噬 HIF-1Α

Survivin基因RNA干涉对MCF-7乳腺癌细胞紫杉醇敏感性的影响被引量：3: 2007年; 目的探讨Survivin短发卡状RNA抑制Survivin的表达对人乳腺癌MCF-7细胞紫杉醇敏感性的影响。方法通过脂质体介导将Survivin短发卡RNA表达质粒pSurvivin shRNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7并检测Survivin mRNA及蛋白的表达情况;噻唑蓝(MTF)比色法和An- nexin-V法分别检测紫杉醇处理后转染pSurvivin shRNA细胞、未转染细胞以及转染阴性对照质粒细胞的增殖和细胞凋亡的变化;采用Western blot法观察紫杉醇作用过程中Survivin表达的变化。结果与未转染细胞及转染阴性对照质粒细胞比较,转染pSurvivitt shRNA质粒的细胞Survivin mRNA和蛋白表达明显下降;在同一紫杉醇作用浓度下,细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显增高。此外在紫杉醇作用的早期(6h内),转染阴性对照质粒细胞以及未转染细胞均出现了Survivin表达一过性增加,而转染pSurvivin shRNA的细胞中未观察到Survivin表达的增加。结论短发卡状RNA干扰技术阻抑乳腺癌细胞中Survivin的表达,可增强乳腺癌细胞对紫杉醇的敏感性。; 熊慧华庄亮于世英熊华; 关键词：SURVIVIN 脱噬作用化疗敏感性

俯卧位腹部托板用于直肠癌术后辅助性放疗的剂量学研究被引量：4: 2007年; 近十几年来，尽管直肠癌手术方式有了一些改进，但直肠癌单纯手术后局部复发率仍达20％～60％。研究结果表明对手术证实肿瘤穿透肠壁全层和（或）淋巴结转移者，术后采用同步放化疗可以有效降低局部复发率，并提高生存率。但术后由于腹盆解剖结构的破坏，更多体积的正常组织（如小肠、膀胱）受到照射，不少患者出现了较为严重的急性和（或）长期毒副作用。; 袁响林熊慧华于世英熊华; 关键词：直肠癌术后辅助性放疗俯卧位局部复发率托板腹部

5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人肺腺癌A549细胞增殖及Apaf-1基因表达的影响被引量：4: 2009年; 目的观察DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-AZa—CdR）对人肺腺癌A549细胞的增殖、凋亡的影响及其对A549细胞中Apaf-1基因表达的影响。方法不同浓度的5-Aza—CdR处理A549细胞后，采用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长抑制率；采用流式细胞术检测处理72h后的细胞周期及凋亡情况；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法观察Apaf-1基因及甲基转移酶的mRNA水平；Westernblot法检测Apaf-1蛋白的表达变化。结果各浓度的5-Aza—CdR处理A549细胞后，A549细胞的生长均呈抑制状态，有时间和剂量依赖性。而流式细胞仪分析表明，各浓度的5-Aza—CdR作用72h后，A549细胞的G0／G1期比例增加，S期比例明显减少，细胞凋亡率明显增加。RT—PCR结果显示，5-Aza—CdR处理组中DNA甲基转移酶的mRNA表达明显受抑，而Apaf-I基因的mRNA表达却明显增加。Westernblot结果显示Apaf-1基因的蛋白表达明显增加，而阴性对照组中未观察到上述变化。结论5-Aza—CdR可抑制A549细胞的生长，并通过抑制DNA甲基转移酶的表达而使Apaf-1基凶在人肺腺癌细胞株A549中重新表达。; 熊慧华庄亮熊华于世英黄梅; 关键词：DNA甲基化基因表达

帕洛诺司琼预防中重度致吐化疗引起的恶心呕吐77例被引量：6: 2013年; 目的评价帕洛诺司琼预防和控制中重度致吐化疗引起恶心呕吐的优势。方法对使用中重度致吐化疗的患者,随机分为A组77例和B组78例,A组给予盐酸帕洛诺司琼注射液0.25 mg,B组给予盐酸托烷司琼注射液5 mg,均于化疗前30 min缓慢静脉推注。严格观察患者急性呕吐、延迟性呕吐、恶心、不良反应发生情况,并进行生活质量评价。结果 A组、B组急性呕吐完全有效率、延迟性呕吐完全控制率、0～120 h呕吐完全控制率分别为81.8%和51.3%,70.1%和43.6%,67.5%和41.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。A、B组呕吐控制时间分别为(95.07±42.17)h和(62.07±50.13)h(P<0.05);每例呕吐发作次数分别为(1.46±2.12)和(2.96±3.13)次(P<0.05)。两组在用药后至首次接受解救治疗的时间接近(P>0.05),但解救治疗次数以A组为少,差异有统计学意义(P<0.05)。A组恶心分级为(0.86±0.69),明显低于B组(1.29±1.03)(P<0.05)。A组患者生活质量FLIE评分高于B组患者(P<0.05)。两组不良反应相似,主要为头痛、便秘、腹泻等。结论帕洛诺司琼预防中重度致吐化疗引起的恶心呕吐优于托烷司琼,尤其是延迟性呕吐,明显提高患者的生活质量,安全性高,值得临床推广应用。; 邹燕梅熊华胡广原; 关键词：帕洛诺司琼托烷司琼化学治疗恶心呕吐生活质量

吉非替尼对晚期非小细胞肺癌患者生活质量的影响被引量：16: 2008年; 背景与目的:提高晚期非小细胞肺癌患者的生活质量是肿瘤学者关注的问题之一。吉非替尼已广泛用于治疗晚期非小细胞肺癌。本研究探讨吉非替尼对晚期非小细胞肺癌患者生活质量的影响。方法:70例晚期非小细胞肺癌患者,每日口服吉非替尼250mg,直至病情进展或出现严重不良反应。采用欧洲癌症研究和治疗组织(European Organization for Research and Treatment of Cancer,EORTC)简体中文版EORTC QLQ-C30和QLQ-LC13问卷对治疗前、后症状和生活质量的改变进行评价。结果:58例患者(85.3%)完成了问卷调查。治疗前和治疗8周后患者5种功能状态(躯体、角色、情感、认知、社会)的均值分别为52和63,49和56,64和68,60和65,52和61,整体生活质量评分的均值分别为53和60,差异有显著性(P<0.05);治疗前、后全身症状(乏力、食欲不振)的均值分别为61和58,52和48,肺癌相关症状(呼吸困难、咳嗽、咯血、胸痛)的均值分别为55和49,54和47,28和27,29和25,其中乏力、呼吸困难、咳嗽、胸痛的差异有显著性(P<0.05)。治疗后5种功能状态和整体生活质量的有效率均超过50%,全身症状和肺癌相关症状的有效率均超过40%。症状和生活质量的改善与疾病控制相一致。生活质量改善者生存延长。结论:吉非替尼明显改善晚期非小细胞肺癌患者的症状和生活质量。; 邹燕梅熊华于世英; 关键词：非小细胞肺癌生活质量吉非替尼

阿瑞匹坦对骨与软组织肉瘤患者强致吐风险化疗相关性呕吐的预防效果被引量：3: 2016年; 目的探讨阿瑞匹坦对骨与软组织肉瘤患者强致吐化疗相关性呕吐的预防效果。方法骨与软组织肉瘤患者20例,共完成化疗86例次,分为治疗组10例,化疗45例次(化疗方案:阿瑞匹坦+帕洛诺司琼+醋酸地塞米松片)和对照组10例,化疗41例次(化疗方案:帕洛诺司琼+醋酸地塞米松片),观察阿瑞匹坦对化疗相关性呕吐的预防效果及不良反应。结果治疗组和对照组呕吐完全缓解率分别为68.89%和51.22%(P>0.05),延迟性呕吐发生率分别为17.78%和36.59%(P<0.05),两组便秘、食欲减低和头痛等不良反应差异无统计学意义(P>0.05),治疗组乏力发生率高于对照组(P<0.05)。结论阿瑞匹坦可有效降低骨与软组织肉瘤化疗相关的延迟性呕吐发生率,且不良反应较轻。; 宫晨熊华王建华张鹏张菁晁腾飞熊慧华

短干扰RNA抑制人宫颈癌HeLa细胞Ku80基因表达被引量：1: 2006年; 目的针对内源性Ku80基因序列体外构建短干扰RNA(siRNA)线性DNA转录载体,观察其在细胞内产生的siRNA对该基因表达的影响。方法构建的线性DNA转录载体经脂质体导入宫颈癌HeLa细胞内,转录产生21 bp的短双链siRNA,并用免疫印迹法分析Ku80基因在蛋白水平表达的情况。结果体外成功构建出siRNA线性DNA转录载体LS1/LAS1和LS2/LAS2;载体分别导入HeLa细胞内生成相应siRNA;与空白对照组比较,实验组均能特异性抑制Ku80基因的表达;其抑制效果和时间点与所选基因靶位相关。结论由线性DNA载体转录生成的siRNA在细胞内特异性抑制内源性基因表达,为Ku80用于肿瘤靶向基因治疗提供了一个新的实验依据。; 熊华于世英张孟贤; 关键词：RNA干扰基因治疗

乏氧诱导的自噬与肺腺癌放射抵抗的相关性研究被引量：9: 2011年; 目的研究乏氧诱导的自噬与肺腺癌放射抵抗之间的相关性。方法肺腺癌A549细胞行常氧和乏氧培养。构建靶向抑制乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)的shRNA表达质粒,转染乏氧A549细胞,筛选稳定表达的克隆细胞。克隆形成实验检测细胞放射敏感性。Western blot法检测各处理组细胞HIF-1α、beclin1蛋白的表达。结果乏氧细胞存活分数(SF2)为0.62,常氧细胞为0.43,提示乏氧A549细胞放射敏感性降低。常氧下A549细胞HIF-1α和beclin1蛋白低表达,乏氧12、24、48 h时间点HIF-1α和beclin1蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。相应时间点HIF-1α与be-clin1的表达呈正相关(r=0.75,P<0.05)。A549/HIF-1α-shRNA的SF2为0.45,放射增益比(SER)为0.72,明显低于阴性对照组,说明抑制HIF-1α表达明显提高乏氧A549细胞放射敏感性。乏氧条件下HIF-1α的表达被抑制后beclin1蛋白的表达明显降低(24 h:t=5.69,P=0.01;48 h:t=5.13,P=0.01)。结论乏氧诱导的自噬参与肺腺癌的放射抵抗。; 邹燕梅熊华于世英袁响林; 关键词：乏氧自噬肺腺癌

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熊华

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