张雪
- 作品数：5 被引量：69H指数：4
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划“十二五”国家科技计划农村领域国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 生物食品添加剂在草莓保鲜中的应用被引量：10
- 2013年
- 以普鲁兰多糖、ε-PL、纳他霉素、nisin为防腐和保鲜基质,设计四因素三水平正交实验,采用涂膜方式对草莓果实进行保鲜试验,通过对草莓的失重率、固酸比、VC含量变化,以及草莓感官品质与微生物指标的检测与评价,确定普鲁兰多糖10%,ε-PL 300mg/L,纳他霉素100mg/L,nisin 40mg/L为最佳涂膜剂配比,能够显著提高草莓的保鲜效果,延长贮藏时间。
- 张雪赵娟谭之磊周斌贾士儒
- 关键词：普鲁兰多糖Ε-聚赖氨酸纳他霉素NISIN草莓保鲜
- 利用Red同源重组技术构建产L-苏氨酸的基因工程菌被引量：9
- 2010年
- 利用Red重组技术构建不同基因突变的L-苏氨酸工程菌大肠杆菌ITHR,研究单敲除metA、ilvA和双敲除metA、ilvA基因后对L-苏氨酸积累的影响。应用质粒pKD46介导的Red同源重组系统,通过第一次同源重组将拟敲除基因替换为氯霉素抗性基因,再通过重组酶在FRT位点发生第二次同源重组,消除抗性基因,成功敲除了菌株ITHR体内苏氨酸合成的代谢旁路途径中的metA和ilvA基因,构建了三株不同的基因突变株。将携带苏氨酸操纵子的工程质粒pWYE065电转化入敲除不同基因的突变株中,构建基因工程菌。经5L发酵罐发酵产酸实验,未敲除任何基因的菌株ITHR/pWYE065L-苏氨酸的产量为5.55±0.51g/L,metA基因单敲除菌株ITHR△metA/pWYE065L-苏氨酸产量为9.77±1.83g/L,ilvA基因单敲除菌株ITHR△ilvA/pWYE065L-苏氨酸产量为8.65±1.42g/L,同时敲除ilvA和metA基因的菌株ITHR△metA△ilvA/pWYE065L-苏氨酸的产量增加到13.6±1.14g/L。通过敲除L-苏氨酸的旁路代谢途径中的关键酶的基因,可以增强L-苏氨酸积累的效果,为L-苏氨酸工程菌的进一步改造奠定了基础。
- 闫继爱张雪张芸左佃光陈宁温廷益
- 关键词：大肠杆菌RED同源重组基因敲除L-苏氨酸发酵
- Red重组系统用于大肠杆菌基因修饰研究进展被引量：41
- 2008年
- Red重组作为一种新的重组系统已经被广泛用于大肠杆菌的基因敲除、基因替换。与传统的Rec重组相比,Red重组具有同源臂短,重组效率高等优点。分别详细介绍了Red重组系统中Exo、Beta、Gam3种蛋白质的功能,Red重组系统运用于大肠杆菌基因敲除的3种质粒及其功能,同时概括了Red重组的技术要点及技术难点,分析了文献报道的阿拉伯糖诱导浓度和诱导时间、转化后的复苏温度及时间、引物同源臂长度对于重组率的影响,总结出了Red重组的最佳条件。
- 张雪温廷益
- 关键词：RED重组大肠杆菌基因敲除L-阿拉伯糖
- 甘氨酸对淀粉酶产色链霉菌Cbγ4产ε-聚赖氨酸的影响被引量：1
- 2012年
- 为了研究甘氨酸对淀粉酶产色链霉菌Cbγ4产ε-聚赖氨酸的影响,在种子培养阶段添加不同浓度的甘氨酸。结果表明,在种子培养初期添加3 g/L甘氨酸,天冬氨酸激酶活性会明显提高,ε-聚赖氨酸最高可积累0.51g/L,比对照组高27.5%。5L自控式发酵罐发酵ε-聚赖氨酸试验中,种子液中添加甘氨酸组比对照组明显提高了菌体耗糖速度,缩短了达到最高生物量的积累时间,ε-聚赖氨酸产量也提高至12.87g/L,糖酸转化率也比对照组提高了30.6%。因此甘氨酸可作为一种新型营养物质用于ε-聚赖氨酸的生产。
- 谭之磊宋帅王甜张雪郭凤柱
- 关键词：Ε-聚赖氨酸甘氨酸天冬氨酸激酶
- 含苏氨酸操纵子重组质粒的构建及其对大肠杆菌L-苏氨酸积累的影响被引量：12
- 2009年
- 【目的】通过分子生物学手段构建重组质粒,将其转入野生型大肠杆菌W3110,分析含苏氨酸操纵子基因的质粒及质粒定点突变解除反馈抑制时,对L-苏氨酸积累的影响。【方法】以W3110染色体DNA为模板,PCR扩增苏氨酸操纵子基因,即启动子THrLp、编码前导肽基因thrL以及thrA、thrB、thrC基因,通过重叠延伸PCR的方法对thrA基因定点突变,解除苏氨酸对它的反馈抑制,构建出重组表达质粒pWYE112和pWYE134,5L发酵实验测定L-苏氨酸的产量。【结果】经5L发酵罐发酵产酸实验,W3110的L-苏氨酸产量为0.036±0.004g/L,携带含苏氨酸操纵子质粒的W3110菌株L-苏氨酸产量为2.590±0.115g/L,质粒上thrA解除反馈抑制后,L-苏氨酸的产量增加到9.223±1.279g/L。【结论】过表达苏氨酸操纵子基因可以使L-苏氨酸积累,进一步解除thrA基因的反馈抑制,可以增强L-苏氨酸积累的效果,为L-苏氨酸工程菌改造的进一步研究奠定了基础。
- 张雪闫继爱于雷张国强张芸陈宁温廷益
- 关键词：L-苏氨酸重叠延伸PCR大肠杆菌发酵定点突变
