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IFN-γ研究进展及其在猪繁殖与呼吸综合征研究中的应用被引量：7: 2010年; γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)是干扰素的一种,又称为Ⅱ型干扰素或免疫干扰素,主要由活化的T细胞和NK细胞产生。IFN-γ是动物机体最重要的细胞因子之一,是主要的巨噬细胞活化因子(macrophage activating factor,MAF),具有强大的免疫调节作用和抗病毒、抗肿瘤作用。目前,干扰素基因工程和基因治疗研究引起了广泛关注,已被应用于人类疾病临床治疗和动物疾病防控研究。作者就IFN-γ的基本特征、生物学活性、检测及其在猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)中的研究应用进行了综述。; 白雪赵建增梁志选屈雪琪李勇梅林温涛何斌杨举罗胜军邢海云高英杰; 关键词：IFN-Γ 生物学活性猪繁殖与呼吸综合征

猪接种PRRSV Nsp2Δ1882-2241弱毒株后血清细胞因子的变化特征被引量：12: 2012年; 为了解Nsp2Δ1882-2241缺失后弱化的高致病性PRRSV(TJM株)对宿主免疫学应答的刺激机理,本研究分析了免疫猪血清中的细胞因子及变化规律。将14头4周龄易感仔猪随机分为3组:第1组接种PRRSV TJM-F92株,为免疫组;第2组接种高致病性PRRSV TJ-F5毒株,为攻毒组;第3组不接种疫苗及病毒,为对照组。接种后28d,用TJ-F5毒株攻击试验猪,于不同时间点采集血样,用ELISA法测定血清中的PRRSV抗体、IL-2、IL-10、IL-12p40、TNF-α、IFN-α和IFN-β水平。结果显示:(1)与对照组和攻毒组相比,免疫组猪IL-12p40水平持续上调,于免疫后28d受PRRSV强毒攻击后,其水平开始缓慢降低,但仍高于攻毒后的对照组。(2)免疫组IL-2水平在接种疫苗后的前21d内无明显升高且低于攻毒组,在受到强毒攻击后其IL-2水平却有明显升高。(3)免疫组IL-10水平与对照组无明显差别,并在免疫14d后一直显著低于攻毒组(P<0.01)。(4)免疫组接种疫苗后的前21d内,TNF-α水平保持稳定,28d明显上调。攻毒组TNF-α水平0～28d一直低于对照组,且在21d达到最低(P<0.01)。免疫组在28d受强毒攻击后,其TNF-α水平下降且在攻毒7d时最为明显(P<0.01),此后恢复到正常水平。(5)免疫组免疫后28d时IFN-α水平升高,在受到强毒攻击后再次显著降低(P<0.01)。免疫组IFN-β水平一直低于对照组和攻毒组,不因强毒攻击而变化。以上结果提示,IL-12上调在PRRSV免疫保护中起明显作用;另外,上调TNF-α及下调IL-10都是基因缺失疫苗发挥效力的潜在机制。; 梅林赵建增李真光夏铭崎武华梁志选屈雪琪李勇白雪温涛何斌杨举罗胜军邢海云高英杰; 关键词：细胞因子基因缺失疫苗

化学发光免疫分析在兽医诊断中的应用被引量：2: 2007年; 作者综述了化学发光免疫分析(CLIA)的原理、分类及现状,阐述了该技术在兽医诊断学中的应用。; 温涛赵建增罗胜军高荣高英杰; 关键词：化学发光免疫分析兽医诊断

人β-hCG化学发光免疫分析方法的建立被引量：2: 2008年; 目的建立一种检测人血清hCG浓度的双抗体夹心化学发光免疫分析方法。方法采用2种高特异性的抗β-hCC单克隆抗体，以一种包被微孔板制成固相抗体，另一种标记碱性磷酸酶，以金刚烷衍生物为底物，采用双抗体夹心法检测人血清hCG浓度，并与进口试剂进行比较。结果以5μg／ml单克隆抗体包被微孔板，酶结合物以1：10000稀释，在室温条件下检测，可测范围为5—540mIU／ml，灵敏度为0．143mIU／ml，批内、批间平均变异系数分别为5．28％和7．05％，平均回收率为98．77％，范围为92．3％．108．6％，与TSH、FSH和LH的交叉反应率均小于0．01％。与国外同类试剂有良好的相关性。结论该方法有较高的灵敏度、精密性和准确性。; 高荣高英杰赵建增罗胜军温涛; 关键词：人绒毛膜促性腺激素化学发光免疫分析双抗体夹心法

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染与免疫过程中猪细胞因子的应答及意义被引量：1: 2012年; 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是猪的一种严重的传染性疾病,其长年流行给养猪业造成重大经济损失。接种弱毒疫苗或灭活疫苗是控制PRRS的首选策略,但在现有技术水平下,由于疫苗毒株存在免疫抑制等因素,预防效果不理想。因而,深入研究PRRSV感染和/或接种疫苗后的免疫学应答机理是研究开发新型高效疫苗的必然基础。作者回顾性地综述感染PRRSV或接种PRRSV疫苗后宿主产生细胞因子的动态规律,探讨猪体防御PRRS的机制及开发新型高效疫苗的新思路。; 梅林单悦付云云郎广平郭敏白雪温涛罗胜军邢海云高英杰杨举赵建增梁志选; 关键词：PRRSV 细胞因子

猪繁殖与呼吸综合征病毒实验室检测技术研究进展被引量：10: 2009年; 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床症状表现为母猪繁殖性能下降、不孕、流产等。感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后病理及组织学变化往往不太典型,而且易与其它病原感染所引起的病理变化相混淆,给该病的诊断带来一定困难,因此,对于PRRSV的确诊有赖于实验室诊断,不同的诊断方法敏感性、特异性及成本方面存在差异,而现有的血清学方法无法区分疫苗抗体和野毒抗体。作者就PRRSV抗原或抗体的检测技术(如病毒分离、RT-PCR、免疫过氧化物酶技术、酶联免疫吸附试验等)的研究现状作一简单的概述。; 仝利剑张社民高英杰赵建增慕泽鑫罗胜军温涛; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒

人催乳素化学发光免疫分析试剂盒的制备及验证: 2009年; 目的制备人催乳素(hPRL)化学发光免疫分析(CLIA)试剂盒,并进行验证。方法采用2株不同结合位点的抗hPRL单克隆抗体,1株用于包被微孔板,另1株用于标记HRP,建立双抗体夹心检测系统,配合化学发光底物组装成试剂盒,并进行各项技术指标的验证。结果试剂盒最佳定量范围在5～100ng/ml,标准曲线的相关系数r=0.9999,灵敏度为0.49ng/ml,平均回收率为100.9%,试验内和试验间变异系数分别小于6.3%和10.9%。试剂盒有效期可达1年,特异性良好,出现Hook效应的样品浓度为1500ng/ml。与进口化学发光试剂盒和放射免疫分析试剂盒对比检测84份临床标本的结果呈高度相关,相关系数分别为0.9537和0.9486。结论已成功制备灵敏、特异的hPRLCLIA试剂盒,可用于人催乳素的临床检测。; 温涛赵建增罗胜军高荣高英杰; 关键词：化学发光免疫分析试剂盒

猪繁殖与呼吸综合征病毒的免疫学研究进展被引量：7: 2011年; 从猪繁殖与呼吸综合征病毒的主要抗原蛋白、持续性感染、细胞免疫、体液免疫和免疫抑制几方面论述了猪繁殖与呼吸综合征病毒与宿主之间存在复杂的免疫相互作用,旨在为猪繁殖与呼吸综合征疫苗的设计与研制提供新的思路和方法。; 白雪赵建增梁志选屈雪琪李勇梅林温涛何斌杨举罗胜军邢海云高英杰; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征免疫学免疫抑制

流式细胞术检测不同试验条件对猪T淋巴细胞亚群的影响被引量：12: 2011年; 通过不同方式处理猪外周血淋巴细胞,对不同保存时间的淋巴细胞进行流式细胞术检测,探讨其对T淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+、CD8+亚群的影响。采用肝素钠、EDTA、枸橼酸钠3种抗凝剂抗凝猪外周静脉血,分别在第1、2、4、6、8、10天用流式细胞仪检测。结果表明,肝素钠抗凝,第1、2、4天内检测差异不显著(P>0.05),第6天检测CD4+、CD8+细胞显著减少(P<0.05),第8、10天极显著减少(P<0.01)。EDTA抗凝,第1、2、4天内检测差异不显著(P>0.05),第6天检测CD3+细胞显著减少(P<0.05),第8、10天极显著减少(P<0.01);枸橼酸钠抗凝,第1、2、4、6、8天内检测差异不显著(P>0.05),第10天检测CD3+、CD4+细胞极显著减少(P<0.01),CD8+细胞显著减少(P<0.05)。3种抗凝剂检测比较,处理后的第1、2、4、6天肝素钠抗凝管检测结果CD3+、CD4+、CD8+均高于EDTA和枸橼酸钠抗凝。本研究表明,流式细胞术检测猪外周血优选肝素钠抗凝,样本采集后4 d内检测完毕。; 屈雪琪赵建增梁智选李勇白雪梅林温涛何斌杨举罗胜军邢海云高英杰; 关键词：流式细胞术 T淋巴细胞亚群抗凝剂

猪繁殖与呼吸综合征化学发光检测技术研究被引量：3: 2013年; 根据双抗原夹心ELISA检测方法,结合化学发光检测体系建立了检测血清中PRRSV抗体的化学发光免疫分析方法,确定了检测体系中所用各组成部分的浓度,并组装为试剂盒,同时对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确性、稳定性等技术参数与酶联免疫分析进行了对比,结果表明,二者的检测值显著相关,相关系数为0.9486。该试剂盒在2～8℃下可保存1年,并且灵敏度高、特异性强、精密度好,操作简便、耗时短,能准确检测出血清中抗体的浓度。; 张社民温涛郝云鹏张瑞琴; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征化学发光

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温涛

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