刘丰
- 作品数：49 被引量：152H指数：7
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- 辅助生殖多胎活产的影响因素研究
- 多胎妊娠是指在一次妊娠中，宫腔内同时有两个或两个以上的胎儿。而多胎活产是指一次分娩两个或两个以上的婴儿，其中至少有一个活产。近年来不孕不育呈现快速增长和年轻化趋势，辅助生殖治疗是主要的行之有效的措施。目前人类辅助生殖技术...
- 刘丰
- 关键词：辅助生殖技术胚胎移植体外受精
- HPV-11 E7重组腺病毒体外转染树突细胞对其功能的影响
- 2007年
- 目的研究腺病毒载体介导HPV-11 E7基因转染树突细胞（DC）对其表型和功能的影响。方法用最佳感染滴度（MOI）重组腺病毒pAD—E7转染成熟DC，流式细胞仪检测转染前后DC表型变化,并用^3H—TdR掺入法检测转染前后DC刺激同种淋巴细胞增殖的能力及ELISA检测DC、T细胞共同培养上清中细胞因子的水平。结果MOI100为pAD—E7转染DC最佳滴度，pAD—E7转染成熟DC前后对细胞表面的特征性表型CD1a、CD83及CD40、HLA—DR无影响，转染后的DC仍具有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力，能刺激T细胞分泌大量IFN-γ、IL-12。结论pAD—E7转染成熟DC对其功能无明显影响．转染后的DC与T细胞共孵育能诱导T细胞向Th1细胞极化。
- 王飞相文忠毕志刚李光富刘丰吴海玮张兆松
- 关键词：尖锐湿疣乳头状瘤病毒树突细胞
- 日本血吸虫副肌球蛋白合成肽的免疫学鉴定
- 2009年
- 目的鉴定日本血吸虫副肌球蛋白合成肽Sj97-P22。方法27只雌性C57BL/6小鼠随机均分为合成肽Sj97-P22免疫组、无关肽免疫组和PBS免疫组,分别于尾基部皮下注射与完全福氏佐剂等体积充分混匀的合成肽Sj97-P22(100μg)乳化物、无关肽(100μg)乳化物和PBS乳化物,抗原免疫剂量为100μg/(只.次),共免疫2次,间隔1周。于免疫后7～10d分离各组小鼠脾单个核细胞,运用流式细胞技术三色标记法检测其CD4+T细胞胞内因子干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)。将Sj97-P22免疫小鼠或PBS免疫小鼠的脾单个核细胞分别与Sj97-P22、无关肽或PBS共培养,采用3H-TdR掺入法观察细胞增殖效果,并用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2、IFN-γ和IL-4的浓度。结果Sj97-P22免疫组小鼠脾脏CD4+T细胞中胞内分泌IFN-γ的细胞百分率为(8.05±0.54)%,显著高于无关肽免疫组[(4.74±1.04)%]和PBS免疫组[(6.51±0.49)%](P<0.05);而分泌IL-4的细胞百分率[(0.60±0.11)%]显著低于PBS免疫组[(1.31±0.27)%](P<0.05),与无关肽免疫组[(0.84±0.08)%]间的差异则无统计学意义(P>0.05)。Sj97-P22可明显刺激Sj97-P22免疫小鼠脾单个核细胞增殖,增殖指数达到3.12±1.59,细胞培养上清中IL-2和IFN-γ浓度分别为(9.13±1.54)和(39.75±9.69)pg/ml,与无关肽和PBS刺激相比显著升高(P<0.05),而IL-4浓度在3个刺激物间的差异无统计学意义(P>0.05)。Sj97-P22不能刺激PBS免疫鼠脾单个核细胞增殖及培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-4浓度变化。结论Sj97-P22可能是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位。
- 陶方方王慧孙新娟刘丰王勇苏川吴海玮张兆松
- 关键词：日本血吸虫副肌球蛋白免疫学鉴定
- 一种诱导CD4<Sup>+</Sup>CD25<Sup>+</Sup>调节性T细胞的多肽及应用
- 本发明属于免疫学领域，具体涉及一种诱导CD4<Sup>+</Sup>CD25<Sup>+</Sup>调节性T细胞(Tregs)、具免疫抑制作用的血吸虫来源的多肽及应用。所说的能诱导CD4<Sup>+</Sup>CD25<...
- 苏川汪雪峰周莎贺蕾刘丰
- 文献传递
- 一种增加CD4<Sup>+</Sup>CD25<Sup>+</Sup>Foxp3<Sup>+</Sup>调节性T细胞的抗原及其应用
- 本发明属于免疫学领域，具体涉及一种可以增加CD4<Sup>+</Sup>CD25<Sup>+</Sup>Foxp3<Sup>+</Sup>调节性T细胞的血吸虫来源的蛋白抗原分子-日本血吸虫热休克蛋白60KDa(SjHSP...
- 苏川周莎汪雪峰贺蕾刘丰
- 文献传递
- Sj43B基因编码蛋白的日本血吸虫虫体组织定位
- 2005年
- 目的确定Sj43B基因编码蛋白在日本血吸虫成虫体内组织及亚细胞水平定位。方法取新鲜日本血吸虫成虫标本,按电镜生物样品制备方法常规固定、包埋,制成超薄切片,与鼠源纯化的抗重组Sj43B基因编码蛋白的IgE抗体(对照组试验为正常鼠血清)反应,再与大鼠抗小鼠IgE的IgG抗体结合,最后与蛋白A-胶体金连接,透射电镜下观察胶体金颗粒的分布。结果用正常鼠血清处理虫体切片,从皮层、肌层到皮层细胞体,未见有明显的电子致密的胶体金颗粒分布。用特异性IgE抗体处理的样品上,胶体金颗粒分布较广泛,见于皮层、肌层、胞质、核膜和核质内。结论Sj43B基因编码蛋白在血吸虫成虫体内的分布无组织和亚细胞结构特异性。
- 蔡晓萍王勇苏川张兆松刘丰季旻珺吴观陵
- 关键词：免疫电镜
- 日本血吸虫热休克蛋白60 kDa的免疫原性及保护性研究被引量：1
- 2016年
- 目的研究日本血吸虫热休克蛋白60 kDa(SjHSP60)免疫原性,评价其免疫保护性及可能机制。方法通过在线生物信息学软件预测SjHSP60的B细胞表位,随后用SjHSP60免疫BALB/c小鼠后检测特异性抗体水平和淋巴细胞增殖以评估其免疫原性,进一步通过攻击感染实验观察其免疫保护效果;最后分选免疫小鼠的CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)与CD4^+CD25^-T细胞共培养,通过细胞增殖实验检测CD4^+CD25^+Treg细胞的抑制功能。结果生物信息学预测结果显示,SjHSP60中存在多个B细胞表位的优势区段。SjHSP60可在小鼠体内诱导特异性抗体(P<0.01),也可诱导小鼠脾细胞发生增殖(P<0.01)和分泌IFN-γ(P<0.01);但攻击感染实验显示,SjHSP60免疫小鼠体内虫荷(P>0.05)、卵荷(P>0.05)均未显著减少。体外共培养实验表明,SjHSP60可显著增强小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞的免疫抑制功能(P<0.01)。结论SjHSP60对宿主免疫系统可发挥"双刃剑"作用,即在诱导特异性抗感染免疫应答的同时又可增强免疫抑制功能,从而削弱了其免疫保护作用。
- 金鑫陈晓军朱继峰徐志鹏刘丰周莎苏川
- 关键词：日本血吸虫热休克蛋白60免疫保护性CD4^+CD25^+调节性T细胞
- 日本血吸虫40 kDa热休克蛋白对巨噬细胞活化的影响被引量：1
- 2012年
- 目的构建pGEX 6P 1 SjHSP40(SjHSP40)融合表达载体并在大肠埃希菌(Escherich coli)内进行原核表达及重组蛋白纯化,以探讨SjHSP40对巨噬细胞活化的影响。方法以PCR方法扩增SjHSP40基因片段,将其克隆入原核表达质粒pGEX 6P 1,经测序验证后转化入E.coli BL21(DE3)中。重组蛋白经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后以Glutathione Sepharose 4B亲和柱进行纯化。所得产物GST SjHSP40进行十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)、Westernblot鉴定。将此融合蛋白负载巨噬细胞48 h后,用流式细胞术检测巨噬细胞表面分子。结果测序结果表明,本研究成功构建了pGEX 6P 1 SjHSP40原核表达载体,经IPTG诱导表达出融合蛋白。Western blot显示该融合蛋白能被抗GST抗体特异性识别。与GST等对照组相比,此融合蛋白负载的巨噬细胞表面共刺激分子(CD40、CD80、CD86)及MHCⅡ分子表达显著上调。结论 SjHSP40可显著上调巨噬细胞表面共刺激分子(CD40、CD80、CD86)及MHCⅡ分子的表达,提示其可在一定程度上使巨噬细胞活化。
- 李莎莎徐湘婷刘玮徐志鹏张伟伟李永董潇潇杨晓玮刘丰王玥珠王升跃苏川
- 关键词：日本血吸虫热休克蛋白融合蛋白原核表达巨噬细胞活化
- 日本血吸虫22.6kDa膜相关蛋白Th1型表位的免疫学鉴定
- 2009年
- 目的鉴定日本血吸虫22.6 kDa膜蛋白（Sj22.6）的Th1型表位,为构建短肽疫苗奠定基础。方法采用合成肽Sj22.6-P4、无关肽（对照）及PBS免疫C57BL/6小鼠2次（间隔7 d）,末次免疫后7～10 d取脾分离单个核细胞,用合成肽Sj22.6-P4、无关肽及PBS刺激培养,3H-TdR掺入法检测淋巴细胞的增殖效果,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其细胞培养上清中IFNγ-、IL-4及IL-2水平。运用流式细胞技术三色标记法检测经合成肽Sj22.6-P4、无关肽及PBS免疫2次的C57BL/6小鼠脾淋巴细胞内的Th1、Th2细胞因子。结果合成肽Sj22.6-P4可刺激经该抗原肽免疫2次的C57BL/6小鼠淋巴细胞增殖,与PBS组相比,增殖指数（SI）均〉2。与无关肽对照组相比,细胞培养上清中IL-2、IFN-γ分泌水平增高,其中IL-2分泌水平差异有统计学意义（P〈0.05）,IFN-γ差异无统计学意义（P〉0.05）,而IL-4分泌水平明显降低（P〈0.05）。合成肽Sj22.6-P4免疫组小鼠脾脏CD4＋T细胞中分泌IFN-γ细胞的百分比显著增高,分泌IL-4细胞的百分比显著降低（P均〈0.05）。结论合成肽Sj22.6-P4是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位。
- 王慧陶方方孙新娟刘丰王勇苏川吴海玮张兆松
- 关键词：日本血吸虫免疫学鉴定
- 应用荧光探针DPH测定完整红细胞膜的流动性被引量：20
- 1996年
- 建立了应用荧光探针１，６－二苯基－１，３，５－己三烯（ＤＰＨ）测定完整红细胞膜流动性的方法。通过对ＤＰＨ与完整红细胞膜结合后的荧光光谱，以及邻苯三酚和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）对膜脂流动性影响的分析。
- 刘丰
- 关键词：DPH红细胞微粘度细胞膜荧光探针
