张明军
- 作品数:55 被引量:68H指数:4
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建
- 本发明涉及一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建,其特征在于:首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒,并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞,在表达Cre重组酶的...
- 逄大欣周杨欧阳红生朱建国张明军王铁东李莉聂代邦段新平毛丹
- 文献传递
- 甜味蛋白(brazzein)基因的人工合成及其在大肠杆菌中的重组表达被引量:5
- 2006年
- 根据从西非植物Pentadiplandra brazzeanaBaillion果实中分离的甜味蛋白brazzein的成熟区氨基酸序列,采用大肠杆菌(Escherichia coli)偏爱的密码子,人工合成了5对寡聚核苷酸序列,经体外连接和PCR扩增后得到了187 bp的brazzein的编码序列,将该序列插入pET-28a载体构建成重组表达载体pET-Br。将pET-Br转化至大肠杆菌BL-21细胞,诱导表达后得到了与预计相对分子质量相同的蛋白。该蛋白约占细菌可溶性蛋白的18.9%,分离纯化后通过蛋白复性,得到有微甜味的产物。
- 刘松财张永亮任晓慧张明军柳巨雄冯立文
- 关键词:甜味蛋白BRAZZEIN
- 丙戊酸钠促进猪再克隆胚胎体外发育被引量:1
- 2013年
- 对VPA处理的最佳处理时间和处理浓度进行探索,希望通过VPA处理来改善再克隆胚胎的发育能力。结果表明,使用1mmol/L VPA处理16h,可以获得较高的囊胚形成率。然后通过免疫荧光检测发现,囊胚时期acH3K9的乙酰化水平在处理组中高于非处理组。多能性因子Oct4、Nanog、Sox2和Klf4的实时定量检测结果则显示,它们之间的表达水平同样差异不显著。结果表明VPA能够显著提高猪再克隆胚胎体内发育能力。
- 孙羽王安峰韩杨陈仙菊张明军
- 关键词:体细胞核移植丙戊酸钠囊胚
- 一种新型的基因传递系统:PLGA微球
- 2007年
- 乳酸聚乙醇酸是一类可生物降解的高分子聚合材料,通过其自身降解来调节药物释放,具有良好的生物相容性。包裹或吸附药物而制成的微球多用于药物的缓释给药系统,近几年来将这一系统应用于包裹基因。该文介绍乳酸聚乙醇酸基因微球的制备方法、主动脱逸特性等。
- 任晓慧刘松财张明军张永亮
- 关键词:基因微球
- 猪生长激素启动子的克隆及功能分析被引量:1
- 2012年
- [目的]克隆猪生长激素启动子,确定其启动子核心序列和主要的顺式作用元件。[方法]根据NCBI上公布的序列设计引物,PCR扩增了猪生长激素5’端-1 821~+61 bp的序列,并通过移步缺失的方法,获得9段长短不一的启动子序列,将其分别构建到双荧光素酶表达载体pGL3-basic上。通过重组质粒瞬时转染大鼠垂体瘤细胞(GH3)、猪髋动脉血管内皮细胞(PIEC)和猪肾细胞(PK15)和转染后细胞荧光素酶活性的测定,检测这些5’末端缺失质粒在垂体及非垂体细胞中的相对转录活性。[结果]成功扩增了猪GH基因5’上游启动区1 882 bp的片段,并构建了9个pGL3-mGH promoter报告基因载体;双荧光素酶报告基因检测系统证实插入报告基因载体中的启动子具有非常强的细胞特异性。[结论]猪生长激素特异性在垂体细胞中表达,其最小启动子位于-110 bp以内,启动子区-218~-110 bp和-429~-218 bp间存在正向调控元件。
- 阮楠张明军鞠辉明白立景赵为民
- 关键词:基因表达
- BTBD9基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用
- 本发明公开了BTBD9基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用,以提取的牛基因组DNA为模板,设计特异性引物一对,克隆牛BTBD9基因基因的部分DNA序列,通过测序及基因型分型并将不同基因型与超数排卵性状进行关联分析,为牛的...
- 姜昊张嘉保袁宝陈承祯张明军闫向民高妍金永勋俞先峰付旭煌罗丹
- 文献传递
- 一种用于制备人类疾病动物模型的转基因猪及其培育方法
- 本发明提供一种用于制备人类疾病动物模型的转基因猪及其培养方法,采用基因工程的方法构建诱导性表达Cre重组酶表达载体pET28a-Mxl-Cre-BGHpolyA-FRT2neoR,用干扰素诱导剂聚肌胞(polyI:C)进...
- 欧阳洪生逄大欣陈立梅李莉李占军王铁东张明军任林柱闫森宋娜
- 文献传递
- ATG10基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用
- 本发明公开了ATG10基因作为牛超数排卵性状分子标记的应用,以提取的牛基因组DNA为模板,设计特异性引物一对,克隆牛ATG10基因基因的部分DNA序列,通过测序及基因型分型并将不同基因型与超数排卵性状进行关联分析,为牛的...
- 张嘉保姜昊袁宝陈承祯张明军王鹏高妍金永勋俞先峰付旭煌闫向民罗丹
- 文献传递
- 生长调控因子与GHRP-6微球的制备及对水貂生长的影响被引量:2
- 2009年
- 以乳酸-乙醇酸共聚物为载体,利用复乳-液中蒸发法制备pcDNA3-GRF微球、pIRES-HBs/AgSSM微球和GHRP-6微球。将空微球、pcDNA3-GRF微球(1 mg/kg),pIRES-HBs/AgSSM微球(1 mg/kg)和GHRP-6微球(1mg/kg)分别肌肉注射至水貂骨骼肌。120 d后,3个试验组水貂体长均高于空微球组(P<0.01);采用RIA法测定各组水貂血清IGF-Ⅰ浓度,3个试验组水貂血清IGF-Ⅰ浓度均比空微球组高,但pcDNA3-GRF微球组血清IGF-I浓度显著高于对照组(P<0.05)。结果表明:pcDNA3-GRF乳酸乙醇酸共聚物微球有明显的促水貂生长作用。
- 张永亮章倩倩侯锋张明军戴建威刘松财
- 关键词:微球生长激素释放因子
- 松子壳多糖对CDV和CPV的体外抗病毒活性被引量:7
- 2009年
- 选用犬瘟热病毒(CDV)和犬细小病毒(CPV)标准株,体外分别以Vero和F81为受体细胞,以不同剂量的松子壳多糖和不同顺序作用于病毒复制周期的各个阶段。以病毒半数感染量(TCID50),细胞病变(CPE),MTT法作为评价松子壳多糖体外抗病毒活性的指标。结果表明,在预防给药、治疗给药、混合给药方法中,不同浓度的松子壳多糖均可不同程度地抑制病毒的致细胞病变作用,松子壳多糖最低质量浓度31.2 mg/L仍具有抗2种病毒作用,细胞存活率均在49.08%以上,且预防给药法和混合给药法的抗病毒效果要优于治疗法。
- 母连志张永亮张明军李莉张英刘松财
- 关键词:犬细小病毒犬瘟热病毒抗病毒作用