张莉莎
- 作品数:9 被引量:31H指数:3
- 供职机构:贵阳医学院附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 乙型肝炎病毒DNA定量检测及意义分析
- 目的:检测乙型肝炎病毒(HBV)感染患者血清内 HBV DNA量,探讨HBV复制水平与HBV免疫学标志物间关系.方法:492例乙肝病毒感染者血清用萤光聚合酶链反应作 HBV DNA定量检测,35名正常人作对照.同时用固相...
- 丁静娟张莉莎田苗李媛媛鲍丽雅
- 文献传递
- 血清中HCV抗体与HCV-RNA检测在临床中的应用被引量:3
- 2011年
- 丙型病毒性肝炎(丙肝)是由丙型肝炎病毒(HCV)感染所致,是一种世界性的有严重并发症的传染性疾病。丙型肝炎病毒是单链正股RNA病毒,主要在肝脏中复制,感染1~2周内即可在血清中检出HCV-RNA,而3~4周可检出免疫血清标志物(抗-HCV)[1]。目前,临床上常通过检测抗-HCV(IgG)判断是否为丙肝感染,但抗-HCV(IgG)
- 张莉莎王良宏杨礼琼
- 关键词:阳性率丙肝病毒HCVHCV-RNA抗体血清
- 登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列原核载体的构建及蛋白表达
- 2011年
- 目的体外扩增登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列,构建pET28a(+)-ME、pET28a(+)-NE,分析其在E-coli BL21中的表达。方法 PCR方法扩增(DENV-2)M株、NGC株E基因部分序列并构建原核重组载体pET28a(+)-ME、pET28a(+)-NE,将重组载体转化E-coli BL21,IPTG诱导表达,采用镍离子亲和层析的方法纯化目的蛋白并用SDS-PAGE电泳和Western-Blot进行鉴定。结果经双酶切、PCR和测序证实成功构建原核重组载体pET28a+-ME、pET28a(+)-NE,Western-Blot证实成功诱导出目的蛋白,SDS-PAGE电泳证实亲和层析法纯化后得到较高纯度的目的蛋白。结论检测到目的蛋白的表达,经纯化后得到纯度约为90%的目的蛋白,为研究登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E蛋白在致病机制方面奠定了一定的基础。
- 张莉莎吕秉乐左丽
- 关键词:E蛋白原核表达
- 乙型肝炎病毒DNA定量检测及意义分析被引量:1
- 2001年
- 目的检测乙型肝炎病毒 (HBV)感染患者血清内HBVDNA量 ,探讨HBV复制水平与HBV免疫学标志物间关系。方法 492例乙肝病毒感染者血清用荧光聚合酶链反应作HBVDNA定量检测 ,35位正常人作对照。同时用固相放免法检测HBV感染的免疫学标志 ,统计不同免疫指标组合时HBVDNA检出率与含量。结果 35份正常人血清未检出HBVDNA ,46 2份HBV感染者血清中 ,311例HBVDNA阳性 ,检出率 6 7 32 %。其中HBsAg,抗HBc、HBeAg阳性血清 ,HBVDNA阳性检出率为96 0 6 % (195 / 2 0 3) ,平均HBVDNA含量 1 42× 10 8拷贝 /ml。HBsAg、抗 HBc、抗 HBe阳性血清 ,检出率5 0 85 % (90 / 177) ,平均含量 5 16× 10 6拷贝 /ml。HBsAg、抗 HBc阳性血清 ,检出率 40 98% (2 5 / 6 1) ,平均含量 3 18× 10 6拷贝 /ml。单项抗 HBc阳性血清 ,检出率 9 0 9% (1/ 11) ,其HBVDNA含量为 1 17×10 7拷贝 /ml。 6 1例HBsAg阳性、抗 HBc阳性血清作了HBcAg检测 ,发现HBVDNA阳性检出率与HBcAg呈正相关性。结论HBeAg与HBVDNA有很好的相关性 ,5 0 %抗HBe阳性 ,或e系统阴性患者病毒复制仍未停止 ,只是复制水平有所下降。HBcAg与病毒复制亦呈正相关性。荧光定量PCR检测血清HBVDNA含量有助于准确评价和判断HBV免疫标志物的临床意义。
- 丁静娟张莉莎田苗李媛媛鲍丽雅
- 关键词:乙型肝炎病毒聚合酶链反应荧光光度测定法乙型肝炎
- HBV感染者血清标志物模式与HBV DNA的水平被引量:3
- 2009年
- 目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清标志物模式与HBV DNA水平的关系。方法:采用时间分辨荧光免疫定量分析法(TRFIA)和荧光定量PCR技术(FQ-PCR)分别检测542例乙型肝炎感染者血清HBVM和HBV DNA。结果:542例乙型肝炎感染者血清标本HBVM模式有10种,HBV DNA检出总阳性率83.39%(452/542),各种模式HBV DNA的阳性率存在显著差异性,高拷贝数的HBV DNA主要存在于HBeAg阳性的各种模式中,与其它模式比较有显著差异(P<0.05)。结论:动态监测HBVM和HBV DNA含量有利于对乙肝患者的诊断及疗效提供客观依据。
- 李媛媛张莉莎肖俊鲍丽雅田苗
- 关键词:乙型肝炎病毒聚合酶链反应
- 单用或联合应用拉米夫定和干扰素-α1b对乙型肝炎血清标志物的影响被引量:10
- 2003年
- 由于HBV复制较为顽固,单一抗HBV药物疗效欠理想。因此,选用两种或两种以上具有抗病毒、免疫调节或免疫增强药物联合或序贯治疗很有必要。拉米夫定、干扰素-α被一致认为对抑制HBV复制有肯定疗效,前者对HBV—DNA的阴转效果良好,但对HBeAg的血清转换却不太理想,且“反跳”率较高。拟采取拉米夫定和干扰素-α联合用药方式,以达到协同增效的目的。
- 杨京张莉莎赵雪珂
- 关键词:拉米夫定干扰素抗病毒药物乙型肝炎血清标志物
- 登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列原核蛋白多克隆抗体的制备
- 2011年
- 目的制备登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列原核蛋白的小鼠多克隆抗体并进行鉴定。方法利用SDS-PAGE电泳的方法将纯化后的登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列原核表达蛋白浓缩,切割目的条带并研磨制成抗原,皮下多点分次注射BALB/c小鼠,采用Western-Blot、间接免疫荧光法对小鼠血清多克隆抗体进行鉴定。结果经SDS-PAGE电泳成功地将纯化后的登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列原核表达蛋白浓缩,并获取了抗登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列原核表达蛋白的多克隆抗体。结论本实验中所用到的登革Ⅱ型病毒M株、NGC株E基因部分序列原核蛋白为可溶性抗原,通过切胶研磨制成颗粒性蛋白抗原能获得良好的免疫效果,该方法制备的抗原浓度及纯度高,由此获得了高效价高特异性的多克隆抗体。
- 张莉莎吕秉乐左丽
- 关键词:E蛋白多克隆抗体
- 贵阳地区1891例儿童乙型肝炎病毒感染调查分析被引量:1
- 2010年
- 鲍丽雅李媛媛田苗张莉莎肖俊谢渊
- 关键词:儿童乙肝疫苗接种保护性抗体乙肝感染乙肝血清标志物构成比
- 乙型肝炎病毒S基因限制性片段长度多态性分型方法的建立及应用被引量:13
- 2004年
- 目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)S基因片段聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(RFLP)的基因分型方法并用于基因型与临床疾病谱关系的研究。 方法 比较GenBank中124株各基因型HBV全序列的S基因核苷酸序列及13株单独S基因序列,设计利用限制性内切酶Mbo Ⅰ、BsTN Ⅰ、BsmA Ⅰ、HpaⅡ酶切S基因片段鉴定HBV基因型(A-F)的方法。对贵州地区176份乙型肝炎患者血清进行基因分型并分析基因型与疾病谱的关系。直接测序2份B型和3份C型毒株的PCR扩增产物,以验证本酶切分型方法的正确性。 结果 测序结果证明本方法能够准确鉴定基因型。在176份标本中,B型100份(56.8%),C型76份(43.2%),未发现其他基因型。B型中无症状携带者(ASC)比例(40.0%)高于C型(15.8%),x2=12.16,P<0.005;慢性中度比例(14.0%)低于C型(31.6%),x2=7.88,P<0,005。 结论 本S基因片段PCR-RFLP基因分型方法简便、准确。贵州地区存在HBV B和C基因型。
- 彭亮丁静娟张莉莎
- 关键词:乙型肝炎病毒S基因限制性片段长度多态性基因分型疾病谱