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侯俊: 作品数：106 被引量：231H指数：7; 供职机构：解放军第三〇二医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金军队“十一五”科技攻关课题首都医学发展科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学理学冶金工程更多>>

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永生化人肝细胞的初步研究：hTERT真核表达质粒的构建和鉴定: 目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)真核表达质粒,为 hTERT 稳定转染细胞提供简单、快速的检测方法,并为建立永生化人肝细胞系奠定基础。方法:PCR 扩增 hTERT 基因和绿色荧光蛋白(GFP)基因, 利用基因重...; 赵擎孙颖胡燕侯俊游绍莉赵军辛绍杰貌盼勇; 关键词：人端粒酶逆转录酶质粒构建真核表达; 文献传递

HCV特异性IgM抗体与HCV RNA及其与肝病活动的相关性研究: 2000年; 侯俊何红霞貌盼勇洪世雯杨松涛付体权; 关键词：肝疾病丙型肝炎病毒 RNA

HIV核心抗原p24原核系统的高效表达、纯化及活性鉴定被引量：2: 2005年; 目的　在原核表达系统中对HIVp2 4抗原基因进行克隆和高效表达、纯化并鉴定其活性。方法　利用PCR技术从HIV-1全基因质粒 (B2N)中扩增p2 4抗原基因 ,并克隆入T载体中。通过酶切消化后连接到表达载体pRSET上 ,用此连接产物转化大肠埃希菌BL2 1,经IPTG诱导 ,表达p2 4抗原。利用固定化金属离子 (Ni2 + )配体亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白。并运用双酶切技术、SDS-PAGE电泳、WesternBlot(WB)及ELISA法分别对插入基因片段的正确性、表达产物的活性及特异性进行检测。结果　PCR产物约为 6 90bp ,与预期p2 4抗原全基因片段大小一致。重组质粒T-p2 4和pRSET-p2 4经BamHⅠ和HindⅢ双酶切 ,其插入的外源基因片段均为 6 90bp。将纯化前与纯化后的蛋白作SDS PAGE电泳 ,均可见一条约 2 4× 10 3的外源基因表达带 ,与计算的相对分子质量相符。经WB和ELISA试验 ,证明基因工程表达的p2 4抗原具有较高的特异性及活性。结论　成功构建了HIVp2 4表达载体pRSET-p2 4 ,并在原核细胞中高效表达。; 侯俊貌盼勇洪世雯胡燕杨健洋沈宏辉朱雷; 关键词：HIV 核心抗原纯化原核系统外源基因表达

包涵体蛋白3种纯化方法的比较被引量：9: 2016年; 目的比较3种纯化方法对表达的肠道病毒71型(EV71)VP1区包涵体蛋白的纯化效果。方法分别用差速离心法、固定化金属离子亲和层析(IMAC)及不同浓度饱和硫酸氨沉淀法3种包涵体蛋白纯化法对原核表达EV71 VP1包涵体蛋白进行纯化,蛋白垂直(SDS-PAGE)电泳检测蛋白纯化效果。结果差速离心法可以进行大批量表达蛋白纯化,纯化效果较好,但存在蛋白损失较多,且纯化蛋白不能反复冻融的问题。IMAC柱纯化获得的蛋白纯度较高,且蛋白性状稳定,但仍存在纯化蛋白量较少的问题。饱和硫酸氨沉淀纯化法无法获得纯度较高的包涵体蛋白。结论差速离心法可用于大批量蛋白纯化,纯化蛋白应避免反复冻融,可小量分装冻存后备用。IMAC柱纯化可获得纯度较高且性状相对稳定的纯化蛋白,其在相应抗体检测方法学的建立及疫苗制备方面均有广泛用途。饱和硫酸氨法只适用于表达蛋白的初步浓缩纯化。; 柴燕涛姜棋予谢国明胡燕邬顺全杨锐创貌盼勇侯俊; 关键词：包涵体蛋白蛋白纯化

箱式多功能飞机加油设备: 本发明涉及的一种箱式多功能飞机加油设备，其特征在于：包括一可开启式箱体、设置在同一箱体内由计量仪表和实现输油的管路阀门系统构成的两套输油加油机构：四通道重力加油机构和两通道隐蔽型伸缩加油机构。该箱式多功能飞机加油设备，不...; 易自强侯俊刘双云黄明香

双抗原夹心法检测抗HIV-1/2总抗体方法的建立和评价被引量：11: 2002年; 目的　进一步提高HIV感染诊断试剂的敏感性。方法　以人工合成的HIV 1gp4 1.1(sp1)、gp4 1.2 (sp2 )、gp12 0 (sp3)、p2 4 (sp4 )和HIV 2gp36 (sp5 ) 5条多肽 ,采用双抗原夹心酶链免疫吸附试验 (ELISA)原理 ,以sp1、sp3、sp4和sp5混合包被酶标板作为固相抗原 ,辣根过氧化物酶标记sp1、sp2、sp4和sp5多肽为标记物 ,建立了检测抗HIV 1 2总抗体的双抗原夹心ELISA法。结果　检测卫生部药品生物制品检定所第 2代 4 0份质控参比血清 ,其特异性和灵敏度均为 10 0 % ,高于间接ELISA法(特异性为 90 % ,灵敏度为 6 5 % )。检测 2 10份其他病种患者血清均为阴性 ,与雅培HIVAB试剂比较检测 90份健康献血员血清和 88份HIV感染者血清 ,符合率为 10 0 %。结论　本方法特异性强、敏感性高 ,操作简便 ,适用于献血员的筛选和临床HIV感染的检测。; 何红霞貌盼勇侯俊洪世雯朱雷胡燕白雁平; 关键词：HIV感染双抗原夹心法

人源单克隆抗人免疫缺陷病毒1型抗体Fab段基因的获得被引量：2: 2000年; 应用噬菌体抗体库技术有效地筛选出了多株抗HIV 1人源单克隆抗体。以逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)从HIV 1感染者外周血淋巴细胞中扩增抗体轻重链可变区基因 ,插入载体 pCOMB3 ,建立噬菌体抗体库。分别以HIV 1gp41、gp12 0和 gp16 0为固相抗原 ,经过多轮筛选 ,从中获得了多株抗HIV 1gp41、gp12 0和 gp16 0的单克隆抗体Fab段基因。抗HIV特异性噬菌体抗体随抗体库的筛选高度富集 ,抗gp41阳性克隆率由第 2轮的 5 %增加到第6轮的 87%。间接ELISA、竞争抑制ELISA和Dotblot检测结果表明 ,获得的抗HIV 1噬菌体抗体具有较高抗原结合活性和特异性。研究结果显示 :应用该技术获得人源抗病毒基因工程单克隆抗体既省时省力 ,又可获得任意目的单抗基因 ,且易获得高亲和力的抗体。; 何红霞貌盼勇侯俊朱雷洪世雯王琰; 关键词：噬菌体抗体库人源单克隆抗体

高尔基体蛋白73在原发性肝癌预后判断中的应用价值被引量：5: 2014年; 目的探讨血清高尔基体蛋白73（GP73）在原发性肝癌预后判断中的价值.方法用酶联免疫吸附试验定量检测血清GP73,分别测定63例原发性肝癌患者术前、术后（2周、4周）以及术后3 ～12个月复发的21例重新入院患者的GP73的浓度.结果原发性肝癌患者术前GP73平均水平为240.5±81.4 ng/ml,手术治疗后2周GP73平均浓度为114.4±34.1 ng/ml,治疗后4周平均浓度为57.6±23.3 ng/ml,治疗前浓度显著高于治疗后浓度（P＜0.05）.肝癌复发的患者重入院后GP73浓度（181.2±72.4 ng/ml）明显高于GP73.术后的浓度（P＜0.05）.结论 GP73作为一个新型肝癌血清标记物在判断肝癌预后中具有较好的应用价值.; 刘爱霞刘佳戴亮王卫东赵静陈霖徐军侯俊李伯安; 关键词：高尔基体预后肝肿瘤