李耀东
- 作品数：9 被引量：36H指数：4
- 供职机构：青海大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学文化科学更多>>
- SDS热变性法可提高PCR-SSCP检测线粒体DNA突变分析结果的准确性及清晰度*
- 2011年
- 目的通过改变变性方法来提高PCR-SSCP检测小型哺乳动物线粒体DNA突变分析结果的准确性及敏感度,以期提高大样本动物线粒体DNA突变的筛查准确性和筛查效率。方法利用碱变性和SDS热变性对PCR产物进行处理,并加样到聚丙烯凝胶上,观察两者结果,并对背景色、条带清晰度、样本间距、易判性及敏感度等方面进行对比。结果通过比较,SDS热变性试验方法提高了条带的清晰度,降低了背景色。结论 SDS热变性法可提高PCR-SSCP检测线粒体DNA突变分析结果的准确性及清晰度,可提高大样本动物DNA突变的筛查准确性和筛查效率。
- 沈国平李耀东朱德锐龙启福
- 关键词：PCR-SSCP小型哺乳动物线粒体DNA突变
- 主题式生物信息学教学理论和实践初索
- 2018年
- 生物信息学(Bioinformatics)是生命科学的研究中。我们本着教学和科研共促进的宗旨,融合分子生物学、医学统计学和计算机信息技术,充分结合网络环境,将理论授课和上机实践有机结合,通过课前问卷调查分析,依据调查结果制定教学方案并加以实施,然后进行课后分析,以完善医学生物信息学教学模式,为生物信息学在全校开展和生物信息学教学的进一步研究奠定了一定的基础。
- 安娟刘芳魏晓星李耀东顾存林
- 关键词：生物信息学教学研究教学
- 线粒体基因组全序列研究与动物分子系统发生的关系被引量：11
- 2006年
- 李耀东综述）邵嘉会
- 关键词：线粒体基因组全序列动物
- 高效液相色谱检测青海湖嗜盐菌胞内积聚的相溶物质四氢嘧啶被引量：15
- 2013年
- 从20份青海湖水样中,分离获得了35株中度嗜盐菌株.耐盐梯度实验表明:水体中以中度嗜盐菌为主,约占65.7%;弱嗜盐菌次之,约占25.7%;非嗜盐菌与耐盐菌相对较少,约占8.5%.采用80%乙醇法抽提中度嗜盐菌胞内的Ectoine,利用TLC和HPLC分析,结果表明:青海湖中度嗜盐菌中,大多数胞内积聚相溶物质Ectoine;在最适生长盐度下,中度嗜盐菌QHL1、QHL5、QHL10、QHL26和QHL28的胞内Ectoine含量分别为258.6μg·mL-1、325.47μg·mL-1、208.8μg·mL-1、292.31μg·mL-1和295.13μg·mL-1,以此初步获得5株具有Ectoine高产潜力的野生菌株.
- 李耀东龙启福李文军芮豪辰刘建杨芳朱德锐
- 关键词：中度嗜盐菌ECTOINE
- 余甘子对类风湿性关节炎的影响被引量：5
- 2016年
- 建立模型后各组大鼠给予相应灌胃给药,以大鼠体重变化、足爪肿胀体积、关节炎指数(AI)、关节软骨和滑膜组织的病理变化以及血清中TNF-α含量变化,研究余甘子抗RA的作用效果。与模型组比较,余甘子高、低剂量组与西药组均可见足爪肿胀体积小、AI值低、关节病理变化轻以及血清中TNF-α含量少,其中余甘子高剂量组效果最明显。余甘子对大鼠佐剂性关节炎具有治疗作用。
- 李响张晴晴李耀东
- 关键词：类风湿性关节炎弗氏完全佐剂
- 青海湖盐单胞菌QHL1 ectABC基因簇克隆鉴定及二氨基丁酸转氨酶基因ectB的异源表达
- 2013年
- 从青海湖20份水样筛选得到一株优势中度嗜盐菌QHL1,经初步鉴定为盐单胞菌属。设计保守基因ectB的引物,以基因组DNA为模板,PCR扩增获得ectB基因(1269 bp)。利用染色体步移技术,克隆获得四氢嘧啶合成基因簇ectABC及其上下游调控序列。DNAStar软件分析表明ectA、ectB和ectC位于同一个操纵子上,大小分别为579 bp、1269 bp和390 bp,预测分别编码192、422和129个氨基酸的肽链。同源性分析表明:Halomonas sp.QHL1ectABC基因簇所编码的二氨基丁酸转乙酰基酶(EctA)、二氨基丁酸转氨酶(EctB)和四氢嘧啶合成酶(EctC)与Halomonas sp.Nj223 ectABC基因簇所编码的酶蛋白相似性分别达57%、96%和85%。利用分子克隆技术构建二氨基丁酸转氨酶基因ectB的重组表达载体pET-28-ectB,通过限制性内切酶酶切和测序分析,结果表明其目的基因的插入位置、大小和读码框均正确。诱导表达重组菌,SDS-PAGE分析,目的蛋白条带约46 kDa。
- 刘建朱德锐李逸李丹丹李耀东刘德立
- 关键词：四氢嘧啶染色体步移克隆表达
- 融合蛋白TOP_3原核表达载体的构建、表达及纯化研究
- 2009年
- 目的:利用HIV病毒TAT蛋白转导结构域、人缺氧诱导因子1α氧依赖降解结构域以及CASPASE3构建融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化。方法:分别构建原核表达质粒pET-28a(+)-TAT、pET-28a(+)-TAT-ODD、pET-28a(+)-TAT-ODD-CASPASE3(pET-28a(+)-TOP3);在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS内,利用镍-亚硝胺乙酸-组氨酸(Ni-NTA-His)亲和层析法对重组蛋白TOP3进行纯化。结果:成功构建了pET-28a(+)-TOP3的原核表达载体,经过优化表达和纯化条件,融合蛋白在IPTG诱导下获得特异性表达,纯化得到了高纯度的目的蛋白。结论:融合蛋白TOP3的成功表达及纯化,为该融合蛋白应用于肿瘤的治疗研究奠定了理论基础。
- 王嵘刘芳孙伟龙启福赵延礼李耀东顾存林
- 低氧对喜马拉雅旱獭线粒体ATPase6基因表达的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨低氧下喜马拉雅旱獭与平原地区同种动物(松鼠)线粒体ATPase基因表达的差异,试图说明低氧下低氧适应性动物的有氧代谢能力增强,以适应低氧环境。方法酚氯仿法分别提取样品和对照动物全基因组,RT-PCR获得线粒体ATPase6基因片段,通过灰度比较探讨喜马拉雅旱獭线粒体ATPase6基因表达的差异。结果高原动物ATPase6基因的表达高于平原动物。结论低氧下高原动物为维持生理代谢,其基础代谢的水平要高于平原动物,而这种基础代谢水平的升高与ATPase6基因结构的改变及其表达的改变是呈相关性的。
- 李耀东顾存林龙启福
- 关键词：喜马拉雅旱獭低氧
