孙姝娟 作品数:10 被引量:44 H指数:4 供职机构: 中国科学院海洋研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 中国科学院知识创新工程重要方向项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
中国明对虾酚氧化酶原基因cDNA的克隆与表达特征 被引量:14 2010年 利用3′和5′RACE技术从中国明对虾血细胞中克隆了一个酚氧化酶原基因FCproPO,FCproPO基因cDNA全长为2311bp,其中开放阅读框2061bp,编码687个氨基酸,预测分子量为78.71ku。推测的序列与凡纳滨对虾同源性为84%,与日本囊对虾同源性为71%。RT-PCR实验结果表明,FCproPO在血细胞中的相对表达量最高,在心脏和精巢中几乎不表达。序列分析发现FCproPO含有两个保守的铜离子结合位点;进化分析发现FCproPO与斑节对虾、日本囊对虾、凡纳滨对虾等海水虾的酚氧化酶原亲缘关系最近。该基因在被鳗弧菌和对虾白斑病毒(WSSV)感染后的对虾肝胰腺中的表达量显著增加,并具有不同的时空表达趋势,提示中国明对虾FCproPO基因在免疫反应中具有重要作用。 孙杰 王宝杰 李晓华 孙姝娟 刘梅 蒋克勇 王雷关键词:中国明对虾 酚氧化酶原 基因克隆 全营养破壁酵母对仿刺参非特异性免疫及肠道菌群的影响 被引量:10 2012年 仿刺参(Apostichopus japonicus)体质量(0.65±0.03)g,基础饲料中添加5%(质量分数)全营养破壁酵母为实验饲料,以基础饲料为对照。分别于投喂后第15天和第30天检测仿刺参体腔细胞数量、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、过氧化氢酶(CAT)活性,于第30天计数肠道菌群。结果显示,实验组仿刺参体腔细胞数量与对照组差异不显著;ACP、AKP、CAT活性均比对照组有所增高,其中第15天CAT活性和第30天AKP活性与对照组具有显著性差异(P<0.05)。投喂破壁酵母对仿刺参肠道菌群有一定影响,可显著降低肠道内异养菌总数及弧菌数量。研究表明,全营养破壁酵母对仿刺参非特异性免疫活性有增强作用,且对肠道有害菌群有一定抑制作用,但其对肠道菌群的影响及适宜添加量等需进一步研究。本研究旨在探索全营养破壁酵母在海参育保苗中的作用机理,以期为仿刺参安全健康养殖开发新型绿色添加剂提供科学依据。 宫魁 王宝杰 刘梅 蒋克勇 孙姝娟 王雷 范瑞用 张连润 张连水关键词:仿刺参 非特异性免疫 肠道菌群 中国明对虾TOR基因的克隆及精氨酸、亮氨酸对其表达的影响 被引量:4 2010年 首次从中国明对虾(Fenneropenaeus chinensiss)肌肉组织中克隆得到TOR基因的cDNA,全长共7638bp,开放阅读框7389bp,编码2462个氨基酸。氨基酸序列比对和结构域分析均证实其为目前已知的TOR激酶的同源蛋白。应用实时定量PCR的方法研究TOR在中国明对虾中的组织分布特异性,以及注射等浓度的亮氨酸和精氨酸后,肌肉组织中TORmRNA表达水平在3,6,12,24h的变化,探讨营养水平对TOR基因表达的影响。结果显示,注射亮氨酸和精氨酸24h的对虾TORmRNA表达量是对照组的3~4倍,显著升高(P〈0.05),证实氨基酸对TOR的表达具有调节作用。 孙姝娟 刘梅 彭劲松 王宝杰 蒋克勇 王雷关键词:TOR 精氨酸 亮氨酸 实时定量PCR 中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)TOR基因的分子克隆及相关信号通路的初步研究 <正>本文以我国重要养殖经济动物中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)为研究对象,对其细胞生长和营养调控相关的TOR(Target of Rapamycin)信号转导通路进行了初步的研究。利用同源... 刘梅 孙姝娟 王雷 王宝杰 蒋克勇文献传递 TOR信号转导通路介导的翻译控制 被引量:2 2009年 TOR(target of rapamycin)是真核生物中高度保守的一种大分子的Ser/Thr激酶,是免疫抑制剂雷帕霉素的在体内的靶物质。TOR能够对营养状况和生长因子等因素的变化做出应答反应,通过介导磷酸化反应调节蛋白激酶4E-BP1,S6K, eEF2和磷酸酶等的活性,控制下游翻译因子的磷酸化水平,调节核糖体发生,蛋白质合成等生理过程,在细胞的生长,增殖的综合调控中起到中枢作用。 孙姝娟 王雷关键词:TOR 信号转导 中国明对虾血蓝蛋白C末端片段在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性 被引量:2 2013年 为研究中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)血蓝蛋白C末端(FcHC-C)的抗菌功能,将血蓝蛋白基因FcHC的2个C末端基因片段连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建酵母表达载体pPIC9K/FcHC-C。该载体经Sal I酶切后,采用PEG法转化毕赤酵母(Pichia pastoris GS115)。转化子经过PCR鉴定后,阳性克隆通过含有G418的YPD平板筛选,获得高拷贝重组子。重组毕赤酵母利用甲醇诱导表达目的基因。经Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,利用酵母工程菌成功表达了血蓝蛋白C末端片段(rFcHC-C1和rFcHC-C2)。抑菌活性鉴定实验结果显示,重组蛋白rFcHC-C1和rFcHC-C2作为阴离子抗菌肽具有抗真菌和抗细菌的活性。 邱楚雯 刘梅 王宝杰 蒋克勇 孙姝娟 孟晓林 骆作勇 王雷关键词:血蓝蛋白 抗菌肽 仿刺参饲用海泥资源质量评价的初步研究 被引量:2 2012年 试验测定了盐场沉积海泥的有机质含量与主要细菌类群变化等,并与几种已应用于仿刺参育保苗的商品化海泥产品比较,旨在寻找能够客观反映海泥质量的评价指标,为仿刺参饲用海泥资源的开发利用提供理论依据。采用元素分析仪测定海泥总碳、总氮,灼烧法检测有机质,平板计数法计数6类主要细菌类群(异养菌、弧菌、大肠杆菌、乳酸菌、芽孢菌及酵母)的菌落数量。结果表明,目标区域海泥的总碳、总氮与有机质含量与商品化海泥产品相近;经干燥处理后的海泥,其异养菌总量比商品化海泥显著提高,但大肠杆菌菌落无显著差异,弧菌菌落显著降低,乳酸菌、芽孢菌与酵母等有益菌菌落均显著提高。研究表明,盐场沉积物作为仿刺参饲用海泥具有一定的开发价值,但养殖效果有待验证。 宫魁 王宝杰 刘梅 蒋克勇 孙姝娟 邱楚雯 孟晓林 王雷关键词:仿刺参 海泥 C/N 有机质 菌群 水产动物肉质风味改良及相关候选基因研究 <正>针对目前我国水产养殖业中普遍存在的由于密度高、营养不合理、环境污染、生长周期短而造成的养殖水产品口感差、土腥味重、鲜味降低、色泽差、营养价值下降等一系列关键问题,通过调节摄食,添加海藻提取物、天然产物、生物碱、核苷... 蒋克勇 王雷 刘梅 王宝杰 孙姝娟 张守庆 宫魁 孙国琼文献传递 中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)TOR基因的分子克隆及相关信号通路的初步研究 本文以我国重要养殖经济动物中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)为研究对象,对其细胞生长和营养调控相关的TOR(Target of Rapamycin)信号转导通路进行了初步的研究。利用同源克隆和... 孙姝娟关键词:中国明对虾 TOR 基因克隆 文献传递 中国对虾血蓝蛋白基因cDNA的克隆与序列分析 被引量:11 2010年 利用3’和5’RACE技术从中国对虾Fenneropenaeus chinensis肝胰腺中克隆了1个血蓝蛋白基因FCHc,FCHc基因cDNA全长为2161bp。其中,开放阅读2 034bp,编码678个氨基酸,预测分子量为77.59 kDa。FCHc序列与凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei血蓝蛋白同源性为82%,与日本囊虾Marsupenaeus japonicas同源性为85%。Real-timePCR实验结果表明,FCHc在肝胰腺中的相对表达量最高,在心脏和表皮中几乎不表达。该基因在鳗弧菌和对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染后的对虾肝胰腺中的表达量显著增加,并具有不同的时空表达趋势,提示中国对虾FCHc基因在免疫反应中具有重要作用。 孙杰 王宝杰 孙姝娟 李晓华 姜珊 刘梅 蒋克勇 王雷关键词:中国对虾 血蓝蛋白 基因克隆