岳光芳
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：华南农业大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 具生物活性的重组鸡催乳素的制备被引量：1
- 2009年
- 将鸡催乳素(PRL)成熟肽cDNA片段插入原核表达载体pRSETA的NheI和Hind III位点之间,构建重组表达质粒pPRL-SCAU.将此质粒转化大肠杆菌Escherichia coli菌株BL21(DE3),将重组菌在含氨苄青霉素的LB培养基中培养,再经IPTG诱导,可以诱导表达相对分子质量约为24 500的重组鸡PRL.经0.1 mmol/L IPTG诱导4 h后,表达量达到最高,占总菌体蛋白的30%左右.表达的重组鸡PRL含组氨酸标记,以包涵体形式存在,可经50%Ni-NTA树脂分离纯化,然后在透析复性后分离出可溶性部分.将此可溶性重组鸡PRL对3月龄的鸽子在左侧嗉囊处相同位置隔24 h2次皮内注射,能够显著促进嗉囊上皮的增生.与天然鸡催乳素的增生效果相比,所表达的重组鸡PRL的生物学活性为天然催乳素的17%至25%.
- 岳光芳陈益填刘颖李万利施振旦
- 关键词：复性生物活性
- 具生物活性的鸡催乳素的制备及对鸡颗粒细胞增殖的影响
- 在禽类，催乳素对卵泡发育、卵泡类固醇激素的分泌和就巢的调节机理方面都有重要的作用。研究表明，高水平的PRL抑制垂体促性腺激素的分泌还能直接抑制卵泡的发育使雌禽停止产蛋进入就巢。然而实际生产中观察到，催乳素并不仅仅具有抑制...
- 岳光芳
- 关键词：重组融合蛋白生物学活性卵泡发育
- 文献传递
- 质粒pRSET-A前导肽串联多聚体的构建及其多克隆抗体制备被引量：1
- 2008年
- 质粒pRSET-A是一个常用的高效原核表达载体,编码一N端含组氨酸标签(6×His)的34aa前导肽序列,以方便利用抗组氨酸标签抗体鉴定或纯化所表达的重组蛋白。实验设计一对两侧含编码疏水性氨基酸密码子的引物,经过扩增前导序列10～34aa基因序列,并重新克隆入质粒pRSET-A构建串联二聚体后,再利用质粒pRSET-A的BamH I/Bgl II同尾酶克隆位点,经一系列简单的酶切和连接,快速构建这一前导肽中不含组氨酸标签序列的串联多聚体基因,并成功表达其六聚体重组蛋白。将此重组蛋白主动免疫山羊,获得了能够特异地识别pRSET-A编码的N端前导肽序列的抗体。结果显示,所制备的羊抗10～34aa前导肽抗体能够识别pRSET-A指导表达的含有完整前导肽的重组蛋白,但不能识别不含10～34aa序列的重组蛋白;同时,利用同位酶技术可以快速高效构建短肽的串联多聚体以制备具有高免疫原性的亚单位疫苗或免疫调控物质。
- 黄运茂岳光芳刘丽刘颖李万利施振旦
- 关键词：质粒抗体
