李永丽
- 作品数:57 被引量:69H指数:5
- 供职机构:河南科技大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金博士科研启动基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 一种融合基因及其制备方法、融合基因表达载体及其构建方法、融合基因工程菌及其应用
- 本发明公开了一种融合基因及其制备方法、融合基因表达载体及其构建方法、融合基因工程菌及其应用,属于基因工程技术领域。该融合基因,将蛋白转导域TAT连接入利尿多肽HKI序列,借助TAT的高效跨膜转运作用,使HKI快速地穿过食...
- 周洲李永丽源春彦吴建李云祥李晓斌蒋路平
- 新疆野苹果内生娄彻氏链霉菌A-m1的鉴定和发酵条件优化及抑菌广谱作用被引量:9
- 2020年
- 【目的】研究新疆野苹果内生链霉菌菌株A-m1的分类地位,优化其发酵条件,测定其对多种植物病原物的抑菌活性,明确其广谱抑菌性,为相关病害的生物防治以及该菌株的应用提供参考。【方法】对菌株A-m1菌落培养性状、形态特征、理化性质和16S rDNA序列进行研究;以葡萄座腔菌为靶标菌,确定最高抑菌活性所需的基础培养基,优化碳源和氮源种类,确定最优发酵条件;测定发酵滤液对9种供试植物病原菌的抑菌活性。【结果】菌株A-m1是娄彻氏链霉菌,命名为Streptomyces rochei A-m1。高抑菌活性所需基础培养基为高氏一号,最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为硝酸钾;添加培养基体积5%的种子液、发酵温度23~32℃之间、pH 6~8之间、装液量100/500 mL和发酵培养4天为较优的发酵条件。发酵滤液对参试的9株植物病原菌均表现出抑菌活性,具广谱抑菌性;其中对葡萄座腔菌、苹果拟茎点霉的抑菌率可达95%以上,对胶孢炭疽菌、小麦赤霉病菌和小麦纹枯病菌的抑菌率超过80%,表现出强抑菌作用。【结论】链霉菌S.rochei A-m1抑菌谱较广、抑菌活性高,具有防治部分作物真菌性病害的应用潜力。
- 李永丽王亚红周洲曲良建
- 关键词:新疆野苹果葡萄座腔菌发酵条件
- 毛白杨转录因子PtCBF5的表达模式分析(英文)被引量:12
- 2010年
- 利用RT-PCR手段克隆得到1个毛白杨CBF基因cDNA,命名为PtCBF5(GenBank注册:DQ354395)。PtCBF5全长837bp,该序列包括起始密码子ATG和42bp的5′末端非编码区,终止密码子TGA和98bp的3′末端非编码区,开放阅读框编码231个氨基酸。RT-PCR半定量研究表明:PtCBF5在叶片组织中的表达量高,茎、根中的表达量低。组培苗在低温、干旱、NaCl、ABA条件下处理诱导24h,在低温和干旱的条件下PtCBF5表达量在诱导30min后开始增加,分别在2h和6h达到峰值,24h后又恢复到初始水平;而高盐和ABA存在的条件下未有显著变化。PtCBF5在植物体适应寒冷和干旱的过程中可能有着重要作用,尤其在逆境初期。
- 周洲李永丽
- 关键词:毛白杨基因表达转录分析
- 具有防病杀虫双重作用的链霉菌及其应用、培养方法、生防菌剂
- 本发明涉及具有防病杀虫双重作用的链霉菌及其应用、培养方法、生防菌剂,属于植物病虫害防治技术领域。本发明中分离得到一株具抑菌活性的内生链霉菌MS001;其发酵液对葡萄座腔菌、胶孢炭疽菌、苹果拟茎点霉、小麦纹枯病菌、小麦全蚀...
- 周洲李永丽曲良建王亚红张梦珂常乐
- 文献传递
- 欧美杨108高效组培再生系统被引量:2
- 2016年
- 欧美杨108生产性状优良,是基因工程转化的理想受体,高效的组培再生系统是转化工作的基础。以欧美杨108茎段、叶柄、叶片3种外植体为起始材料,确定了植株再生过程中诱导丛生芽、芽的茎伸长和生根培养的最优培养条件,建立了稳定高效的再生培养系统。结果表明:基本培养基MS优于WPM;最适从生芽诱导培养基为MS+TDZ 0.05 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L,茎段、叶柄、叶片3种外植体丛生芽诱导率分别达100%、100%和86%。丛生芽需要进行茎伸长诱导的环节,茎伸长诱导效率最高是MS+KT 0.5 mg/L+GA3 2 mg/L+果糖30 g/L培养基,茎段和叶柄丛生芽茎伸长诱导最好,诱导培养20 d,得到平均芽长3 cm的有效芽,增殖系数大于4。抽茎芽转入生根培养前,须经MS基本培养基壮化培养。在1/2 MS+IAA0.02 mg/L+IBA 0.02 mg/L+AC3 g/L+蔗糖30 g/L培养基上,试管苗生根率可达100%,苗体健壮。欧美杨108高效组培再生系统为其遗传转化奠定了基础。
- 周洲李永丽安世恒胡建军
- 关键词:欧美杨108离体培养
- 瓦松观赏栽培技术被引量:2
- 2010年
- 瓦松(Orostachys fimbriatus)为景天科多年生肉质草本,成株尖塔型,全体粉绿色,高10~40cm,花期7—10月,花期长达40天,果期8-11月。成片种植或作地被植物,布置花坛、花境,盆栽后供庭院陈设及造景,非常有情趣。
- 周洲李永丽
- 关键词:观赏栽培地被植物多年生景天科花期草本
- 林学专业方向设置探讨
- 2012年
- 林学专业本科教育体系的改革,是中国林业高等教育面临的新问题。本文以新时期林业生产为出发点,提出林学专业人才培养方向的一些建议。
- 周洲李永丽
- 关键词:林学专业教育体系
- 一种杨树乙酰-乙酰载体蛋白硫脂酶基因RNAi载体及其应用
- 本发明涉及一种杨树乙酰-乙酰载体蛋白硫脂酶基因RNAi载体及其在沉默目的基因中的应用,所述载体是由PtFATB基因片段以正反两个方向插入植物表达载体中构建而成,所得载体通过农杆菌转化获得转基因植株。通过将转基因植株与野生...
- 周洲李永丽陈双臣刘爱荣刘龙昌魏素玲
- TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白的原核表达及其在舞毒蛾幼虫体内的跨膜转导被引量:1
- 2014年
- 【目的】为了探究滞育激素经昆虫取食的生物效应,需设计一种能够加速跨膜运输的融合蛋白,克服经昆虫消化道的降解作用。【方法】本研究以分月扇舟蛾Clostera anastomosis滞育激素基因Cloan-DH和TAT穿膜肽编码序列为基础,构建TAT-Cloan-DH融合基因;然后以增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)为标签,构建在p ET-22b载体中。在0.2 mmol/L IPTG诱导下,在大肠杆菌Escherichia coli BL21 Rosetta(DE3)中表达出TAT-CloanDH-EGFP融合蛋白。再分别将表达有TAT-Cloan-DH-EGFP和EGFP融合蛋白的大肠杆菌BL21菌体拌入人工饲料,经舞毒蛾Lymantria dispar幼虫持续取食0,8,24,48,72和90 h后,随机挑选试虫进行组织固定并制作石蜡切片,选取中肠所在体段切片进行组织荧光分析。【结果】37℃0.2 mmol/L IPTG诱导条件下,表达的TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白的分子量为61 k D,主要以包涵体形式表达,融合蛋白约占细胞总蛋白含量的18.1%;随着试虫取食含TAT-Cloan-DHEGFP融合蛋白饲料的增加,虫体组织的绿色荧光强度逐渐增加,取食72 h后,组织荧光强度达到最高。【结论】实验结果说明融合蛋白TAT-Cloan-DH-EGFP可以通过消化道横向跨膜运输,到达虫体其他组织,且该过程与蛋白的摄入量成比例。
- 周洲李永丽源春彦曲良建
- 关键词:舞毒蛾滞育激素蛋白转导域融合蛋白
- 哥斯达黎加链霉菌A-m1的促生作用及解析被引量:4
- 2021年
- 为了探究哥斯达黎加链霉菌菌株A-m1对植物的潜在促生作用及机制,首先利用番茄苗生长分析菌株A-m1具有的促生作用,然后对菌株A-m1的全基因组序列进行比对分析,解析促生作用相关的遗传基础,最后使用沙尔科夫斯基反应法(Salkowski)测定菌株A-m1产吲哚乙酸(IAA)能力,铬天青(CAS)法验证产铁载体活性。结果表明,菌株A-m1对番茄幼苗表现出显著促生作用,促生作用与菌体添加量呈正相关,菌株固体发酵产物在基质中添加量为40 g/kg时,番茄植株的叶长、株高、整株鲜质量、整株干质量、根干质量和茎秆直径分别增加了107.1%,70.7%,439.9%,427.4%,473.4%和78.7%。菌株A-m1基因组包含有促进植物生长相关的生长素、细胞分裂素、铁载体、ACC脱氨酶、植酸酶、磷酸酶、固氮酶基因;后续的生化分析进一步证明,菌株A-m1具有合成IAA和铁载体的能力。番茄幼苗的生长证实了菌株A-m1的促生作用,基因组分析和生化验证解析了促生的机制,为该菌株的进一步开发利用奠定了基础。
- 史娟李永丽常乐郑炜凡周洲周洲
- 关键词:促生作用基因组IAA铁载体