刘海英
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 内切葡聚糖酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达
- 纤维素酶是降解纤维素生成葡萄糖的一类酶系的总称,它主要包括:内切葡聚糖酶(endoglucanase,EG),纤维二糖水解酶(cellobiohydrolase,CBH)和β-葡萄糖苷酶(β-glucosidases)。...
- 刘海英王娟舒正玉黄建忠
- 关键词：纤维素酶长梗木霉毕赤酵母
- 一株纤维素酶产生菌外切纤维素酶基因的克隆及在巴斯德毕赤酵母中的表达
- 纤维素是地球上最为丰富的可再生性资源，占地球生物总量的40％，是目前分布最广的天然碳水化合物，每年全球年产量高达4000亿吨。但是这些资源绝大部分目前都没有得到很好的利用。随着石油和煤炭资源的日渐枯竭，酶法降解和利用纤维...
- 王娟刘海英舒正玉黄建忠
- 关键词：长梗木霉外切纤维素酶毕赤酵母
- 长梗木霉内切葡聚糖酶基因的克隆与表达研究
- 一株高产纤维素酶的真菌菌株经形态学鉴定和ITS rDNA序列分子鉴定并被命名为长梗木霉SSL(Trichoderma longibrachiatum，SSL)。
利用PCR和RT-PCR的技术从该菌株中扩增得到...
- 刘海英
- 关键词：长梗木霉分子标记内切葡聚糖酶纤维素酶毕赤酵母CDNA序列
- 文献传递
- 长梗木霉内切葡聚糖酶I基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量：9
- 2009年
- 一株纤维素酶高产菌株经ITS序列鉴定并命名为长梗木霉SSL(Trichoderma longi-brachiatum,SSL)。利用RT-PCR的方法从该菌株中克隆出内切-1-4-β-D-葡聚糖酶I的基因(eg1),该基因全长1386bp,编码461个氨基酸。序列分析表明:该基因序列与T.longibrachiatum egl1基因具有90%以上的同源性。将该基因的成熟肽编码序列插入到Pichia pastoris表达载体pPIC9k中,构建重组表达质粒pPIC9k-eg1,转化P.pastoris GS115。重组P.pastoris菌株,经甲醇诱导后,胞外重组内切葡聚糖酶I的活力达73U/mL。SDS-PAGE中出现一条明显加强的蛋白质条带,其分子量大约为58kD。
- 刘海英王娟舒正玉吴松刚黄建忠
- 关键词：分子标记毕赤酵母
- 长梗木霉外切纤维素酶CBH Ⅱ基因的克隆及表达被引量：7
- 2009年
- 分别以长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)XST1的基因组DNA和cDNA为模板PCR扩增其外切纤维素酶Ⅱ(cellobiohydrolaseⅡ,CBHⅡ)的全长基因cbhⅡ。序列分析表明:cbhⅡ基因全长1583bp,含3个内含子,分别为94～144bp,529～584bp和832～894bp。该基因编码的外切纤维素酶Ⅱ蛋白全长470个氨基酸(其中前24个氨基酸为信号肽)。将全长的cbhⅡ基因连接到pPIC3.5K上,转化毕赤酵母GS115(Pichia pastoris GS115)。重组转化子96h诱导培养,发酵上清液水解pNPC的酶活为18.1U/L。SDS-PAGE检测结果表明:浓缩的重组转化子发酵液较对照菌株的发酵液中,有一明显加强的蛋白质条带,Mr约为67k。
- 王娟刘海英朱亚然舒正玉吴松刚黄建忠
- 关键词：长梗木霉外切纤维素酶毕赤酵母
