张天一
- 作品数:113 被引量:443H指数:11
- 供职机构:南通大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金南通市科技局社会发展科技计划项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学一般工业技术更多>>
- 三氧化二砷诱导黑色素瘤B16细胞凋亡机制被引量:5
- 2006年
- 目的观察三氧化二砷(As2O3)对黑色素瘤B16细胞(B16细胞)的作用,探讨As2O3抗肿瘤的机制。方法Hoechst33258染色观察细胞凋亡特征;应用激光扫描共聚焦显微术(LSCM),结合特异性荧光探针Fluo-3/AM、H2DCF-DA和DAF-FM-DA,观察As2O3引起瘤细胞内钙离子(Ca2+)、活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)的变化。结果50μmol/LAs2O3作用细胞12h后,Hoechst33258核染色可见典型凋亡细胞;细胞内Ca2+、ROS和NO含量明显高于对照组(P<0·01)。结论As2O3可诱导B16细胞发生凋亡,As2O3诱导凋亡可能与细胞内Ca2+、ROS和NO的增加有关。
- 王华张天一杨扬张春辉倪启超
- 关键词:三氧化二砷黑色素瘤B16细胞钙离子活性氧
- 异硫氰酸荧光素标记动态观察天花粉蛋白对黑色素瘤B16细胞的损伤被引量:4
- 2007年
- 目的:应用异硫氰酸荧光素标记天花粉蛋白,在激光共聚焦显微镜下直接观察天花粉蛋白进入黑色素瘤B16细胞的动态过程并分析其对黑色瘤B16细胞的损伤作用。方法:实验于2003-08/2004-08在南通大学神经再生重点实验室完成。将常规传代培养的黑色素瘤B16细胞用胰酶消化,以5×109个/L的浓度种植于24孔培养板。将天花粉蛋白、异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白、异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白分别加入培养细胞中,终浓度为50mg/L,同时加入等量生理盐水作为正常对照组,每组再分别设3,6,12h不同孵育时间组。异硫氰酸荧光素标记天花粉蛋白后,利用激光共聚焦显微镜观察异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白进入细胞的过程及其荧光强度,CCK-8细胞毒性实验评估各组细胞存活率、并用单细胞凝胶电泳及hoechst33258染核观察天花粉蛋白对黑色素瘤B16细胞致DNA损伤作用。结果:①终浓度50mg/L的异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白孵育3h时已经进入黑色素瘤细胞,6h时进入细胞量达到最高,12h时已轻度下降,各时间点比较差异有统计学意义(P<0.01)。异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白组与异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白组荧光强度差异有显著性(P<0.01)。②终浓度50mg/L异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白、天花粉蛋白孵育黑色素瘤细胞3,6h后利用单细胞电泳和Hoechst33258染色未观察到核形态的变化;但孵育6h后CCK-8细胞毒性实验显示活细胞数量明显下降;孵育12h后出现DNA损伤的特征性彗星尾现象,并观察到明显的核浓缩和边集现象,出现特征性凋亡小体。结论:孵育6h时天花粉蛋白进入细胞量最多,但并没有明显的细胞DNA损伤的作用,而孵育12h时产生明显的细胞毒作用和凋亡的发生。
- 周欣阳张天一顾君一
- 关键词:天花粉蛋白黑色素瘤B16细胞DNA损伤
- 自体活化脾细胞输注后T细胞亚群及PBMC细胞活性的临床观察
- 2006年
- 目的:细胞因子诱导的杀伤细胞具有可以快速增殖、高效和抗瘤谱广的特点。但是有关该细胞在肿瘤患者临床应用的报道甚少。本文旨在探讨自体脾细胞经黄芪皂甙(Astragalus Sapomin)和小剂量rIL-2活化后过继免疫治疗时肝癌伴有脾功能亢进的患者免疫功能的影响。方法:16例患者均接受肿瘤切除、脾脏切除、皮下肝动脉泵埋入术和自体活化脾细胞过继免疫治疗。患者于手术前、后及过继免疫治疗后采集外周血Ficoll-Hypaque gradient分离单个核细胞,流式细胞仪检测CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞水平;MTT法检测PBMC细胞活性。结果:患者手术前、后CD4+、CD4+/CD8 +和NK细胞水平明显低于过继免疫治疗后(P<0.01),而CD8+细胞水平明显高于过继免疫治疗后(P<0.01);自体活化脾细胞过继免疫治疗后PBMC细胞活性明显高于手术前、后(P<0.05)。结论:自体活化脾细胞过继免疫治疗可有效地提高患者的细胞免疫功能,且无副作用,对肝癌伴脾亢患者是一安全而有效的治疗方法。
- 王华张春辉倪启超张天一林琳顾君一
- 关键词:过继免疫黄芪皂甙T细胞亚群
- 人参皂苷对巨噬细胞超微结构及MHC-II表达的影响被引量:2
- 2008年
- 目的:探讨人参皂苷(GS)对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)活性的影响机制。方法:原代PMΦ经体外培养,采用MTT比色法检测各组PMΦ的杀瘤活性,透射电子显微镜(TEM)观察PMΦ的形态学变化,应用激光扫描共聚焦显微术(LSCM)检测PMΦ表面MHC-II表达的变化。结果:小鼠腹腔PMP经GS作用后,细胞的形态发生活化性改变;PMΦ表面MHC-II的表达增加,并增强对H22细胞杀伤活性。结论:GS在体外能激活小鼠PMΦ,其杀瘤活性增强。
- 管蓓蓓曹丽朱昌来林琳张天一
- 关键词:人参皂苷巨噬细胞超微结构细胞毒作用
- ABCG2与VEGF、VEGFR和CD34在胶质瘤组织芯片中的共表达被引量:1
- 2008年
- 目的探讨ABCG2在胶质瘤血管形成过程中与VEGF、VEGFR和CD34的关系和共表达。方法构建布有90例各级别人脑胶质瘤的组织芯片,用EnVision法的免疫组织化学染色,分别分析ABCG2、VEGF、VEGFR和CD34在胶质瘤中的表达率、微血管密度(MVD)及其相关性,并以免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测CD34和ABCG2共表达的细胞。结果ABCG2、VEGF、VEGFR和CD34的表达率均随胶质瘤恶性程度增加而增高;并且ABCG2表达水平与肿瘤MVD显著相关,y=0.540,P〈0.001。ABCG2阳性表达的Ⅲ、Ⅳ级肿瘤标本MVD比I、Ⅱ级高。VEGF、VEGFR和ABCG2均为阳性表达的肿瘤标本MVD平均值显著高于ABCG2阴性表达者,P〈0.001。在CD34显示的肿瘤血管腔壁上同时见到了ABCG2的表达。结论胶质瘤的恶性进展除了与公认的肿瘤细胞和肿瘤血管内皮细胞共表达的VEGF和VEGFR高表达相关,还与ABCG2高表达相关。在同一根血管上同时见到了ABCG2(肿瘤干细胞标志蛋白)和CD34(内皮细胞标志蛋白)的共表达,表明肿瘤干细胞除了生成肿瘤细胞,还有可能生成肿瘤血管内皮细胞。
- 肖宏黄强张天一董军翟德忠王爱东兰青
- 关键词:神经胶质瘤组织芯片
- 口腔鳞癌脉管侵袭的研究
- 1998年
- 对44例口腔鳞癌组织切片用抗血型抗原ABH抗体作免疫组化染色,以研究癌组织对脉管的侵袭。结果表明,该方法为脉管内皮细胞提供了清晰的染色,显示脉管侵袭的阳性率为40.9%,显著高于以H·E染色显示的阳性率(20.5%)。口腔鳞癌组织侵袭脉管与其分化程度、生长方式及淋巴结转移有密切关系。
- 葛培岩张天一骆明耀包国跃
- 关键词:口腔鳞癌口腔肿瘤免疫组织化学
- HSPgp96与rIL-2治疗小鼠H22肝癌移植瘤的实验研究被引量:2
- 2004年
- 目的 :研究热休克蛋白 gp96 (Heat- Shock Protein gp96 ,HSPgp96 ) -肽复合物瘤苗与重组人白介素 -2 (Recombinant Human Interleukin- 2 ,r IL- 2 )对小鼠 H2 2肝癌移植瘤的治疗效果。方法 :从 H2 2肝癌细胞中提取和纯化 HSPgp96。建立小鼠 H2 2肝癌移植瘤模型 ,应用 HSPgp96与 r IL - 2治疗并比较疗效 ,观察指标 :瘤重 ,光镜、电镜下观察组织结构。结果 :经鉴定获得纯化的 HSPgp96。HSPgp96 5 μg与 r IL- 2 2 5 ku治疗小鼠 H2 2肝癌有效。结论 :该实验方法提纯的 HSPgp96与重组人 IL - 2都能有效抑制小鼠 H2
- 施海燕周欣阳张天一林琳吴坚顾君一
- 关键词:热休克蛋白GP96H22肝癌小鼠
- 黄芪皂甙抗瘤作用的实验研究
- <正> 目的:研究黄芪皂甙对小鼠脾细胞抗瘤活性的影响。方法:从蒙古黄芪中提取黄芪皂甙(AS),①在小鼠脾细胞培养过程中,分别或同时添加不同剂量的AS,PHA和ConA。使用MTT法测定小鼠脾细胞活性及其抗瘤活性。②将不同...
- 顾君一张天一尤其俋张春辉王华倪启超林琳
- 文献传递
- 人参皂苷Rh_2对肝癌SMMC-7721细胞增殖和细胞骨架的影响被引量:18
- 2011年
- 目的:探讨人参皂苷Rh2(Rh2)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞生长和细胞骨架的影响。方法:应用MTT法及流式细胞仪检测不同浓度Rh2对SMMC-7721细胞增殖的抑制及诱导凋亡作用;激光共聚焦显微镜观察细胞骨架肌动蛋白F-actin的分布状态;整装细胞电镜术观察细胞核基质-中间纤维系统的变化。结果:MTT法和流式细胞仪分析结果分别显示,40 mg/L Rh2作用SMMC-7721细胞4 d时的抑制率及细胞凋亡率明显高于对照组及10、20 mg/L组,显著差异(P<0.05);激光共聚焦显微镜下,SMMC-7721细胞经Rh2处理4 d,F-actin分布均匀,细丝排列整齐,数量增多;而对照组细胞F-actin细丝在细胞内排列紊乱,多呈斑点状分布。整装电镜结果显示,与对照组相比,实验组细胞的中间纤维丰富,均匀地满布细胞中,呈网架状连接的结构。结论:Rh2能有效抑制SMMC-7721细胞的增殖,增加SMMC-7721细胞的凋亡,并且诱导SMMC-7721细胞骨架发生变化。
- 王华周滨郭星朱隽雅程春朱昌来张天一
- 关键词:诱导分化人参皂苷RH2细胞骨架
- 黄芪皂甙对培养心肌细胞损伤的影响被引量:45
- 1998年
- 从蒙古黄芪的根中提取黄芪皂甙(AS),研究AS对培养的新生大鼠心肌细胞损伤的影响。在培养基中加入黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(X-XOD)和丝裂霉素C(MMC),损伤心肌细胞以及用缺氧-复氧的方法造成心肌细胞损伤。实验组加入不同剂量的AS(1~50μg/ml),对照组用培养基代替AS两组加入XOD和MMC以及缺氧3h复氧30min后,对照组心肌细胞内LDH的漏出明显增加,而线粒体活性值明显受抑。AS(1~25μg/ml)可以保护心肌细胞,减轻X-XOD,MMC及缺氧-复氧所致的损伤,使LDH的释放量显著低于对照组,而线粒活性值有较大的恢复(P<0.05)。在1~25μg/ml剂量范围内AS的抗损伤作用呈剂量相关性增加。但使用50μg/ml的AS没有能观察到这种抗损伤作用。结论:AS(1~25μg/ml)对培养的新生大鼠心肌细胞具有抗自由基损伤及MMC损伤的作用。
- 李靖朱健华黄崇勤顾君一张天一林琳
- 关键词:黄芪皂甙心肌细胞自由基丝裂霉素