康由发 作品数:9 被引量:65 H指数:5 供职机构: 海南大学城西校区管委会 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
香蕉MYB转录因子基因的电子克隆及生物信息学分析 被引量:3 2015年 采用电子克隆方法获得香蕉MYB基因。通过生物信息学方法,对此序列编码的蛋白质从氨基酸组成、理化性质、疏水性/亲水性、结构域及其空间结构等方面进行了预测和分析。结果表明:香蕉MYB基因编码序列全长1 266 bp,包含1 266 bp的开放阅读框,编码413个氨基酸,含有1个保守的MYB功能域、1个SANT保守结构域。在序列组成、理化性质、结构域及空间构象等方面,与小麦等其他植物的MYB转录因子具有高度的相似性。 谭琳 康由发 郑晓燕 黄丽娜 陈娇 马蔚红关键词:香蕉 MYB基因 电子克隆 生物信息学 芪合酶基因的克隆与植物表达载体的构建 被引量:6 2003年 为获得含白藜芦醇且具有保健作用的转基因番茄,进行了芪合酶基因克隆、植物表达载体构建及导入受体细胞的研究。从葡萄2个品种———雷司令和粉红玫瑰的叶片中提取基因组DNA,并以其为模板,经PCR扩增芪合酶基因,各获得一长约1.6Kb的片段,将这2个片段分别连接到pGEM-Teasy和pUCm-T上进行测序,1个片段长为1622bp(命名为S1),另一个片段长为1617bp(命名为S2)。然后将S1正向插入pEV2的果实特异性启动子TFP2和NOS终止子,构建了植物表达载体pEV2S1;将S2正向插入植物表达载体pBI121的35S启动子和NOS终止子之间,构建了植物表达载体pBS2。将重组体pEV2S1和pBS2转化大肠杆菌E.coliXL1,并对重组体进行了筛选和鉴定。 谭琳 郑学勤 康由发 施江关键词:芪合酶基因 植物表达载体 转基因番茄 白藜芦醇 基因转化 香蕉果实cDNA文库的构建 被引量:1 1999年 将从处于一定成熟度的香蕉果肉中纯化出的mRNA反转录成cDNA。cDNA纯化后与EcoRI转接头相连,并插入λgt10载体,经体外包装,侵染大肠杆菌C600hfl菌株,从而构建了香蕉果实的cDNA文库。 金志强 康由发 彭世清 孔德謇 郑学勤关键词:香蕉 CDNA文库 齿兰环斑病毒外壳蛋白基因的表达及其表达产物抗血清的制备 被引量:7 1999年 用pET-21d构建齿兰环斑病毒(ORSV)外壳蛋白基因大肠杆菌表达载体pEO。经SDS-PAGE和Westernblotting分析,含pEO的大肠杆菌正确表达了ORSV外壳蛋白基因。此表达产物为融合蛋白。用表达产物制备抗血清,并应用于间接酶联法检测ORSV,具有较高的灵敏度(10ng/mLORSV)和特异性。 潘俊松 刘志昕 康由发 郑学勤关键词:齿兰环斑病毒 外壳蛋白基因 抗血清 大果榕果实乙醇提取物抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性 被引量:6 2016年 研究大果榕果实的多酚含量及其抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性,为其进一步开发利用奠定基础。以采自海南保亭七仙岭的大果榕果实为实验材料,用体积分数65%的乙醇提取大果榕果实多酚,采用Folin-酚法测定总酚含量。对获得的大果榕果实多酚进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS)自由基、羟自由基(·OH)清除率以及α-葡萄糖苷酶抑制活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性测定。结果表明:大果榕果实多酚含量较高,达1.92 mg/g(以干质量计),其对DPPH自由基、ABTS+·和·OH均具有显著的清除活性,且呈质量浓度依赖性,IC50值分别为141.25、91.20、45.71μg/m L;大果榕果实多酚对α-葡萄糖苷酶抑制活性强于阳性对照阿卡波糖,且呈现明显的质量浓度依赖性,IC50值为102.33μg/m L;同时大果榕果实多酚对乙酰胆碱酯酶也具有一定的抑制活性,IC50值为4.9 mg/m L。研究结果表明大果榕果实多酚具有良好的抗氧化性、α-葡萄糖苷酶抑制活性和一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性。 谭琳 郑晓燕 王甲水 马伏宁 康由发 臧小平 马蔚红关键词:抗氧化活性 自由基清除活性 乙酰胆碱酯酶抑制活性 海南山蛭蛭素基因的克隆和序列分析 被引量:3 2004年 以海南山蛭(Haemadipsahainana)基因组DNA为模板,以合成的2段30个寡聚核苷酸的序列为引物,经过PCR扩增,分离海南山蛭中的蛭素基因,获得了1条大小约237 bp的DNA片段。将其克隆到pGEM-Teasy载体中,经筛选与检测,并进行序列分析。结果显示,所克隆的海南山蛭蛭素基因的大小为231 bp,与Dr. Burkhard报道的印度山蛭蛭素cDNA序列相比,其核苷酸的同源性为99.9%。 谭琳 康由发 谭恩光 郑学勤关键词:山蛭 基因克隆 桃金娘果实多酚抗氧化活性及乙酰胆碱酯酶抑制活性研究 被引量:8 2015年 为了探明桃金娘果实的多酚含量及其多酚的抗氧化活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性,以为进一步开发利用奠定基础。以采自海南海口的桃金娘整果为实验材料,用95%体积分数的乙醇提取桃金娘多酚,采用福林酚法测定其总酚含量。对获得的桃金娘多酚进行DPPH、ABTS、羟基自由基清除率和乙酰胆碱酯酶抑制活性测定。结果表明,桃金娘的多酚含量较高,达2.45 mg/g干物质,其对DPPH、ABTS和羟基自由基均具有显著的清除活性,并且其活性随着浓度的增加,清除能力也随之增强,其IC50分别为120.78、25.44、194.09μg/m L;桃金娘果实多酚对乙酰胆碱酯酶也显示出较强的抑制活性,IC50为15.07μg/m L,且随着浓度的增加,其抑制活性呈上升趋势。该实验显示桃金娘果实多酚不仅具有较好的抗氧化性还具有显著的乙酰胆碱酯酶抑制活性。 郑晓燕 郭素霞 臧小平 葛宇 柯建浩 谭琳 马蔚红 康由发关键词:桃金娘 抗氧化活性 自由基清除活性 乙酰胆碱酯酶抑制活性 山蛭基因组DNA的提取及其PCR扩增产物的分析 被引量:2 2003年 利用PCR技术从海南山蛭体内分离山蛭素 (抗凝血蛋白 )基因 ,首先需获得不带有山蛭体表色素且完整的山蛭基因组DNA ,本试验通过结合使用SDS-蛋白酶裂解法和CTAB法 ,有效的去除了山蛭基因组DNA提取过程中难以去除的色素 ,得到的基因组DNA保持完整 ,无降解。以之作为模板 ,进行PCR扩增 ,获得一个长度约为 2 37bp的特异性片段 ,此片段与印度山蛭蛭素的cDNA大小几乎一致。初步表明 ,这个序列没有内含子 。 谭琳 康由发 施江 郑学勤关键词:山蛭 基因组DNA 芪合酶基因转化番茄产生白藜芦醇的研究 被引量:33 2003年 为了获得含有白藜芦醇的转基因番茄,从葡萄雷司令中克隆到芪合酶基因,以之构建了含有组成型启动子的植物表达载体pBS2,用于农杆菌介导对番茄品种TXOO14的遗传转化.通过对诱导愈伤、出芽、生根、再生植株的筛选,得到5株再生小苗.经PCR、Southern检测证实,有3株为真正的转基因植株.用HPLC对3株转基因植株叶片进行白藜芦醇含量鲜重分析,它们中白藜芦醇的含量分别为12.45μg g,5.35μg g,4.55μg g. 谭琳 康由发 马兵刚 郑学勤关键词:芪合酶基因 番茄 白藜芦醇