林少华
- 作品数：12 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中国农业大学食品科学与营养工程学院更多>>
- 发文基金：北京市教委资助项目北京市教育委员会共建项目科技部科技攻关项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学化学工程更多>>
- 鲁西黄牛乳铁蛋白N-末端多肽基因的表达与活性检测被引量：9
- 2005年
- 从黄牛的肝脏中提取总的DNA,根据Genebank中牛乳铁蛋白的cDNA序列,设计特异性引物,采用RT-PCR进行扩增,将扩增片段克隆于PGEM—Teasyvector中。测序结果表明,该片断是乳铁蛋白基因的cDNA序列,编码50个氨基酸的150bp的多肽片断,通过BamH1和EcoR1双酶酶切该片断,并连接到表达载体pGEX-4T1中,转化大肠杆菌BL21,进行诱导表达,蛋白电泳显示,表达成功;经纯化、胃蛋白酶酶解后,具有抗菌生物活性。
- 罗红霞郭慧媛林少华陈尚武任发政
- 关键词：乳铁蛋白肽克隆表达抗菌活性
- 猪尿中莱克多巴胺残留量快速检测方法的建立被引量：2
- 2019年
- 为了现场灵敏、特异、快速地检测猪尿中莱克多巴胺(RAC)的残留情况,试验用胶体金标记RAC单克隆抗体构建一种能够快速检测猪尿中RAC的免疫层析试纸条,通过正交试验优化试纸条中标记抗体的量、胶体金结合垫上胶体金单克隆抗体(CG-mAb)溶液的体积和牛血清白蛋白封闭的莱克多巴胺(RAC-BSA)的浓度得到最优组合,并测定试纸条的特异性、稳定性、检测时间和检测限。结果表明:经过优化后得到的最优组合为标记抗体的量1.5μg/mL,胶体金结合垫上CG-mAb溶液的体积1.5μL,RAC-BSA的浓度0.2 mg/mL;该试纸条可在3 min内特异性地检测RAC,检测限为3 ng/mL,在室温条件下能保存12个月。说明试验构建的快速检测猪尿中RAC试纸条能达到现场使用的要求,适用于快速筛查猪尿中RAC的残留。
- 林少华林少华罗红霞许文涛廖国周商颖
- 关键词：猪尿莱克多巴胺胶体金
- 重组牛乳铁蛋白肽包含体的复性与纯化被引量：5
- 2006年
- 通过分析透析液pH值,包含体蛋白浓度,DTT浓度3个参数对复性率的影响,确定了重组牛乳铁蛋白N-末端多肽(pGEX-4T1/rbLF-N)包含体透析复性的最佳条件和复性后蛋白纯化的适宜方法。采用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B柱(Glutathione SapharoseTM 4B)对复性后的蛋白溶液进行纯化,纯化后的融和蛋白经胃蛋白酶酶解并检测其酶解产物的抗菌活性。试验表明包涵体蛋白可以部分复性。当pH值为8.5,包含体蛋白质量浓度为100mg/L,DTT浓度为24 mmol/L时,包含体的复性率最高。纯化后的融合蛋白酶解产物具有抗菌作用。
- 林少华罗红霞郭慧媛任发政罗云波
- 关键词：包含体纯化
- 酪蛋白降血压多肽制备技术研究及产品开发
- 任发政蒋菁莉陈历俊陈尚武刘美玉郑丽敏崔建云蔡华伟毛学英娄飞杨海莺隋欣谭徐林林少华陈历水韩北忠李平兰
- 该成果以干酪素为蛋白原料，采用生物酶解技术，水解干酪素制备具有降血压活性多肽。改进的ACE酶活力连续监测法，实现ACE抑制肽体外活性的快速测定。测定多种蛋白酶对干酪素的水解特性及水解产物的体外ACE抑制活性，筛选出适用于...
- 关键词：
- 关键词：干酪素酶解技术
- 酪蛋白免疫调节肽制备技术研究与产品开发
- 李兴民毛学英南庆贤任发政陈历俊郑丽敏陈尚武杨海莺李海琴刘美玉崔建云罗红霞蒋菁莉隋欣林少华韩北忠陈历水李平兰
- 该课题采用酶工程技术对蛋白免疫调节肽的制备工艺做了全新改进，确定了制备免疫调节肽的来源广泛的微生物蛋白酶种类，大大降低活性肽的生产成本，使其工业化生产成为可能和现实。采用免疫学方法，通过体外和体内实验，对来源于食品级原料...
- 关键词：
- 关键词：干酪素免疫调节动物实验
- 重组大肠杆菌BL21（DE3）/rbLF-N高密度培养条件优化
- 乳铁蛋白肽是乳铁蛋白在酸性环境下经胃蛋白酶作用N端释放的一段多肽，具有多种生物功能。本研究通过基因工程的方法，采用高密度发酵技术生产重组牛乳铁蛋白肽，既可以解决牛乳铁蛋白肽来源稀少问题，又可以降低成本、提高效率和创造经济...
- 林少华
- 关键词：乳铁蛋白肽发酵条件基因工程高密度发酵
- 文献传递
- 绿豆综合利用加工技术与系列产品开发
- 陈尚武马金来任发政崔建云郭慧媛苗颖杨应笑李丽丽郑立红庞堃林少华刁贺娟
- 该项目以我国已有两千多年栽培史的绿豆（Phaseolus radiatus L.）为原料，根据绿豆“甘，寒，无毒，入心、胃经，消肿下气，压热解毒”的传统医学理论和现代营养科学研究成果，以现代食品科学与加工技术为手段，结合...
- 关键词：
- 关键词：绿豆综合利用功能饮料
- 重组大肠杆菌BL21(DE3)/rbLF-N高密度
- 林少华
- 关键词：乳铁蛋白肽发酵条件优化
- 胶体金法快速检测猪尿中氟喹诺酮类药物的残留
- 2018年
- 本文采用胶体金标记的抗氟喹诺酮类单克隆抗体构建出一款试纸条,它可以特异性地检测猪尿中氟喹诺酮类药物的残留。通过透射电子显微镜进行表征,确定所制备的胶体金颗粒平均直径为40nm;通过紫外一分光光度计扫描得到的胶体金氟喹诺酮单克隆抗体最大吸收波长为524 nm。浓度为1 mg/mL的该单克隆抗体最佳加入量为10μL。用该方法制备的试纸条,可以检测猪尿中恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、依诺沙星和恶喹酸等9种氟喹诺酮类药物,检出限为20μg/L,在37℃时可以保存160天左右,在4℃时可以保存24个月。
- 林少华林少华罗红霞许文涛商颖葛长荣
- 关键词：氟喹诺酮胶体金猪尿
- 重组大肠杆菌BL21(DE3)/rbLF-N高密度培养条件优化被引量：8
- 2007年
- 研究了6种不同培养基,pH值和诱导条件对表达量的影响。结果表明,培养基为2×TY+M9+微量元素溶液,pH值为7.0,在对数生长中后期(OD600=1.96)用浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导4 h,rbLF-N的表达量最高,达到25.2%。在此条件下,用Bioengineering 19 L自控式发酵罐,以pH-stat的培养技术,高密度培养重组E.coli BL21(DE3)/pGEX-4T1,生产重组牛乳铁蛋白N末端多肽(recombinant bovine lactoferrin-N polypeptide,rbLF-N)。通过控制pH值、溶解氧以及补料方式,使工程菌E.coli BL21(DE3)/pGEX-4T1的发酵菌体OD600值达到72.6,发酵菌体干重为31.9 g/L,rbLF-N表达量为菌体总蛋白的26.8%。
- 罗红霞林少华任发政陈历水陈雅松田寒友
