倪坚
- 作品数：10 被引量：26H指数：2
- 供职机构：绍兴文理学院生命科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学化学工程更多>>
- 对乙酰氨基酚耐受肝细胞株的建立及其作用机制研究被引量：1
- 2018年
- 对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)是引起急性肝衰竭最主要的原因,但其确切的作用机制仍不明了。该研究建立了不同浓度的APAP耐药肝细胞,并对其耐药机制进行初步研究。克隆状密度培养的AML-12小鼠肝细胞浓度递增诱导建立APAP耐药细胞系;细胞计数检测细胞增殖能力;Mito Tracker和H_2DCF-DA分别检测线粒体膜电位和氧自由基水平;GSH/GSSH检测细胞抗氧化能力;q PCR检测细胞基因表达水平;Western blot检测蛋白质水平。成功建立了增殖和耐药稳定的1.25和2.50 mmol/L APAP耐药AML-12肝细胞。在相应浓度APAP处理后,与对照组相比,耐药组细胞增殖能力强,氧自由基水平低,线粒体膜电位水平高,GSH/GSSH值高。进一步研究结果显示,耐受组细胞抗氧化通路Nrf2及其靶基因表达活性提高,而凋亡相关信号通路JNK及其相关基因活性下降。肝细胞表型特征分析显示,耐药组细胞肝功能相关基因表达水平并未发生显著变化,但与染色体重塑相关的转录因子Foxa1和Foxa2 m RNA和蛋白质水平显著升高。该研究建立了增殖和耐药性状稳定的APAP耐药肝细胞,耐药性状的获得与抗氧化能力和抗凋亡能力的提高相关,并提示染色体重塑相关转录因子也可能参与这一过程,为深入研究耐药机制奠定了基础。
- 曹欢欢茅育蕾陈娟慧陈佳媛郑锐攀岑梦娇倪坚金立方
- 关键词：肝细胞对乙酰氨基酚耐药
- Hedgehog信号通路对肝脏损伤修复作用的研究进展被引量：2
- 2019年
- Hedgehog(Hh)信号通路是胚胎发育的重要形态发生因子,在成体肝脏中活性处于抑制状态,但在多种类型的肝脏损伤中被重新激活。Hh信号通路参与肝脏损伤修复的多个环节,包括肝前体细胞的增殖分化,窦状隙内皮细胞的血管重塑,免疫细胞的炎症反应,以及肝星型细胞的激活和纤维化。该文就Hh信号通路介导的肝脏损伤修复作用进行概述,以期为推动肝脏疾病的治疗提供理论依据。
- 金立方倪坚闫俊艳韩继卫胡保卫
- 关键词：HEDGEHOG信号通路肝脏
- 杜鹃花菌根真菌454焦磷酸测序的样品制备
- 2014年
- 454焦磷酸测序已成为真菌群落结构研究的常用手段,文中对454焦磷酸测序的Barcoded PCR扩增中的模板质量浓度、Mg2+和引物浓度等反应条件进行了优化,并对扩增所得产物的特异性进行了鉴定;同时就不同Taq酶对测序结果的影响进行了讨论。结果表明:DNA模板经适度稀释能显著提高反应效率;Mg2+及引物浓度对扩增反应效率有影响,建议上下游引物浓度均为0.1μmol·L-1,Mg2+浓度可不做调整;使用特异性好、活性较强的Taq酶对保证扩增产物的真菌特异性至关重要,建议选用热启动Taq酶。
- 倪坚张艳华汤访评孙立夫裴克全薛煜
- 南美白对虾桃拉病毒和白斑病毒多重PCR检测方法
- 本发明公开了一种南美白对虾桃拉病毒和白斑病毒多重PCR检测方法，属于微生物检测方法技术领域。包括如下步骤：（1）样品采集；（2）TSV的DNA和WSSV的RNA的提取，以及WSSV的逆转录cRNA的合成；（3）TSV引物...
- 金立方余招锋倪坚
- 文献传递
- 一种兔骨髓间充质干细胞无血清培养方法
- 本发明涉及一种兔骨髓间充质干细胞无血清培养方法，属于干细胞培养技术领域。以MSCSFM为基础培养基，在该基础培养基中添加细胞外基质和细胞因子，将骨髓细胞悬液离心后，在上述培养基中，37℃情况下，以1x（乘号）10<Sup...
- 金立方倪坚
- 文献传递
- 白念珠菌CaCdc37的表达及功能分析
- 2006年
- CDC37基因编码的产物是一个参与蛋白激酶折叠成熟的分子伴侣蛋白,存在于多种真核生物中。在利用酵母双杂交系统筛选白念珠菌蛋白激酶Crk1相互作用蛋白时,获得一个CDC37同源基因。该基因编码区全长1524bp,编码一含508个氨基酸的蛋白质。其氨基酸序列与酿酒酵母Cdc37蛋白的序列同源性达41%。该基因在酿酒酵母中的表达能回复cdc37-1突变株的温度敏感表型,表明它能互补ScCDC37的功能。该基因命名为CaCDC37。Northern杂交显示,该基因在白念珠菌中呈组成型表达,转录水平不受形态转变和生长条件的影响;在crk1缺失株和CRK1高表达菌株中或者在cph1efg1双缺失株中,CaCDC37基因的转录水平没有明显变化。利用酵母双杂交系统分析CaCdc37与另外两个预测的白念珠菌分子伴侣蛋白CaSti1和CaHsp90的相互作用,结果表明CaCdc37能与CaSti1相互作用,而与CaHsp90的相互作用未能检测到。根据这些结果推测了CaCdc37可能的作用机制。
- 倪坚刘晓艳陈江野
- 关键词：白念珠菌分子伴侣
- 六价铬的细胞毒理效应及其机制研究进展被引量：21
- 2013年
- 六价铬[Cr(VI)]是一种普遍存在于土壤、大气与水环境中的污染物,可通过呼吸道、消化道及皮肤接触进入人体,产生直接或间接的毒性作用。该文着眼于近年来的研究进展,从Cr(VI)导致胞内活性氧累积效应、诱发细胞凋亡、导致细胞癌变、毒理效应的基因组学研究等几方面,论述了Cr(VI)对人体和动物的细胞毒理效应及其作用机制。随着研究的深入,从基因组水平研究Cr(VI)毒理效应成为新的热点。
- 金立方袁翊朦胡祎瑞倪坚
- 关键词：六价铬活性氧凋亡癌变
- 《动物细胞工程》教学模式改革与探索被引量：2
- 2014年
- 《动物细胞工程》是一门实践性和应用性的学科，学好《动物细胞工程》的理论与实验知识和技能，可切实满足学生今后工作需要或相关科研工作的开展，符合应用型人才的培养目标。但是，该门课程仍存在一些问题需要进一步探索解决。1．课程内容多，但课时少。2．实验课设置不合理：实验课设置不具有系统性，
- 金立方倪坚
- 关键词：细胞工程教学模式改革应用型人才课程内容实验课
- 胆管上皮细胞的高效扩增和培养方法
- 本发明公开了一种兔肝内的胆管上皮细胞的高效扩增和培养方法，属于生物医药技术领域。包括如下步骤：（1）上皮细胞分离，纯化，培养；（2）细胞生长线测定；（3）鉴定。本发明胆管上皮细胞的高效扩增和培养方法通过多步分离方法获得纯...
- 金立方倪坚
- 文献传递
- 白念珠菌细胞凋亡促进因子基因及其用途
- 本发明公开了一种白念珠菌细胞凋亡促进因子基因<I>CaWWM1</I>及其用途，属于生物医药技术领域。包括提供了一种新的细胞凋亡调控因子-CaWwm1蛋白，编码CaWwm1蛋白的多核苷酸和经重组技术产生这种CaWwm1蛋...
- 倪坚尹军霞金立方弭忠祥
- 文献传递
