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唐洁
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1
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供职机构:
南京大学医学院附属鼓楼医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
胡娅莉
南京大学医学院附属鼓楼医院
张艳青
南京大学医学院附属鼓楼医院
陈林君
南京大学医学院附属鼓楼医院
刁振宇
南京大学医学院附属鼓楼医院
颜桂军
南京大学医学院附属鼓楼医院
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2009
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腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin和可溶性血管内皮生长因子受体-1重组蛋白的构建和功能初步鉴定
2009年
目的构建腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin(sEng)和可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)重组蛋白,观察其对内皮细胞管化及滋养细胞迁移的影响。方法提取小鼠胎盘组织总RNA,通过RT—PCR获得sEng和sFlt-1 cDNA,插入到穿梭载体pAdTrack—CMV中,获得pATC-sEng和pATC—sFh-1质粒,转化其至pAdeasy-1受体菌,选阳性克隆转染293A细胞,获得Ad/sEng和Ad/sFlt-1,制备高滴度病毒液。用病毒感染COS7细胞,检测sEng和sFlt-1蛋白表达,并通过成管和划痕实验观察两种蛋白对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)管化和Bewo细胞迁移的影响。结果成功获得sEng和sFlt-1重组腺病毒,其滴度分别为2.2×10^11pfu/ml和2.0X10^11pfu/ml。感染COS7细胞后,sEng和sFlt-1蛋白均较高表达,并能抑制HUVEC管化及Bewo细胞迁移,两者有协同作用。结论构建的腺病毒介导的小鼠sEng和sFlt-1重组蛋白对血管生成和滋养细胞迁移有明显抑制作用。
唐洁
胡娅莉
刁振宇
孙海翔
颜桂军
陈林君
张艳青
关键词:
细胞内信号肽和蛋白质类
血管内皮生长因子受体1
重组蛋白质类
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