张权庚 作品数:8 被引量:8 H指数:2 供职机构: 首都医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 北京市教委科技发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
医学高校兼职班主任的定位与认识 被引量:4 2016年 高校班主任兼具大学生健康成长、成人与成才的重要职责,青年专业教师担任兼职班主任需要提高思想觉悟,在教育理念、教育素养、教育能力等方面的不断自我提升,将思想教育与专业教育结合起来理清工作思路,增强责任意识,为做好兼职班主任工作奠定基础。 陈彦 李蕴 王炜 温铭杰 张权庚 孙英关键词:兼职班主任 医学高校 专业教师 OPG-HSP65重组蛋白的原核表达及其生物学活性研究 被引量:1 2009年 PCR扩增OPG-HSP65基因,构建原核重组表达载体pET-28a-OPG-HSP65,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达产生包涵体形式的目的蛋白。对重组蛋白进行Western blot检测表明,重组蛋白能与抗His-Tag单克隆抗体及鼠抗人OPG单克隆抗体特异性结合。对重组蛋白进行尿素洗涤纯化,进而透析、复性。经破骨细胞生长抑制实验和抑炎实验表明,重组蛋白能减少破骨细胞生成及减轻迟发型超敏反应小鼠模型炎症反应。 张月 刘舒 马静 李慎涛 王炜 张权庚 赵文明关键词:骨保护素 热休克蛋白65 重组蛋白 人骨保护素-热休克蛋白70融合蛋白在昆虫细胞中的表达和活性分析 2009年 目的:利用BaculoDirect杆状病毒表达系统融合表达人OPG功能片段p22-194和分枝杆菌HSP70p111-125基因,并鉴定重组蛋白及其生物学活性。方法:将编码人OPG功能片段和分枝杆菌HSP70功能片段基因克隆至杆状病毒转座载体,将重组转座载体与BaculoDirectTM Linear DNA进行LR重组连接反应,构建出重组杆状病毒DNA,转染Sf9昆虫细胞,获得重组病毒。在Sf9细胞中进行表达,并对表达产物进行SDS-PAGE电泳、Western blotting分析,用Ni柱纯化。采用破骨细胞生成抑制试验和抑炎试验鉴定表达产物的生物学活性。结果:重组病毒在感染昆虫细胞后48h开始出现一相对分子质量为28kDa大小的特异条带,感染后72~96h蛋白量达到高峰。破骨细胞生成抑制实验及抑炎试验结果显示,重组蛋白能明显抑制破骨细胞的生长和分化,同时亦具有抑制炎症反应的作用。结论:利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中成功表达OPG-HSP70融合蛋白,该融合蛋白具有抑制破骨细胞生成和抑制炎症反应生物学活性。 刘舒 张权庚 张月 马静 刘振龙 赵文明关键词:人骨保护素 热休克蛋白70 昆虫细胞 基因表达 BCL10高表达引起脾脏边缘带B细胞抗凋亡而致其体内增生 被引量:2 2010年 目的以Eμ-BCL10转基因(transgenic,Tg)小鼠为模型研究BCL10高表达引起MALT淋巴瘤发病的分子机制。方法 PCR鉴定Eμ-BCL10转基因小鼠,Western blotting检测BCL10转基因蛋白的表达,组织学方法显示BCL10Tg小鼠脾脏MALT淋巴瘤的前体细胞-边缘带(marginalzone,MZ)B细胞扩增,流式细胞仪鉴定脾脏边缘带B细胞并分离出这群B细胞用于抗凋亡机制的研究,使用Annexin V-FITC/PI双染法经流式细胞仪检测边缘带B细胞凋亡情况。结果 PCR鉴定BCL10转基因阳性(Tg/+)小鼠,Western blotting证明内源性BCL10蛋白在Tg/+和非转基因野生型(widetype,WT)小鼠中表达的水平相同;BCL10Tg/+小鼠BCL10蛋白的表达量是WT小鼠的2倍。组织学染色显示,BCL10Tg/+小鼠脾脏增生的B细胞可能是边缘带B细胞,将这群B细胞用CD21、CD23染色并经流式细胞仪分析,证明这群增生的B细胞正是CD21high/CD23low的边缘带B细胞。为了进一步研究边缘带B细胞的增生机制,采用CD43、CD23双染,然后通过流式细胞仪分选出BCL10Tg/+以及WT小鼠的边缘带B细胞。BCL10Tg/+小鼠的边缘带B细胞群约30%可以在含5%FBS的RPMI-1640中存活1周以上,而WT小鼠的边缘带B细胞群在第3天几乎全部死亡(P<0.01),这一结果说明,BCL10的高表达引起边缘带B细胞的抗凋亡效应。Anti-IgM诱导边缘带B细胞凋亡实验结果显示,BCL10高表达保护anti-IgM诱导的细胞凋亡。结论 BCL10高表达引起脾脏边缘带B细胞扩增,扩增的B细胞具有抗凋亡特性,这种抗凋亡特性影响抗原受体信号传导途径。这些结果可以在一定程度上解释因BCL10高表达而引起的MALT淋巴瘤的发病分子机制。 武丽峰 杨伊姝 陈彦 闫卓红 王爽力 孙闽 张权庚关键词:MALT淋巴瘤 抗凋亡 DNA甲基化转移酶3B在脑胶质母细胞瘤中的差异表达 2013年 目的脑胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中存在广泛的基因组低甲基化,本研究检查了DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DMNT3B)是否在这种肿瘤中的表达和突变情况,以期寻找肿瘤基因组低甲基化发生的原因。方法用RNA抽提试剂盒从25例人脑胶质母细胞瘤组织中提取总RNA,用反转录聚合酶链反应方法扩增DNMT3B的cDNA,然后测序,所得序列经DNASTAR软件与NCBI发表的正常序列进行比对。结果从25例脑胶质母细胞瘤样本中的成功扩增了全长DNMT3B cDNA,测序分析结果显示DNMT3B基因在该肿瘤样本中差异性存在多种剪接变异体,以DNMT3B-V1、DNMT3B-V3、DNMT3B-V7为主。没有发现改变氨基酸序列的点突变。结论 DNMT3B基因在脑胶质母细胞瘤中没有点突变,但存在多种剪接变异体(以DNMT3B-V3、DNMT3B-V7为主),其是否为脑胶质母细胞瘤的广泛基因组低甲基化的原因尚有待进一步研究。 白宇 陈彦 国添柱 刘庆阳 杨雪 冯颖 闫卓红 王丽佳 张权庚关键词:脑胶质母细胞瘤 BCL10高表达与MALT淋巴瘤发生分子机制的探讨 被引量:1 2012年 目的:运用EμSR-BCL10转基因小鼠模型研究BCL10高表达致黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤的分子机制。方法:用IgM+/CD21high/CD23low荧光标记的抗体染色后进行流式细胞仪分析MZ B细胞;用CD43和CD23磁珠抗体双阴性分离方法获得MZ B细胞并用于体外增殖刺激实验;使用anti-IgM体内注射法研究BCL10体内抗凋亡。结果:MZB细胞增生与BCL10蛋白表达水平存在量效关系。细胞增殖实验结果显示,anti-IgM刺激时转基因小鼠的MZB细胞比FVB野生型小鼠对照增殖高2~5倍,但在LPS或PMA+Ionomycin刺激时,两者差异无统计学意义。同时anti-IgM体内注射能诱导FVB小鼠的MZ B细胞凋亡,但转基因小鼠的MZ B细胞不发生凋亡。结论:BCL10表达水平与MALT淋巴瘤的前体细胞-MZ B细胞的增生具有正相关的量效关系,其导致增生的机制是其位于BCR受体下游使MZ B细胞在BCR受到刺激时增殖增强并且不发生凋亡。 孙闽 陈彦 闫卓红 张权庚关键词:BCL10 MALT淋巴瘤 转基因小鼠 r-干扰素在体外对HT-29细胞系生长抑制和杀伤作用的研究 张权庚PCR指纹法及PCR/SSO技术用于骨髓移植供者选择的比较研究 1997年 在11个家系内进行了骨髓移植的配型工作。用PCR分别扩增了供受者最具多态性的DRB和DQB基因的第二外显子,这些PCR产物在非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示具有单倍型特异性的,各不相同的带型格局,称为PCR指纹。同时进行了PCR指纹的交叉配型,及DRB1和DQB1基因的PCR/SSO杂交。PCR指纹和交叉配型具有简单、经济、灵敏、准确、快速等优点,对骨髓移植供者的选择,有突出的优越性。 王伟 杨立 田丁 赫翠珍 张权庚 高天祥关键词:骨髓移植 白细胞抗原 聚合酶链反应 移植免疫学