李静静
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 供职机构：江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 一种耐低温α-乙酰乳酸脱羧酶在枯草芽孢杆菌中的高效表达被引量：5
- 2013年
- 从Bacillus subtilis L5-20染色体上克隆得到ALDC基因alsD,构建重组表达载体pMA5-alsD-His,将其转化到B.subtilis WB600中。SDS-PAGE结果显示ALDC在重组B.subtilisWB600中成功表达,其相对分子质量(Mr)为32×103。采用Ni柱亲和层析纯化重组ALDC,所得纯酶的比酶活为272.3 U/mg,总回收率为89.8%。该重组ALDC最适反应温度仅为25℃,在20～35℃范围内均表现出较高的活性。Ni2+对ALDC有一定的激活作用,Fe3+使ALDC活性完全丧失。经摇瓶培养,重组菌的ALDC酶活为27.0 U/mL,约为出发菌酶活的70倍。经5 L的发酵罐发酵放大试验,ALDC酶活最高可达75.9 U/mL。
- 李静静徐美娟张显饶志明
- 关键词：枯草芽孢杆菌Α-乙酰乳酸脱羧酶耐低温双乙酰酶学性质
- 离子液体催化合成柠檬酸植物甾烷醇酯的研究被引量：5
- 2013年
- 研究了离子液体在柠檬酸植物甾烷醇酯合成中的应用。通过植物甾烷醇酯化率的对比,确定最佳反应条件为:离子液体[pmim][HSO4]用量为植物甾烷醇质量的7%,酸醇摩尔比3∶1,植物甾烷醇的浓度0.15 mmol/mL,带水剂为甲苯,反应温度110℃,反应时间5 h。在最佳条件下,经3次平行实验测得平均酯化率大于91%。离子液体[pmim][HSO4]在循环使用6次后仍有较高的催化活性。由质谱分析可知,合成的产物为柠檬酸植物甾烷醇酯。
- 李静静何文森潘晓霞王梅桂贾承胜张晓鸣冯骉
- 关键词：植物甾烷醇离子液体酯化合成
- α-乙酰乳酸脱羧酶基因工程菌的构建、高效表达及酶学性质研究
- 通过PCR扩增得到a-乙酰乳酸脱羧酶基因saald,将其克隆到表达载体pMA5上，以Bacillus subtilis为表达宿主，构建α-乙酰乳酸脱羧酶基因工程菌，实现了ALDC的高效表达。对重组蛋白进行纯化，获得具有活...
- 李静静徐美娟饶志明
- 关键词：Α-乙酰乳酸脱羧酶基因工程菌发酵工艺酶学性质
- 文献传递
- 苯乙酮酸脱羧酶基因的克隆与表达及静息细胞生物转化乙基香兰素的研究被引量：4
- 2013年
- 对恶臭假单胞杆菌(Pseudomonas putida ATCC12633)中的苯乙酮酸脱羧酶基因mdlC进行克隆,导入质粒载体pET28a中,将构建得到的重组质粒pET28a-mdlC转化于宿主细胞E.coliBL21(DE3),重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)(pET28a-mdlC)经IPTG诱导,SDS-PAGE分析得到相对分子质量约为57 000的蛋白质条带。将E.coli BL21(DE3)(pET28a-mdlC)和E.coli BL21(DE3)(pET30a-mdlB)两株重组菌以混合静息细胞的形式作为生物催化剂,利用各自胞内的重组酶对3-乙氧基-4-羟基苯乙醇酸(乙基扁桃酸)脱氢氧化、脱羧合成乙基香兰素。未经优化,催化24 h后反应液中乙基香兰素的质量浓度可达1.94 g/L,且没有副产物产生。同时研究表明,该混合静息细胞重复使用3次能保持90%以上的催化活力,还有效缩短了反应时间。
- 潘晓霞李静静何文森李大力贾承胜张晓鸣冯骉
- 关键词：基因克隆乙基香兰素生物转化
