张军哲
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的研究被引量：6
- 2007年
- 目的研究中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的作用。方法构建含完全甲基化GSTP1启动子区的重组质粒pGL3-GSTP1prom并转染MCF-7细胞,分别用不同剂量的CDP和5-aza-C作用细胞,检测表达的萤光素酶活性。观察GSTP1启动子转录活性的变化。结果GSTP1启动子区被完全甲基化后转录活性显著降低;CDP能够逆转高甲基化状态下GSTP1基因启动子区的低转录活性且呈剂量依赖关系。结论中药成分CDP能够逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子区的低转录活性。
- 张军哲王锦红覃扬傅强
- 关键词：CDPMCF-7萤光素酶报告基因
- 中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的研究
- 背景与目的DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶/(DNAmethylatransferase，DNMT/)作用下，以S-腺苷蛋氨酸/(s-adenosyl-L-methionin，SAM/)为甲基供体，将甲基基团转移到胞嘧...
- 张军哲
- 关键词：CDPMCF-7萤光素酶报告基因
- 文献传递
- 多功能转录因子CTCF重组质粒构建及其表达鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的构建人CTCFcDNA全长及N端、Zn指、C端3个片段的原核融合表达载体,纯化融合蛋白并进行鉴定。方法以编码CTCF全长序列的质粒为PCR模板,分别构建GST融合表达重组质粒pGEX-4T-2-CTCF,pGEX-4T-2-CTCF-N,pGEX-4T-2-CTCF-Zn,pGEX-4T-2-CTCF-C,转化大肠杆菌BL21,酶切、测序鉴定;优化IPTG诱导表达条件,并对亲和层析纯化的GST融合蛋白CTCF,CTCF-N,CTCF-Zn,CTCF进行Far-Western blot鉴定。结果重组质粒经双酶切和测序鉴定证实构建成功。GST融合蛋白CTCF,CTCF-N,CTCF-Zn,CTCF-C均在大肠杆菌中成功诱导表达,融合蛋白经亲和层析纯化获得纯化蛋白。各纯化蛋白经SDS-PAGE和Far-Western blot鉴定,均为诱导表达蛋白质。结论成功构建了GST融合表达CTCF,CTCF-N,CTCF-Zn,CTCF-C的重组质粒,对融合蛋白表达条件进行了优化,获得了高效表达的GST融合蛋白。
- 蒋磊覃扬孙芝琳武静杨文理张军哲
- 关键词：融合蛋白
