张恩
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞抗辐射作用的影响被引量：2
- 2006年
- 目的研究原癌基因c ski对大鼠皮肤成纤维细胞抗辐射作用的影响,并探讨其可能的机理。方法采用Annexin V FITC PI标记的方法,通过流式细胞仪检测2～8Gy的软X线照射对培养的大鼠皮肤成纤维细胞凋亡的影响;观察转染c ski基因后细胞凋亡的变化;并采用Westernblot检测c ski对凋亡蛋白Bax、Bcl2表达的影响。结果软X线照射以剂量依赖的方式增加细胞凋亡,并且随着时间的延长进一步增加,大约在36h时达到峰值。转染c ski基因使4Gy照射24h后的成纤维细胞凋亡率显著下降。转染c ski基因48h后,Bax的表达和对照组差异无统计学意义,而Bcl2的表达显著增加。结论c ski可降低成纤维细胞的辐射敏感性,促进Bcl-2的表达可能是其机理之一。
- 刘霞李平张恩刘苹周萍周元国
- 关键词：成纤维细胞凋亡抗辐射作用
- C-ski和Smad3在大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤中的变化及意义被引量：3
- 2007年
- 目的研究C-ski和Smad3在大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤中的变化和意义。方法软X线照射诱导大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤,Western blot和RT-PCR观察C-ski、Smad3蛋白和mRNA水平的变化,EMSA检测Smad3转录活性的变化。结果辐射后2h,C-ski、Smad3蛋白和mRNA水平、Smad3转录活性无显著变化,4h开始,C-ski表达逐渐下降,Smad3表达和转录活性逐渐升高,在8h分别达到峰谷和峰顶。结论C-ski和Smad3参与大鼠皮肤成纤维细胞辐射性损伤的病理过程,辐射后C-ski下降,Smad3升高,并导致Smad3转录活性增强,细胞增殖受抑,凋亡增加。
- 刘霞李平张恩刘苹周元国
- 关键词：SMAD3成纤维细胞
- 利用pcDNA 3.0裸质粒探讨创伤愈合动物模型中转入基因的分布规律
- 2006年
- 目的 通过在Wistar大鼠皮肤伤口局部应用含半乳糖苷酶（LacZ）报告基因的裸peDNA3．0重组质粒，建立创伤愈合转基因治疗动物模型并评价其应用价值。方法 通过建立大鼠全层皮肤切割伤模型，采用自身对照，在治疗侧伤口周围局部注射重组转染裸pcDNA3．0-LacZ质粒，通过B-gal原位染色检测注射3、30、100μg剂量后1、3、6、15天及愈合时的伤口组织标本中报告基因LacZ的表达，确定目标基因表达效率。结果 报告基因LacZ主要表达于皮下成纤维细胞中，100μg剂量有较高表达，表达效率为10．3％，表达时间主要在注射后3-6天，15天时仍可检测到少量表达细胞，愈合时及对照侧各个时相点均未检测到表达。结论 重组的裸pcDNA3．0-LacZ质粒能成功转染伤口的成纤维细胞等修复细胞，表达效率及时间适用于动物创伤愈合的转基因治疗。
- 李平熊仁平刘苹刘霞张恩周元国
- 关键词：创伤愈合基因治疗裸质粒半乳糖苷酶
- c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞增殖的调节作用及机制被引量：7
- 2005年
- c-ski是成纤维细胞增殖的复杂调节子,它对中胚层来源的皮肤成纤维细胞增殖的作用还不清楚。在观察正常成纤维细胞周期c-ski表达的时相特点的基础上,通过体外转染c-ski,观察它对细胞增殖活性、细胞周期进展以及周期蛋白表达的影响。结果显示:c-skimRNA表达在加入血清后开始升高,在细胞周期G1期的高峰期达到峰值,S期显著下降,在G2/M期维持在较低的水平;转染的c-ski可以以剂量依赖的方式增加细胞的增殖活性,并且可以逆转Smad3对细胞增殖活性的抑制作用;C-ski使成纤维细胞提前达到G0/G1期的最低点,进入S期;同时细胞G1期周期蛋白cyclinD的表达增加。这些结果表明:c-ski是皮肤成纤维细胞G1期的调节子,通过加快G1期进展促进增殖,抑制Smad3活性,促进cyclinD的表达可能与这一作用的分子机制有关。
- 刘霞李平张恩刘萍周萍周元国
- 关键词：皮肤成纤维细胞细胞增殖细胞周期
- 创伤和放创复合伤愈合过程中c-ski的变化及其与创面愈合结局的关系被引量：1
- 2005年
- 目的观察c-ski在创伤和放创复合伤愈合过程中的表达规律,探讨其与创伤愈合和辐射伤组织修复延迟的关系。方法在大鼠创伤和放创复合伤后3,6,9,15d和愈合时,免疫组化和原位杂交检测肉芽组织c-ski表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入检测组织增殖,TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡率。结果创伤后3dc-ski开始表达,9d达到峰值,愈合后显著下降;多种细胞均有高峰度表达,并以成纤维细胞最为显著;辐射侧伤后3～9d的表达显著低于创伤对照侧。辐射导致细胞增殖下降(3～9d)和高峰滞后(15d),与c-ski变化类似。辐射后3～9d的凋亡率显著高于对照侧。结论c-ski可能是一新的组织修复相关基因,它可能通过调节增殖和凋亡的平衡促进创伤愈合。辐射导致c-ski表达下降可能是其延缓愈合的原因之一。
- 刘霞李平张恩刘苹陈星云周元国
- 关键词：放创复合伤创面愈合愈合过程5-溴脱氧尿嘧啶核苷原位杂交检测
- 硬X线局部照射对猪皮肤创伤愈合影响的研究被引量：2
- 2005年
- 目的:研究硬X射线局部照射对创伤愈合的影响规律。方法:采用大体观察、组织病理学、免疫组化、TUNEL和图像分析等方法,动态观察不同剂量硬X线局部照射后大鼠伤口愈合的过程。结果:观察发现皮肤放创复合伤的愈合时间与照射剂量存在着密切关系,相关性非常显著,r=0.985。照射后伤口组织胶原的合成降低、排列紊乱,肉芽组织的结构不规则。放创复合伤皮肤伤口成纤维细胞凋亡较单纯创伤组显著增加,伤口局部增殖细胞较单纯创伤组显著降低。结论:局部硬X线照射后,猪皮肤放创复合伤伤口愈合延迟,在20～50Gy之间时,延迟时间随照射剂量的增大而延长。
- 张恩周元国刘霞李平
- 关键词：硬X射线局部照射创伤愈合
- c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响被引量：6
- 2008年
- 目的研究原癌基因c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞活力、肌成纤维细胞分化、型胶原分泌等生物学行为的影响。方法免疫组化检测皮肤成纤维细胞内c-Ski蛋白的表达,并在转染c-ski基因后,利用MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活力、免疫组化和RT-PCR检测型胶原分泌、α-SMA细胞免疫组化检测肌成纤维细胞分化的改变。结果大鼠皮肤成纤维细胞内有c-Ski蛋白的表达,且主要表达在细胞核内,c-ski可以以剂量依赖的方式增加皮肤成纤维细胞的增殖活力,并可降低型胶原蛋白和mRNA的水平,但不改变皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程。结论c-ski促进细胞增殖但降低胶原分泌的作用可能对促进创伤愈合、降低瘢痕形成有着重要的意义。
- 刘霞李平张恩刘苹周元国
- 关键词：成纤维细胞胶原
