刘丽娟
- 作品数：9 被引量：29H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 腺相关病毒2/1型载体转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究被引量：1
- 2009年
- 本研究探讨重组腺相关病毒2/1型(recombinant adeno-associated virus2/1,rAAV2/1)作为载体在不同转染复数、不同时间点转染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)的效率及对其生长的影响。用含有增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因的rAAV2/1(rAAV2/1-EGFP),以感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别为1×104、1×105、1×106转染体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞,在3、7、14天时荧光显微镜下观察EGFP的表达,检测子代细胞的活力、增殖倍数、分化情况,以评估rAAV2/1对BMMSC存活、增殖、分化能力的影响。应用流式细胞仪检测rAAV2/1-EGFP对BMMSC的转染效率及荧光指数(fluorescence indexnumber,FI)。结果表明:转染24小时后即可观察到BMMSC发出的绿色荧光,荧光强弱不一,随着时间的延长,荧光的强度逐渐增强,7天后达到稳定的状态;在3、7、14天时不同MOIrAAV2/1-EGFP转染BMMSC的活力、增殖倍数、分化能力无明显变化(p>0.05);在同一感染复数时,7天比3天和14天比7天的增殖倍数显著增强(p<0.01)。流式细胞仪检测显示,rAAV2/1-EGFP转染BMMSC的转染率和荧光指数随着MOI增加(1×104、1×105、1×106)和培养时间(3、7、14天)的延长而有不同程度的增加(p<0.05)。结论:rAAV2/1-EGFP能有效地转染BMMSC,随转染复数的增加和短期内随转染时间的延长,转染率和荧光指数明显增加。在转染过程中rAAV2/1-EGFP对细胞的活力、生长无影响。对于改造BMMSC,rAAV2/1是一种有效的基因转移载体。
- 张宁坤陈宇高连如费宇行刘英明许如意李贤峰王志国王浩王兆君曹毅王丽华李俊风李莉刘丽娟杨晔
- 关键词：重组腺相关病毒骨髓间充质干细胞基因转染
- 不同消化方式对脐带华通胶间充质干细胞提取的影响被引量：5
- 2011年
- 目的探讨使用不同酶浓度、消化不同时间及不同浓度胎牛血清的培养基稀释对消化脐带华通胶后提取培养间充质干细胞的影响。方法无菌条件下取出正常剖腹产胎儿脐带,剔除动脉、静脉及外膜,取其之间的胶状物,剪成1 mm3及更小的块状,分别加入0.1%和0.2%的Ⅱ型胶原酶,分为A、B两组,37℃水浴消化。每一组消化时间分别为4、81、2、16、202、4、28、323、6、40 h共10个消化时间点,每一个消化时间点又分为两组,分别为A1、A2组和B1、B2组。消化后的黏稠细胞悬液用完全DMEM稀释,并加入特级胎牛血清至浓度为10%(A1、B1)和20%(A2、B2),充分混匀。悬液移至75 cm2培养瓶,15 ml/瓶,37℃、5%CO2、饱和湿度培养,3 d换液。通过细胞计数观察原代细胞贴壁生长的最早时间和80%细胞铺满瓶底的时间和生长活力。结果 0.2%的Ⅱ型胶原酶消化脐带华通胶在消化时间为20h,且稀释血清浓度为20%时,获得的细胞悬液在培养36 h即有细胞贴壁,培养6 d细胞贴壁达到80%,其余各组细胞生长情况各不相等,均弱于此组。其中消化时间在8 h以内和32 h以上时不论使用多少的酶浓度和稀释时使用多少的血清浓度,细胞均不生长。结论在使用胶原酶消化脐带华通胶提取间充质干细胞的过程中,使用0.2%Ⅱ型胶原酶、消化16～24 h、稀释培养时加入至20%的血清对干细胞的提取效果最佳。
- 张宁坤陈宇高连如王丽华庄恒成李俊凤刘丽娟王志国杨晔
- 关键词：胶原酶间充质干细胞
- 质控品保存对心肌损伤标志物测定室内质控结果的影响被引量：1
- 2013年
- 心肌肌钙蛋白I（cTnI）、肌红蛋白（Mb）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）是监测心肌损伤的重要标志物。为改进实验室的质控质量,本研究通过调整质控品的保存方式,观察对质控品测定结果的影响。1材料和方法1.1仪器与试剂ACCESS2微粒子化学发光仪及配套cTnI试剂（批号A78803）、Mb试剂（批号973243）、CK-MB试剂（批号386371）和耗材购自美国Beckman Coulter公司;cTnI、Mb、CK-MB质控品,包括低值（批号29781）、中值（批号29782）、高值（批号29783）,购自美国Bio Rad公司。1.2质控品的保存及使用cTnI、Mb和CK-MB靶值（x珋）由质控品说明书给出的数值结合本实验室长期在控数据设置。质控品2种常用处理方法：（1）溶解质控品,
- 陈昌国马聪刘敏张云赵强元靳冰杨思佳刘丽娟
- 关键词：质控品心肌损伤标志物质控
- 1例造影剂过敏引发心源性休克的抢救与护理
- 2008年
- 碘普罗胺是进行冠状动脉造影的显影剂,使用时偶有过敏反应,由过敏引起心源性休克更是少见。术中应密切观察患者,发现患者出现过敏反应后,配合医生,采取积极有效的治疗措施,并进行细心的护理,减轻患者的痛苦,使患者转危为安。
- 李俊凤王丽华刘丽娟
- 关键词：造影剂过敏心源性休克护理
- 243株肠球菌属临床分离株分布及抗菌药物敏感性分析被引量：17
- 2011年
- 目的统计与分析海军总医院2008-2010年分离的肠球菌属对抗菌药物敏感试验结果,了解肠球菌属在临床各病区的分布情况以及抗菌药物敏感性,从而为肠球菌属的合理用药提供科学依据。方法按常规方法进行肠球菌属的分离培养与鉴定;用VITEK-32细菌鉴定仪进行菌株的鉴定;用K-B法进行抗菌药物药物敏感性试验,Bio-Mic药敏分析仪进行药物敏感性测定;用Whonet5.4软件进行药敏结果的统计和分析。结果 2008-2010年海军总医院共分离出243株肠球菌属,其中屎肠球菌、粪肠球菌、铅黄肠球菌、鹑鸡肠球菌、鸟肠球菌、耐久肠球菌、海氏肠球菌分别占56.0%、28.8%、7.0%、4.1%、2.1%、1.6%、0.4%,分离率占前3位的标本类型依次为尿液、分泌物和血液,共206株,占84.8%;尿路感染中以粪肠球菌为主,其次是屎肠球菌和铅黄肠球菌,屎肠球菌和铅黄肠球菌耐药率更高;检出率占前3位的科室分别为ICU、泌尿外科和呼吸内科;屎肠球菌耐药性高于粪肠球菌,对屎肠球菌耐药率最高的前3位抗菌药物分别是氨苄西林、青霉素和红霉素,耐药率分别为100.0%、97.1%和93.4%;对粪肠球菌耐药率最高的前3位抗菌药物分别是红霉素、四环素和左氧氟沙星,耐药率分别是80.0%、42.9%和38.6%。结论海军总医院分离的肠球菌属以屎肠球菌为主,肠球菌属间耐药性存在较大差异,治疗时应根据耐药特点及耐药性差异选择相应的药物,目前万古霉素仍然是治疗肠球菌属感染的有效药物。
- 钱扬会郭建巍马骢郝秀红刘丽娟李艳君马学斌
- 关键词：肠球菌属耐药性抗菌药物
- 自体骨髓单核细胞移植治疗终末期缺血性心力衰竭病人的护理被引量：1
- 2006年
- 孔玉芳刘丽娟李俊凤李琴邹文
- 关键词：缺血性心力衰竭骨髓单核细胞自体骨髓急性心肌梗死早期心肌细胞坏死正性肌力药物
- 经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植患者的护理
- 2009年
- 总结101例经冠状动脉行自体骨髓单个细胞移植患者的护理经验。术前加强宣教,使患者配合治疗护理,配合医生完善术前各项检查和术前准备,并抽取骨髓;术中严密监测患者生命体征,保证手术顺利进行;术后重视病情观察,注意及时处理患者的各个症状;在以上护理的基础上实施系统的健康教育使患者积极配合、顺利通过围手术期。101例患者手术全部成功,患者对护理工作满意。
- 李俊凤黄叶莉李莉薛宁刘丽娟张宁坤
- 关键词：骨髓单个核细胞护理
- 自体骨髓单个核细胞移植治疗急性心肌梗死患者的护理被引量：3
- 2005年
- 采用自体骨髓单个核细胞经冠状动脉移植(MBMC)治疗急性心肌梗死患者28例,结果术中注入细胞悬液后 出现少数自限性室性早搏1例、寒战2例,术后穿刺点出血2例,尿潴留3例。认为重视术前心理护理和术中配合, 强调术后心电及动脉压监测,加强骨髓移植不良反应观察、体位护理、穿刺部位出血观察及排尿护理,有利于减少 术后并发症的发生,对促进患者的康复有积极作用。
- 孔玉芳刘丽娟李俊风李琴朱丽左晋
- 关键词：心肌梗死骨髓单核细胞护理
- 血浆1-3-β-D葡聚糖检测深部真菌感染的应用研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨血浆1-3-β-D葡聚糖水平检测与传统真菌培养方法的一致性,为深部真菌感染的临床诊断寻找快速、准确的方法。方法对212例临床疑似深部真菌感染病例采集静脉血标本,用MB-80微生物动态快速检测系统测定血浆1-3-β-D葡聚糖,同时行痰液真菌培养和真菌涂片染色,比较血浆1-3-β-D葡聚糖水平检测与传统真菌培养方法的一致性。结果本组88例血浆1-3-β-D葡聚糖阳性,24例可疑阳性,阳性率52.8%。84例痰液真菌培养阳性,阳性率39.6%,其中78例(92.9%%)1-3-β-D葡聚糖阳性。46例真菌涂片染色阳性,阳性率21.7%,其中42例1-3-β-D葡聚糖阳性。若以真菌培养结果作为诊断标准,则1-3-β-D葡聚糖检测的灵敏度为95.3%,特异性为90.6%。结论血浆1-3-β-D葡聚糖水平检测比痰液真菌培养能更早、更灵敏地反映深部真菌感染,但具有一定的假阴性率,故应同时行真菌培养,以提高诊断准确性。
- 钱扬会郭建巍郝秀红刘丽娟李艳君马聪
- 关键词：真菌
