刘建楠 作品数:13 被引量:127 H指数:6 供职机构: 桂林医学院药学院 更多>> 发文基金: 桂林市科技攻关项目 广西壮族自治区科技攻关计划 广西壮族自治区科学研究与技术开发计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
构树叶总黄酮对人肝癌细胞HepG-2增殖和凋亡的作用及其机制研究 被引量:7 2013年 目的:探讨构树叶总黄酮(TFBP)对人肝癌细胞(HepG-2)增殖和凋亡的作用。方法:采用细胞增殖实验(MTT法),取对数生长期HepG-2,随机分为药物组和对照组,用3,6,9,12 g.L-1不同质量浓度构树叶总黄酮作用HepG-2,分别干预24,48,72 h。通过流式细胞仪检测在以上质量浓度下作用细胞48 h后的细胞凋亡率,Western blont法检测以上质量浓度构树叶总黄酮作用细胞48 h后Bcl-2基因、促凋亡基因Bax表达的情况。结果:各质量浓度构树叶总黄酮对HepG-2的生长有显著的抑制作用,呈明显的时间和剂量依赖性,经不同质量浓度的构树叶总黄酮作用48 h后HepG-2凋亡率显著增加,药物组与对照组比较为(0.478±0.085 vs 0.498±0.014;0.354±0.004 vs 0.498±0.014;0.218±0.075 vs 0.498±0.014)有显著性差异,P<0.05,抑癌基因Bcl-2表达量呈逐渐下降的趋势,促凋亡基因Bax表达量随着质量浓度的升高表达量呈现上升趋势。结论:构树叶总黄酮可以有效的抑制HepG-2的生长,诱导细胞凋亡,其诱导该细胞凋亡的作用可能是通过下调抑癌基因Bcl-2的表达,可为肝癌的生物学治疗提供新的方法。 朱开梅 姚丽新 刘建楠 桂劲松 顾生玖关键词:肝癌 增殖 凋亡 构树叶总黄酮诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制探讨 被引量:4 2014年 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用MTT法检测浓度分别为3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞24、48和72h后对细胞生长的影响;Hoechst33342荧光染色法观察3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞48h后细胞形态学的变化;免疫细胞化学检测3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞48h后凋亡相关基因Bcl-2及Bax蛋白表达;比色法检测3、6、9和12g/L TFBP作用于HepG-2细胞48h后Caspase-3活性。结果:随着药物浓度的增大,TFBP抑制HepG-2细胞增殖的作用逐渐增强,呈剂量依赖性,在3、6、9和12g/L的TFBP作用于HepG-2细胞24h后,HepG-2细胞增殖抑制率分别为7.63%、11.86%、19.02%和21.81%,F=5.16,P=0.034;48h后分别为20.20%、29.44%、39.21%和43.96%,F=11.28,P=0.003;72h后分别为27.24%、34.70%、52.46%和64.72%,F=86.78,P<0.001。Hoechst33342荧光染色法可见,随着药物浓度的增大,细胞的生长变慢,胞质变疏松,细胞核皱缩,深染,出现典型的细胞凋亡形态。免疫细胞化学检测可见,经不同浓度TFBP处理HepG-2细胞48h后,HepG-2细胞Bcl-2蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变浅,Bax蛋白表达随着浓度的增加而逐渐变深,Bcl和Bax蛋白的阳性表达率与对照组比较差异均有统计学意义,F值分别为6.563和30.883,P值分别为0.012和0.001。比色法检测Caspase-3活性显示,对照组与3、6、9和12g/L的TFBP对HepG-2细胞作用48h后,Caspase-3酶活性分别为(1.38±2.13)、(3.58±2.21)、(4.95±3.61)、(5.25±1.41)和(5.75±2.24)U/mg,随着TFBP浓度的增加,Caspase-3酶活性显著增高,当TFBP浓度为6、9和12g/L时,各实验组与对照组比较差异有统计学意义,F=5.42,P=0.003。结论:TFBP在体外对肝癌HepG-2细胞有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白表达以及增强Caspase-3的活性有关。 朱开梅 李美波 许有瑞 刘建楠 顾生玖关键词:BCL-2 BAX CASPASE-3 构树药用活性化学成分及药理临床应用研究进展 被引量:42 2011年 随着科技的发展,国内外学者对构树的研究和开发利用越来越加关注,发现其不仅是优良的纸浆材料、饲养原料,还具有非常重要的药用和临床应用价值。作者就构树中具有药用活性的化学成分、药理和临床应用的相关研究进行综述,为合理利用研发构树资源提供参考。 朱开梅 刘建楠 顾生玖 赵磊关键词:构树 化学成分 药理 构树叶总黄酮提取物诱导人肝癌细胞HepG2细胞凋亡及机制 被引量:3 2013年 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)对人肝癌细胞HepG2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT法检测细胞生长抑制率;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;RT-PCR法检测基因Bcl-2、Bax mRNA的表达;免疫细胞化学SP法检测基因Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:MTT结果显示,TFBP对HepG2有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系;Hoechst 33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等细胞凋亡特征;流式细胞仪结果显示,细胞出现凋亡形态改变,且细胞被阻滞于G2/M期,随浓度增加,凋亡率逐渐增加;RT-PCR和SP结果显示,随着TFBP浓度增加Bcl-2 mRNA和蛋白表达逐渐减弱,Bax mRNA和蛋白的表达逐渐增强。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。其诱导凋亡的机制可能与其下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达有关。 朱开梅 李美波 骆彩珍 刘建楠 顾生玖关键词:HEPG2细胞株 细胞凋亡 BCL-2 BAX 超声波法提取香蕉皮多糖的条件优化及其生物活性 被引量:16 2011年 [目的]优选香蕉皮多糖的提取工艺条件及多糖生物活性研究。[方法]运用超声波技术提取香蕉皮多糖,考察料液比、水提时间、水提温度和提取次数等因素对提取工艺的影响,用苯酚-硫酸法测得香蕉皮中多糖含量。利用MTT法检测多糖对人乳癌MCF_7细胞增殖的影响。[结果]香蕉皮多糖提取的最佳条件为:超声时间210 s,超声功率320W,料液比1∶50,提取温度为50℃,水提时间1h,提取2次。[结论]利用超声波法提取香蕉皮中的多糖,提取效率高,工艺稳定可靠,方法简便可行;香蕉皮多糖对人乳MCF_7细胞有明显的抑制增殖作用。 朱开梅 顾生玖 唐世锭 刘建楠 欧奕 赵磊关键词:香蕉皮 多糖 超声提取 构树叶总黄酮对人肝癌HepG-2细胞增殖及其细胞周期的影响 被引量:4 2014年 目的:研究构树叶总黄酮(total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,采用MTT法检测细胞生长抑制率;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察细胞的形态变化并用流式细胞仪检测细胞的周期及细胞凋亡率。结果:MTT结果显示,各质量浓度3,6,9,12 g·L-1的TFBP对HepG-2有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系,3,6,9,12 g·L-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细48 h后,细胞增殖抑制率分别为20.2%,29.44%,39.21%,43.96%;9 g·L-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可达52.46%,与对照组具有显著性差异(P<0.05);Hoechst 33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等典型细胞凋亡特征及凋亡小体;流式细胞仪结果显示,随着TFBP作用浓度的增加,加药组细胞凋亡率加药组凋亡率与对照组相,有显著差异(P<0.01),G0/G1期细胞逐渐减少,G2/M期细胞数逐渐增多,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),细胞周期被阻滞在G2/M期。结论:TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用,其抑制机制可能和诱导细胞凋亡与阻滞细胞周期有关。 朱开梅 李美波 骆彩珍 刘建楠 顾生玖构树叶总黄酮对肝癌HepG-2细胞增殖和凋亡作用的研究 研究内容和目的
1采用微波辅助提取法从构树紧中提取构树叶总黄酮,经大孔树脂柱、聚酰胺柱进行分离纯化,做初步鉴定。
2体外观察构树叶总黄酮抑制肝癌细胞株HepG-2细胞生长的作用,明确量效关系,选择药物的半... 刘建楠关键词:HEPG-2细胞 凋亡 文献传递 构树叶中总黄酮微波提取工艺优化 被引量:6 2011年 目的:优化构树叶总黄酮(TFBP)的微波辅助提取最佳工艺。方法:运用微波辅助提取构树叶总黄酮,以芦丁为指标,利用紫外分光光度计测定总黄酮吸光度进行指标控制,采用L9(34)正交试验法筛选最佳提取工艺。结果:微波辅助提取构树叶总黄酮的最佳工艺条件为微波功率350 W,温度45℃,微波时间15 min,料液比1∶10。结论:提取工艺方法简单、合理、稳定且可行。 朱开梅 刘建楠 顾生玖 唐世锭 欧奕 赵磊关键词:微波辅助 构树叶 总黄酮 正交试验 香蕉皮多糖对人乳腺癌细胞Caspase-3蛋白表达的影响 被引量:4 2011年 目的观察香蕉皮多糖对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖的抑制作用及机制。方法将MCF-7细胞分为两组,实验组加入0.51、.52、.5、3.5 mg/ml的香蕉皮多糖溶液,对照组加入等量的DMEM培养液。均于37℃孵箱中培养244、8、72 h。采用MTT法测定各组MCF-7细胞增殖抑制率,Western blot法测定Caspase-3蛋白表达变化。结果香蕉皮多糖干预后MCF-7细胞增殖抑制率增加,且呈时间和剂量依赖性;干预48 h后Caspase-3原酶出现降解,其活性成分Caspase-3表达随药物浓度增加而明显增强。结论香蕉皮多糖可诱导MCF-7细胞凋亡,其作用机制可能与激活Caspase-3有关。 杨海云 顾生玖 朱开梅 刘建楠关键词:乳腺肿瘤 微波辅助法提取构树叶中总黄酮的工艺研究 被引量:11 2012年 [目的]优选构树叶中总黄酮的微波提取工艺。[方法]采用单因素试验考察了微波时间、微波温度、乙醇浓度、微波功率、料液比等因素的对构树叶中总黄酮得率的影响,结合正交试验优选出最佳提取条件,采用分光光度计法测定总黄酮含量。[结果]优选出最佳工艺条件为:以乙醇为提取剂,料液比1∶12(g/ml)、乙醇浓度55%、微波时间15 min、微波功率450 W、微波温度60℃;在此条件下,构树叶总黄酮的得率为79.62 mg/g。[结论]该工艺简单可行,重复性、稳定性好,可用于构树叶中总黄酮的提取。 顾生玖 姚丽新 刘建楠 欧奕 唐世锭 朱开梅关键词:构树叶 总黄酮 微波