张奕 作品数:43 被引量:231 H指数:9 供职机构: 同济大学附属同济医院 更多>> 发文基金: 上海市自然科学基金 卫生部科技专项基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
不同胃癌细胞系尿激酶型纤溶酶原激活物表达与腹膜转移潜能相关的体外研究 被引量:4 2005年 目的比较不同胃癌细胞系尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)表达及其活性与腹膜转移潜能的关系。方法采用ELISA和Western印迹方法,比较不同胃癌细胞系uPA表达的差异,并测定其活性。在24孔培养板或Boyden小室中与生长良好的间皮细胞共同培养不同时间,在显微镜下直接计数与间皮细胞黏附的胃癌细胞,而用MTT法评估胃癌细胞在间皮细胞间的迁移和侵袭情况。结果4株胃癌细胞(AGS、SGC7901、MKN45和MKN28)的uPA表达以SGC7901最高,uPA活性以MKN45最高,AGS两者皆最低。MKN45的黏附能力明显强于MKN28(P<0.05)、SGC7901(P<0.05)和AGS(P<0.01),但其迁移和侵袭能力与SGC7901和MKN28相比差异无统计学意义;而AGS在3方面均明显弱于其他3株细胞。结论4株胃癌细胞uPA表达量及其活性差异较大,并且与其腹膜转移潜能呈正相关。 丁友成 朱正纲 刘炳亚 纪玉宝 陈雪华 张奕 于颖彦 林言箴关键词:尿激酶型纤溶酶原激活物 胃癌细胞系 体外研究 腹膜 BOYDEN小室 MKN28 Vascular Endothelial Growth Factor C Expression in Gastric Carcinoma and Its Relationship with Lymph Node Metastasis 被引量:1 2004年 Objective: To study the expression of vascular endothelial growth factor C (VEGF-C) in gastric carcinoma and its relationship with lymph node metastasis. Methods: The expression of VEGF-C mRNA in 5 gastric carcinoma cell lines was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Simultaneously, the expression of VEGF-C protein in gastric carcinoma tissues, which were obtained from 63 patients who underwent radical gastrectomy, was detected by immunohistochemistry. Results: Three of the 5 gastric carcinoma cell lines, MKN-45, SGC-7901 and AGS, expressed VEGF-C mRNA. VEGF-C protein was expressed in 52.4% (33/63) of patients. VEGF-C protein expression was more frequently found in tumors with lymph node metastasis than in those without (P<0.01). VEGF-C protein expression was also closely related to lymphatic invasion (P<0.01) and TNM stage (P<0.01). However, there was no significant correlation between VEGF-C expression and the age, gender, tumor size, tumor location, Lauren classification, depth of invasion, and vascular invasion. Conclusion: The expression of VEGF-C is closely related to lymph node metastasis of gastric carcinoma, and lymphangiogenesis might be a new target for treatment of gastric carcinoma. 严超 张俊 计骏 于颖彦 张奕 纪玉宝 刘炳亚 朱正纲 尹浩然 林言箴关键词:LYMPHANGIOGENESIS 胰岛素样生长因子-1对大鼠肝纤维化形成的影响 被引量:2 2005年 目的:探讨胰岛素样生长因子-1对大鼠肝纤维化形成的影响.方法:50只SD大鼠随机编入4组,正常组和橄榄油组各10只,模型组15只,IGF-1干预组15只.40%CCL4橄榄油溶液制备大鼠肝纤维化模型,4wk后,以IGF-12ug/kg干预,共2wk.观察大鼠存活率、体重变化及纤维化形成率;光镜下观察大鼠肝组织病理及胶原纤维变化;采用Western-blot法检测肝组织中α-肌动蛋白(α-SMA)含量.结果:IGF-1干预组大鼠存活率高于模型组,体重(301.5±32.4g)明显高于模型组(252.1±24.1g,P<0.05),肝纤维化形成率较模型组低,光镜下肝组织纤维化程度明显改善,胶原含量明显下降.IGF-1干预组中肝组织α-SMA含量明显低于模型组.结论:IGF-1具有抗大鼠肝纤维化作用,这可能与其改善肝功能、抑制HSC活化等有关. 万荣 吴云林 乔敏敏 章永平 付爱芬 辛美珍 孔雷 张奕 刘炳亚关键词:胰岛素样生长因子-1 肝纤维化 Α-肌动蛋白 胶原纤维 以树突状细胞为基础的肿瘤疫苗研究进展 被引量:7 2000年 树突状细胞 (DC)作为一种目前已知的功能最强的抗原提呈细胞 ,可以在体内外向T细胞提呈抗原并诱发CTL反应。 90年代开始 ,DC在肿瘤免疫治疗中的作用逐渐受到重视。近年来 ,在DC的基础和临床应用研究方面都取得了一些突破性的进展。应用肿瘤的各种抗原 ,诸如肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原及完全性细胞抗原 ,以各种手段修饰DC制成瘤苗 ,以此免疫荷瘤宿主 ,可产生抗肿瘤免疫 ,并为肿瘤病人的治疗及康复带来了新的希望。 张奕 刘炳亚关键词:树突状细胞 肿瘤 免疫治疗 肿瘤疫苗 胃癌/乳腺癌先证者家族性癌症综合征家系CDH1突变分析及病理学特征 被引量:8 2004年 目的 探讨CDH1基因种系突变与中国人家族性胃癌 /乳腺癌综合征的关系。方法 收集弥漫型胃癌 /乳腺癌先证者及其一、二级亲属外周血 ,应用CDH1基因第 1~ 1 6外显子引物进行PCR扩增 ,对扩增产物行单链构象多态性 (SSCP)分析。对电泳条带异常外显子的PCR扩增产物纯化后进行基因序列测定。对先证者胃癌 /乳腺癌组织应用免疫组化方法进行CDH1编码蛋白E cadherin表达检测。结果 CDH1基因第 1 3外显子在mRNA水平 2 2 0 0位点 (序号 :NM 0 0 4 36 0 )存在核苷酸C→T置换 ,导致编码序列GCC→GCT改变 (Ala1 5 4Ala)。先证者胃癌呈典型的弥漫型印戒细胞癌 ,左乳腺肿瘤为浸润性导管癌 ,两种肿瘤细胞均不同程度保留E cadherin/β catenin蛋白表达。结论 以弥漫型胃癌 /乳腺癌为先证者的中国人多发性癌症综合征家系发病年龄较轻 ,部分家系成员第 1 3外显子存在的单核苷酸置换可能增加了对某些肿瘤的易感性。该家系中 朱正纲 于颖彦 张奕 计骏 张俊 刘炳亚 陈雪华 林言箴关键词:先证者 乳腺癌 家系 CDH 胃癌 胆囊结石病患者胆道系统的螺杆菌DNA 被引量:9 2003年 目的 近来 ,螺杆菌属细菌与胆道疾病的关系日益受到重视 ,并在胆固醇结石中检测到细菌DNA。为进一步研究胆囊结石病与螺杆菌感染的关系 ,对胆囊结石患者的胆石、胆汁 ,胆囊黏膜行螺杆菌 16SrRNA基因检测。方法 研究对象为 2 9例胆囊结石病患者。胆汁和胆囊黏膜标本接种于需氧、厌氧和非选择性微需氧培养基培养。利用两对特异性的螺杆菌 16SrRNA基因引物对患者的胆石、胆汁、胆囊黏膜标本行nested PCR扩增 ,利用特异的螺杆菌DNA探针 ,对PCR产物行Southern杂交检测 ,并对 1例胆囊黏膜PCR产物直接测序 ,将测序结果与基因库中的标准螺杆菌株序列作比较 ,采用Neighbor joining法绘制种系发生树。氧化酶法测定胆石胆固醇含量。 结果 胆汁和胆囊黏膜标本经需氧、厌氧、微需氧培养 ,未发现螺杆菌生长。 2 9例胆石标本nested PCR分析 ,2例阳性 (6 .9% ) ,2 3例胆汁中 9例阳性 (39.1% ) ,2 9例胆囊黏膜中 2 2例阳性 (75 .9% )。PCR阳性的标本Southern杂交均为阳性。 1例胆囊黏膜标本的PCR扩增产物纯化后直接测序 ,证实为螺杆菌属细菌。 2 9例胆囊结石的平均胆固醇含量为 (6 2 .2± 3.8) % ,PCR结果阳性的 2例胆石为胆固醇为主的混合性结石。结论 螺杆菌DNA存在于胆囊结石、胆汁及胆囊黏膜中 。 田志杰 韩天权 胡厚佳 姜志宏 张奕 蒋兆彦 洪秀华 张圣道关键词:胆囊结石 螺杆菌 DNA检测 小鼠I-A^kII类分子限制性MAGE-3T表位筛选 被引量:3 2005年 为了筛选小鼠MAGE-3抗原来源的MHCII类分子限制性多肽表位。用计算机模拟设计,从MAGE-3中选取得分最高的5个候选表位。根据诱导T淋巴细胞增殖能力、对肿瘤细胞的特异性识别及释放细胞因子能力评价多肽的免疫原性及免疫反应性。结果DC负载MAGE-322-36能够强效诱导T淋巴细胞增殖,DC负载MAGE-322-36诱导的T细胞以MHCII类分子限制性方式、特异性识别表达MAGE-3抗原的肿瘤细胞。DC负载MAGE-322-36诱导的T细胞群主要为CD4+Th1细胞,同时天然免疫系统中的NK、NKT、γ/δT细胞也得到活化。从小鼠MAGE-3抗原中筛选出MHCII类分子限制性多肽表位MAGE-322-36。 李强 张轶 张奕 陈雪华 李建芳 顾琴龙 朱正纲 刘炳亚关键词:MAGE-3 TH表位 联合胞嘧啶脱胺酶与尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因治疗小鼠胃癌 被引量:2 2003年 目的探讨联合应用尿嘧啶磷酸核糖转移酶(UPRT)基因对胞嘧啶脱胺酶(CD)/氟胞嘧啶(5-FC)前药转换酶系统抗瘤作用的增强效应。方法将携带UPRT基因和CD基因的逆转录病毒载体通过PA317细胞包装成完整的病毒颗粒并浓缩和纯化。建立615小鼠胃癌皮下移植瘤模型,瘤内反复多次注射携带UPRT和CD基因的逆转录病毒,同时腹腔内给予5-FC,观察抑瘤效果。结果逆转录病毒介导CD基因瘤内原位转导,同时联合应用5-FC进行治疗,结果发现,在肿瘤接种后第12天,对照组肿瘤体积为(2.367±0.371)cm3,而CD/5-FC治疗组肿瘤体积大小为(0.704±0.358)cm3,肿瘤生长明显受抑(P<0.0005)。联合转导UPRT基因后,于肿瘤接种后第16天,肿瘤体积为(0.731±0.255)cm3,而单独应用CD基因治疗组肿瘤体积为(1.455±0.370)cm3,从而证实联合转导UPRT基因可进一步增强CD/5-FC自杀基因系统的抑瘤作用(P<0.001)。结论联合转导UPRT基因,可显著增强CD/5-FC自杀基因系统的抗瘤效应。 姬舒荣 张奕 顾琴龙 刘炳亚 朱正纲 林言箴关键词:胃肿瘤 尿嘧啶磷酸核糖转移酶 基因治疗 胆囊结石病患者胆道系统细菌DNA的研究 被引量:3 2004年 田志杰 韩天权 姜志宏 张奕 蒋兆彦 胡厚佳 洪秀华 张圣道关键词:胆囊结石 特异性 敏感性 人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建 被引量:1 2004年 目的 构建人IL-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测。方法从质粒pcDNA3IL-10的CMV启动子下游完整切下IL-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体。PacI酶线性化IL-10腺病毒DNA后阳离子质脂体转染293A细胞,获得人IL-10的复制缺陷型重组腺病毒。体外感染人胰腺癌细胞株Bxpc-3和大鼠胰腺细胞株AR-42J;Western blot检测人IL-10的表达。结果 成功地构建人IL-10重组腺病毒,病毒滴度达2×109PFU/mL。体外感染的细胞株均检测到IL-10的表达。结论 构建复制缺陷型重组腺病毒能够介导IL-10的基因表达,为细胞因子的抗炎冶疗奠定实验基础。 陈紫千 汤耀卿 张奕 张轶 张圣道 刘新垣 邹卫国关键词:缺陷型 体外感染 DNA 阳性克隆