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人FcγRⅡ线性配体结合表位: 本发明涉及人FcγRII线性配体结合表位，该表位的氨基酸序列为Cys－Thr－Gly－Asn－Ile－Gly－Tyr－Thr－Leu－Phe－Ser－Ser－Lys－Pro－Val－Thr－Ile－Thr－Val，本发明...; 张改平席俊郭军庆王选年赵东杨艳艳张利娜苗现伟乔松林张红郅玉宝邓瑞广; 文献传递

人FcγRⅡ线性配体结合表位: 本发明涉及人FcγRII线性配体结合表位，该表位的氨基酸序列为Cys-Thr-Gly-Asn-Ile-Gly-Tyr-Thr-Leu-Phe-Ser-Ser-Lys-Pro-Val-Thr-Ile-Thr-Val，本发明...; 张改平席俊郭军庆王选年赵东杨艳艳张利娜苗现伟乔松林张红郅玉宝邓瑞广; 文献传递

人FcγRⅡ真核表达质粒的构建及稳定转染细胞系的建立: 2008年; 目的:建立稳定表达人FcγRⅡ(human Fc gamma receptor Ⅱ,huFcγRⅡ)的真核细胞系,为后续研究奠定基础。方法:采用RT-PCR方法从人外周血白细胞合成FcγRⅡcDNA,构建huFcγRⅡ表达质粒pcDNA3-huFcγRⅡ,经酶切和PCR鉴定后,将pcDNA3-huFcγRⅡ质粒通过脂质体转染法转染COS7细胞,并经G418筛选获得稳定表达huFcγRⅡ的细胞克隆。采用免疫荧光法和玫瑰花环试验检测huFcγRⅡ的表达。结果:构建的pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒经酶切鉴定与预期一致,稳定转入COS7细胞后,经免疫荧光染色,约90%的转染细胞可见荧光,而未转染的COS7对照细胞未见荧光。结论:成功构建pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒,建立了稳定表达huFcγRⅡ的细胞系,为进一步研究奠定了基础。; 席俊张改平张利娜张红乔松林苗现伟何礼洋张乃生; 关键词：COS7细胞免疫荧光检测

人FcγRⅠ受体胞外区基因的克隆、原核表达及纯化被引量：1: 2010年; 目的:探讨人FcγRⅠ(huFcγRⅠ)胞外区蛋白的原核表达纯化及其在体外与IgG的结合活性。方法:PCR方法从人的外周血白细胞中扩增出huFcγRⅠORF区全长基因并与T载体链接,从克隆载体huFcγRⅠ-T中扩增huFcγRⅠ胞外区基因,并将其装入原核表达载体pGEX-6p-1。构建好的载体转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导重组蛋白表达,并利用SDS-PAGE和Western blot对表达的蛋白进行鉴定。结果:扩增到了huFcγRⅠ的胞外区基因,所构建的pGEXhuFcγRⅠ重组质粒经PCR和酶切鉴定与预期一致。IPTG诱导下目的蛋白的表达率约为30%。SDS-PAGE结果显示表达的目的相对分子质量(Mr)56 700与理论预期值一致。West-ern blot结果显示原核表达的huFcγRⅠ胞外区蛋白与人IgG特异亲和。结论:FcγRⅠ(huFcγRⅠ)胞外区蛋白在原核表达系统中得到有效的表达,复性蛋白在体外与人的IgG特异结合。; 苗现伟刘玺张改平席俊张利娜刘运超游雷鸣赵玉军; 关键词：原核表达

一种采用分生孢子接种鉴定花生网斑病抗病性的方法: 本发明公开了一种采用分生孢子接种鉴定花生网斑病抗病性的方法，属于作物抗病性鉴定技术领域。本发明将网斑病病原菌的分生孢子在16小时长光照条件下培养产生大量分生孢子器，破碎分生孢子器制成分生孢子悬浮液，喷雾接种花生幼苗，利用...; 张新友郑峥齐飞艳孙子淇张利娜房元瑾张忠信刘华徐静高伟秦利石磊苗利娟董文召黄冰艳; 文献传递

小鼠FcγRⅢ线性配体结合表位: 本发明涉及小鼠mFcγRIII线性配体结合表位，该表位的氨基酸序列为Cys Ser Phe PheHis Asn Glu Lys Ser Val Arg Tyr His。本发明以化学合成多肽分析鉴定小鼠FcγRIII的线...; 张改平张利娜席俊郭军庆苗现伟赵东乔松林杨艳艳郅玉宝刘运超王方雨王丽邓瑞广; 文献传递

原核表达、稀释复性的人FcγRⅡa恢复IgG的结合功能: 2008年; 目的探讨原核表达稀释复性的可溶性人FcγRⅡa（shuFcγRⅡa）的胞外区蛋白在体外与配体的结合活性。方法应用PCR技术从重组质粒pc3huRⅡ中扩增huFcγRⅡa的胞外区基因，将其克隆于原核表达载体pET-28a中。所构建的重组质粒经PCR和酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达，制备融合蛋白包涵体。并采用多次洗涤法分离和纯化包涵体，用稀释法对纯化后的目的蛋白进行复性，ELISA和流式细胞术测定重组shuRⅡ在体外与配体的结合活性。结果扩增到了huFcγRⅡa的胞外区基因，所构建的pETshuRⅡ重组质粒经PCR和酶切鉴定与设计序列一致。转化B121（DE3）后，IPTG诱导目的蛋白表达率约为30％。SDS-PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量（Mr）约为24．8×10^3，与理论预期值一致。破菌后电泳证实目的蛋白主要以包涵体形式表达，经多次洗涤后蛋白纯度大于90％。ELISA法测得重组shuRⅡ与人IgG在体外有良好的结合活性，流式细胞术测得重组shuRⅡ对配体与受体结合有抑制作用。结论本复性方法可得到和天然蛋白类似生物学活性的目的蛋白。; 席俊张改平张利娜苗现伟乔松林张红何礼洋游雷鸣郑彦君; 关键词：原核表达复性

moFcγRⅢ、γ链真核表达载体的构建及其共转染稳定细胞系的建立: 2011年; 将moFcγRⅢ、γ链编码区cDNA分别亚克隆到真核表达载体pcDNA3的巨细胞病毒启动子下游,构建了重组表达质粒pc3moRⅢ、pc3moγ;用PvuⅠ线性化重组质粒,以线性化重组质粒共转染COS-7细胞,用玫瑰花环试验检测moFcγRⅢ在转染细胞表面的表达,通过G418抗性筛选和单细胞克隆,在转染细胞表面稳定表达了moFcγRⅢ受体分子。稳定转染细胞系的建立和moFcγRⅢ受体分子基因的表达,为进一步研究moFcγRⅢ的功能提供了基础。; 席俊唐志鹏张利娜宋爱宾王少兵张改平; 关键词：COS-7细胞真核表达共转染

小鼠IgGFc受体(moFcγRⅡ)稳定表达细胞系的建立及鉴定: 2010年; 为建立小鼠IgGFc受体(moFcγRⅡ)稳定表达的哺乳动物细胞系,PCR克隆小鼠moFcγRⅡ片段,构建真核表达载体pcDNAmoFcγRⅡ。转染COS-7细胞后通过G418抗性筛选和连续克隆,获得了在COS-7细胞表面稳定表达FcγRⅡ的真核细胞系。玫瑰花环试验结果显示其阳性率在90%以上。; 苗现伟席俊刘玺张改平邓瑞广李清州张利娜游雷鸣刘运超; 关键词：细胞系稳定转染

牛IgG2Fc受体(boFcγ2R)胞外区基因原核表达载体的构建及其表达被引量：4: 2008年; 目的:构建牛Fcγ2R胞外区基因的原核表达载体,并在E.coliBL21(DE3)中表达。方法:提取健康成年牛的白细胞总RNA,经RT-PCR扩增牛Fcγ2R胞外区基因片段,并将其克隆到载体pGEM-TEasy,经限制性内切酶EcoRI和NotI双酶切鉴定及序列测定后,再将其亚克隆入原核表达载体pET28a中,构建重组质粒pET-2R,转化E.coliBL21(DE3)经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白。结果:获得682bp的编码牛Fcγ2R胞外区基因片段。以构建的重组质粒pET-2R转化E.coliBL21(DE3)后,经IPTG诱导,表达出相对分子质量(Mr)约为30000的重组蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在于E.coliBL21(DE3)的胞质中,Western blot检测表明该蛋白能和牛IgG2结合。结论:成功地构建了原核表达载体pET-2R,并表达出重组蛋白。为研究牛IgG和受体的相互作用机制及其介导的免疫反应打下了基础。; 席俊张改平何礼洋朱礼倩南楠张利娜邓瑞广李学伍; 关键词：克隆

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张利娜