黄亚非
- 作品数：24 被引量：107H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 湖北汉族人群甘露糖结合凝集素基因外显子1多态性与SLE关联性的研究
- 目的:分析湖北汉族人群甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin或mannose-binding protein,MBL或MBP)基因外显子1多态性,探讨其与系统性红斑狼疮(systemic lupu...
- 黄亚非韩军艳张胜桃吴雄文龚非力
- 文献传递
- Epstein-Barr病毒相关疾病的研究现状被引量：37
- 2006年
- 自1964年Epstein和Barr在研究非洲儿童恶性淋巴瘤时发现EB病毒以来,人类对EB病毒的研究不断深入,对其特性有了一定的认识,发现其与多种疾病有关,如鼻咽癌、淋巴瘤、传染性单核细胞增多症等,特别是EB病毒的分子生物学特性、EB病毒抗原所引起的免疫应答与免疫逃避在疾病中的发生发展中发挥着重要的作用,而且EB病毒在不同疾病中的感染类型及发病机理也不完全相同,因而对其致病机制进行深入地探讨很有意义。
- 戚东桂刘荣韩军艳黄亚非
- 关键词：EB病毒淋巴瘤鼻咽癌
- 可溶性HLA-A2-肽复合物的体外折叠与生物素化被引量：11
- 2004年
- 目的 :可溶性HLA A2 抗原肽复合物的体外折叠复性与生物素化。方法 :原核高效表达的HLAH链及 β2m,在抗原肽 (EB病毒的膜潜伏蛋白LMP2A的NH2 CLGGLLTMV COOH残基 )的存在下 ,通过稀释复性折叠成HLA A2 抗原肽复合物 ,并在BirA酶的作用下进行生物素化 ,使生物素结合到HLA A2 抗原肽复合物中的H链C端。利用特异性抗体 (mAbW6 / 32和兔抗人 β2m抗体 )及链霉亲合素进行ELISA和Westernblot,检测稀释复性和生物素化的折叠产物。结果 :折叠复合物中 ,主要含有HLAH链聚合体、HLA A2 肽复合物单体及 β2m3种成分 ,其中H链聚合体与HLA A2单体可生物素化。结论 :成功地获得生物素化的HLA A2 抗原肽复合物单体 ,为进一步构建四聚体及制备人工抗原提呈细胞奠定了基础 ,也为过程复杂的HLA
- 翁秀芳陈浩吴雄文梁智辉韩军艳黄亚非龚非力
- 关键词：生物素化
- 卵巢癌细胞诱导的CD8^+ T细胞凋亡与Caspase-3活性及细胞内钙的关系
- 2007年
- 目的探讨卵巢癌细胞诱导CD8+T细胞发生凋亡,及Caspase-3与细胞内游离钙离子在CD8+T细胞凋亡过程中的作用。方法分别采用透射电镜、流式细胞术观察3株卵巢癌细胞(OVCAR3、CAOV3和SKOV3)的培养上清液诱导的CD8+T细胞凋亡和细胞周期变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法和比色法检测CD8+T细胞Caspase-3mRNA的表达和Caspase-3活性;Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)。结果经3株卵巢癌细胞的培养上清液分别作用后,CD8+T细胞被阻滞在G1/G0期,电镜下出现典型的凋亡改变,流式细胞仪检测见凋亡峰,细胞凋亡率增高;CD8+T细胞凋亡过程中Caspase-3mRNA的表达水平、Caspase-3的活性和[Ca2+]i均明显升高。结论卵巢癌细胞能诱导CD8+T细胞凋亡,Caspase-3激活及细胞内钙超载在此过程中起重要作用。
- 汪辉黄亚非李天李晓程琪谢幸
- 关键词：卵巢癌细胞凋亡
- 人β_2m基因的克隆及表达被引量：8
- 2004年
- 目的 克隆和表达HLA I类分子轻链(β2m)基因,为人工制备HLA I类分子提供基础。方法 利用逆转录PCR技术从Jeg-3细胞株中克隆β2m基因,与质粒pET22b(+)重组,构建原核表达载体pET22b(+)-β2m,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),诱导β2m基因高效表达,并采用双抗体夹心ELISA法对表达产物进行抗原性和功能鉴定。结果 酶切和测序证实β2m基因克隆和载体构建成功,目的蛋白在宿主菌中高效表达于包涵体中;通过包涵体的分离和纯化获得初步纯化的β2m,所制备的β2m能够与特异性抗体结合,并能与HLA I类分子重链形成具有天然构象的HLA I类分子。结论 人β2m基因能够在原核宿主中高效表达,表达产物具有形成HLA I类分子的功能。
- 陈浩翁秀芳吴雄文梁智辉韩军艳黄亚非龚非力
- 关键词：克隆
- 卵巢癌细胞对CD8^+ T细胞活化分子CD69表达的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨卵巢癌细胞对CD8+T细胞活化分子CD69表达的影响。方法:采用流式细胞术检测3株卵巢癌细胞(OVCAR3、CAOV3和SKOV3)培养上清液对CD8+T细胞表达早期活化分子CD69表达的百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD8+T细胞分泌的细胞因子IFN-γ的水平。结果:与对照组比较,3株卵巢癌细胞培养上清液可对CD8+T细胞CD69的表达产生明显的抑制作用(F=29.90,P<0.01),CD8+T细胞分泌的细胞因子IFN-γ水平显著降低(F=16.31,P<0.01)。结论:卵巢癌细胞早期就能抑制CD8+T细胞的活化,CD69可作为评价免疫效应细胞功能的指标。
- 汪辉黄亚非李天李晓程琪谢幸
- 关键词：卵巢癌CD69活化
- 卵巢癌细胞对CD8^＋T细胞ζ链表达及分泌Tc1／Tc2型细胞因子的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:通过研究卵巢癌细胞对CD8+ T细胞ζ链表达及分泌Tc1/Tc2型细胞因子影响,探讨其在卵巢癌免疫抑制中的作用。方法:Western印迹方法检测3株卵巢癌细胞(OVCAR3、CAOV3和SKOV3)培养上清液作用后CD8+ T细胞ζ链蛋白的表达;分别采用MTT、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察卵巢癌细胞培养上清液对CD8+ T细胞增殖和分泌Tc1/Tc2型细胞因子的影响。结果:(1)与对照组比较,OVCAR3、CAOV3和SK-OV3细胞培养上清液均能抑制CD8+ T细胞中ζ链的表达,ζ链蛋白平均吸光度值分别为(0.346±0.004;0.349±0.007;0.387±0.011;0.616±0.013);(2)3株卵巢癌细胞培养上清液皆抑制CD8+ T细胞增殖,分泌的Tc1细胞因子IFN-γ显著降低,而Tc2细胞因子IL-10显著增高。结论:卵巢癌细胞源性的免疫抑制因子通过下调CD8+ T细胞ζ链的表达,从而抑制其增殖并导致Tc1/Tc2细胞因子分泌失衡,这可能是卵巢癌诱导腹腔免疫抑制的机制之一。
- 汪辉黄亚非李天李晓程琪谢幸
- 关键词：卵巢肿瘤免疫抑制CD8^+T细胞
- 两种小鼠异位心脏移植模型的建立和比较
- 目的:比较了腹部和颈部小鼠心脏移植模型的优缺点,探讨二次器官移植或双心脏移植研究的可行性和实用性动物模型。方法:参照Corry法和Chen法并加以改进,建立了同系或者同种小鼠腹部和颈部异位心脏移植模型,同
- 尹辉黄亚非黄保军陈孝平陈义发龚非力
- 关键词：心脏移植动物模型小鼠
- 文献传递
- 可溶性HLA-G1对活化T细胞凋亡及FasL表达影响的研究
- 目的:探讨可溶性HLA—G1对活化的T细胞FasL表达及凋亡的影响。方法:借助基因工技术构建表达可溶性HLA-G1的真核表达质粒;把重组质粒转染入宿主细胞,表达可溶性HLA-G1并借助免疫亲和层析技术纯化可溶性HLA-G...
- 房崇芸翁秀芳吴雄文梁智辉陈浩韩军艳黄亚非龚非力
- 文献传递
- 可溶性HLA-G1抗原肽复合物的体外折叠及其功能研究被引量：6
- 2005年
- 目的:体外折叠形成可溶性HLA G1抗原肽复合物,并研究其生物学功能。方法:以原核表达的可溶性HLA-G1的重链及轻链β2m,与人工合成的抗原九肽体外进行共折叠复性。将折叠产物通过SephadexG75层析柱纯化,经Westernblot进行构象鉴定。探讨可溶性HLA-G1分子对NK细胞杀伤活性的影响,对混合淋巴细胞培养中T细胞增殖的影响,以及对活化T细胞凋亡的影响。结果:折叠产物可与mAbW6/32特异性结合,在Westernblot的鉴定中呈阳性反应。可溶性HLA-G1可有效地抑制NK细胞的细胞毒作用,抑制混合淋巴细胞培养中T细胞的增殖,促进活化T细胞发生凋亡。结论:体外折叠成功地形成可溶性HLA-G1抗原肽复合物,该复合物具有抑制NK细胞和T细胞的活性。
- 杨敬宁吴雄文梁智辉韩军艳黄亚非龚非力
- 关键词：细胞毒作用增殖凋亡
