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血小板第四因子PF4对人中性粒细胞粘附性与呼吸爆发的调节作用被引量：3: 2001年; 目的研究血小板第四因子PF4对人中性粒细胞Np功能的影响。方法用结晶紫染色、免疫荧光标记、PKC试剂盒测定、NBT法及高香草酸HVA荧光分光光度法比较对照组与PF4作用的实验组在趋化因子刺激前后,PF4对中性粒细胞总粘附性、整合蛋白CD11b的表达、PKC水平及呼吸爆发作用产生活性氧物质reactiveoxygenspeciesROSO2·-、H2O2等的影响。结果PF4对静息中性粒细胞总粘附性有轻度的增强作用使总粘附性上调了12.24%P<0.01,而对整合蛋白CD11b的表达、呼吸爆发产生的ROSO2·-、H2O2则无影响。进一步研究发现PF4使经趋化三肽(FMLP)活化的中性粒细胞的总粘附性下调17.47%P<0.01;使经趋化三肽(FMLP)活化的中性粒细胞的整合蛋白CD11b的表达下调18.84%P<0.01;使经佛波酯(PMA)活化的中性粒细胞的呼吸爆发作用产生的O2·-、H2O2分别下调了50.29%P<0.01、226.53%P<0.05。研究同时发现PF4对静息及活化的中性粒细胞的PKC水平均无影响。结论首次证明PF4与其它经典的趋化因子不同,是中性粒细胞活化的一个负调节因子,对中性粒细胞功能主要起降调节的作用。这种降调节作用不是通过PKC信号转导途径完成的。; 卢士红刘拥军马月霞杨琳韩忠朝; 关键词：血小板第四因子趋化因子中性粒细胞 CD11B

脐带源间充质干细胞的分离和生物学性状被引量：44: 2006年; 目的建立从脐带分离间充质干细胞的方法,并研究其生物学性状。方法脐带经酶消化后于DMEMLG/F12培养基中培养,倒置显微镜及电镜观察细胞形态学,细胞计数绘制细胞生长曲线,计数成纤维细胞集落形成单位(CFUF),流式细胞仪测定细胞周期及细胞免疫表型,免疫组织化学染色及RTPCR检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力,RTPCR检测其细胞因子的分泌,与脐血来源CD34+细胞共同培养检测其支持造血的能力。结果经酶消化后,每cm脐带可得到中位数为1.01×106的有核细胞,CFUF产率为1/1609有核细胞,经贴壁传代可分离出成纤维样细胞,细胞倍增时间为(28.02±10.53)h。流式细胞仪分析细胞周期显示,>80%的细胞处于G0/G1期,S+G2+M期的细胞仅占(13.04±4.31)%。免疫表型分析显示,CD13、CD29、CD44、CD105(SH2)、CD73(SH3)、CD166和MHCI阳性,CD45、CD34、CD38、CD31和MHCⅡ阴性。体外诱导实验证实,该细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。RTPCR显示,该细胞表达干细胞因子、血小板生成素,酪氨酸激酶受体配基、白细胞介素6、巨噬细胞集落刺激因子、白血病抑制因子、基质细胞衍生因子和血管内皮细胞生长因子,不表达白细胞介素3。与脐血来源CD34+细胞共同培养2周可见鹅卵石形成区,共培养8周证实其支持长期造血能力。结论建立从脐带中分离间充质干细胞的方法,脐带是间充质干细胞的新的来源。; 吕璐璐刘拥军许贞书王彤张浪辉朱雄鹏梁琳慧王晗陈志哲韩忠朝; 关键词：间充质干细胞脐带多能干细胞

人间充质干细胞治疗肝病研究进展及前景被引量：2: 2009年; 施明刘拥军王福生; 关键词：间充质干细胞组织细胞分化骨髓基质细胞肝病神经胶质细胞间质组织

基因组萨斯病毒（SARS Virus）外壳S蛋白及其制造工艺: 2004年; 韩忠朝徐斌刘拥军; 关键词：SARS 基因工程原核表达载体

茂原链轮丝菌转谷氨酰胺酶基因在大肠杆菌中高效表达被引量：13: 2005年; 利用PCR方法从茂原链轮丝菌(Streptoverticilliummobaraense)基因组DNA扩增出微生物转谷氨酰胺酶(MicrobialTransglutaminase,MTG)的基因片段,并构建表达质粒pET_MTG。后者在大肠杆菌(RosettaDE3)中得到高效表达,但表达的MTG存在于包涵体中。经洗涤、变性和复性,并以强阳离子交换层析纯化,获得了SDS_PAGE纯的MTG,并具有与天然酶几乎相同的比活性。此项工作为工业化生产MTG打下了基础。; 徐斌韩之波杨萍刘拥军李妍涵韩忠朝; 关键词：微生物转谷氨酰胺酶大肠杆菌包涵体

RNA干扰沉默HIF-1α对人乳腺癌细胞功能的影响: 目的:研究靶向针对缺氧诱导因子-1 α（HIF-1 α）的短发夹RNA（shRNA）对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞功能的影响。方法:通过在细胞培养中加入150 μ mol／ L氯化钴（CoCl2）模拟低氧环境。采用RNA...; 韩之波王晗任贺赵辉刘拥军韩忠朝; 关键词：缺氧诱导因子-1Α RNA干扰人乳腺癌细胞系; 文献传递

脐带间充质干细胞对T细胞的免疫调控研究被引量：16: 2007年; 目的:研究脐带源间充质干细胞(UC-MSCs)异源T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:从脐带中分离和培养间充质干细胞,流式细胞术检测其表面标志以鉴定纯度;用Brdu法测定细胞增殖率,观察UC-MSCs对异体T淋巴细胞增殖的影响;流式细胞仪检测共培养体系中CD4+、CD8+水平检测及UC-MSCs对T淋巴细胞转化的影响;且用ELISA法检测共培养上清细胞因子IL-4、IFN-γ的表达水平。结果:从脐带获得的MSC免疫表型分析显示,其不表达HLA-II抗原。对PHA刺激的脐带血T淋巴细胞,UC-MSCs对其的增殖反应具有抑制作用,呈细胞数量剂量依赖性;UC-MSC与脐带血单个核细胞共培养体系中,CD8+细胞比例降低,与对照组有显著性差异(P<0.01),CD4+细胞比例无明显变化(P>0.05);UC-MSC抑制了共培细胞养体系中IFN-γ分泌,然而促进了IL-4的分泌,与对照组有显著性差异(P<0.01)。结论:UC-MSCs抑制PHA刺激的T淋巴的增殖,能够改变T细胞亚群及T细胞分泌的细胞因子,这种抑制特性表明,UC-MSCs对免疫反应具负调节作用,可能为GVHD的防治以及自身免疫性疾病治疗提供一条新途径,有助于UC-MSC的临床应用。; 张颢龚伟孟磊池颖张浪辉陈志哲刘拥军韩忠朝; 关键词：脐带间质干细胞脐带 T淋巴细胞免疫调节

基质细胞抑制HL-60细胞凋亡机制初探被引量：2: 2005年; 许贞书刘拥军吕璐璐韩之波王彤陈志哲韩忠朝; 关键词：基质细胞 HL-60 细胞凋亡髓系白血病细胞

人促血液血管生成素的原核表达、分离纯化及活性分析被引量：1: 2005年; 目的利用基因工程技术获得重组的人促血液血管生成素(HAPO),以探讨其对骨髓细胞的作用。方法提取人胎肝总RNA,利用RT-PCR、克隆HAPO cDNA插入表达载体pET32c,使之在大肠杆菌BL21(DE3)中表达;用DEAESepharose Fast Flow阴离子交换柱、Ni-Chelating Sepharose Fast Flow亲和柱以及SP Sepharose Fast Flow阳离子交换柱分离纯化,肠激酶酶切,液体培养小鼠骨髓细胞。结果经IPTG诱导HAPO实现了在大肠杆菌中的可溶性表达,经一系列层析获得融合的rh-HAPO,肠激酶酶切除去N-端融合部分后,获得高纯度的rh-HAPO。液体培养小鼠骨髓实验发现rh-HAPO可促进CD34+细胞和flk-1细胞的增殖。结论重组蛋白rh-HAPO可促进造血干/祖细胞的增殖。; 刘拥军任倩韩之波杨萍王彤卢士红韩忠朝; 关键词：基因表达分离纯化大肠杆菌

HAPO-新型的促进血液和血管增殖的干细胞因子的研究: 刘拥军卢士红徐斌杨仁池任倩刘斌陆敏闫凤英韩之波韩忠朝; HAPO是该实验室新发现的干细胞因子，根据其氨基酸序列，从人胎肝cDNA文库中克隆出其cDNA，在大肠杆菌系统中成功表达并纯化制备出重组人多肽因子，生物学活性分析显示这种新发现的因子具有促进造血干祖细胞和血管内皮细胞增殖...; 关键词：; 关键词：血液血管增殖干细胞因子

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刘拥军

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