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杨海彦
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
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发文基金:
国家重点实验室开放基金
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相关领域:
农业科学
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合作作者
张在平
内蒙古农业大学动物科学与医学学...
孟庆文
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
马学恩
内蒙古农业大学动物科学与医学学...
田进
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
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张在平
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中国预防兽医...
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1篇
2011
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靶向pol基因siRNA抑制J亚型禽白血病病毒复制的研究
被引量:2
2011年
为筛选能够有效抑制J亚型禽白血病病毒(ALV-J)复制的siRNA,本研究根据ALV的pol基因保守序列设计合成5对shRNA序列,并将其分别克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体中,构建siRNA表达重组质粒,分别为pcDNA-sh-pol711、pcDNA-sh-pol814、pcDNA-sh-pol1016、pcDNA-sh-pol1915和pcDNA-sh-pol2516。将重组质粒分别转染DF-1细胞6h后,以100TCID50的ALV-J感染细胞,并利用IFA、westernblot和real-timePCR方法评价其对ALV-J复制的抑制效果。IFA和westernblot检测结果表明:其中pcDNA-sh-pol711、pcDNA-sh-pol814和pcDNA-sh-pol2516可以有效抑制病毒囊膜蛋白的表达。Real-timePCR结果显示:与阴性对照和空载体对照相比,这3种siRNA在mRNA水平对ALV-J的抑制率达29%~86%。本研究在细胞水平上筛选的siRNAs可作为候选siRNAs,为抗鸡ALV-J的研究奠定基础。
张在平
马学恩
杨海彦
田进
孟庆文
关键词:
禽白血病病毒
SIRNA
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