马震宇
- 作品数:12 被引量:16H指数:2
- 供职机构:苏州大学医学部基础医学与生物科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目国防基础科研计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 一株新的鼠抗人2IgB7-H3功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定被引量:4
- 2006年
- 研制功能性鼠抗人2IgB7-H3单克隆抗体。以人2IgB7-H3基因转染细胞1.929/2IGB7-H3为免疫原,常规免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠;利用B淋巴杂交瘤技术,将免疫小鼠脾脏细胞和骨髓瘤细胞株SP2/0融合,1.929/2IGB7-H3细胞为抗原筛选阳性细胞;经间接免疫荧光标记法对杂交瘤细胞进行反复筛选和多次克隆化培养;采用快速定性试纸法鉴定单抗Ig亚类;利用竞争抑制性实验分析该单抗识别的抗原表位;采用MTT法分析该单抗在体外阻断DC对T细胞的促增殖效应。结果:获得了1株持续稳定分泌鼠抗人2IgB7-H3单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为7D7),该单抗可特异识别1.929/2IGB7-H3分子和介导有效的共刺激信号。该单抗的成功获得和其生物学特性的初步鉴定,为进一步研究B7-H3两个异构体在DC细胞及肿瘤细胞上的作用机制奠定了物质基础。
- 饶爱华周迎会陈永井马震宇张学光
- 关键词:单克隆抗体共刺激信号杂交瘤细胞株
- 电子射线局部辐照大鼠Ⅰ/Ⅲ型胶原表达及基质金属蛋白酶改变的研究被引量:2
- 2006年
- 目的探讨电子射线(模拟β射线)局部辐照大鼠致放射损伤后胶原表达及相关基质金属蛋白酶(MMPs)变化的情况。方法采用直线加速器局部照射制作SD大鼠的辐射损伤模型,观察Ⅰ/Ⅲ型胶原表达及MMP1、MMP2、MMP9表达的变化情况。结果β射线照射引起的皮肤损伤可以引起胶原含量和分型的改变,MMP-1有不同程度的提高,MMP2与MMP9的表达随辐射剂量的增加,由强变弱再上升变强。结论β射线照射皮肤损伤引起的创面难愈合可能与胶原含量和结构的改变相关,其又与胶原的降解酶MMP1活性增强有关;MMP2与MMP9参加基底膜的溶解、血管形成和坏死组织的清除,有助于创面的重建,促进创面的愈合。
- 周迎会仇灏徐岚姜智孙其昌马震宇吴士良
- 关键词:胶原表达基质金属蛋白酶
- 转染人4IgB7-H3细胞株对T细胞的促增殖作用
- 目的:B7-H3为B7家族的新成员,在鼠中只发现存在2IgB7-H3,而在人类中除了2IgB7-H3,还存在具有两个IgV-IgC样区的4IgB7-H3。RT-PCR的结果显示4IgB7-H3有着广泛的表达,而在人的TH...
- 马震宇周迎会陈永井张光波费敏谢芳王雪峰王勤马珍妮张学光
- 关键词:基因转染T细胞增殖
- 文献传递
- 人类多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶2抗原表位分析、抗体制备及亚细胞定位
- 为了研究人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)蛋白表达的亚细胞结构定位,制备特异性抗体。我们联合应用了多种方法对多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2的二级结构和表面特性进行了细致地分析,发现其优势抗原...
- 杭赛宇胡鹤娟朱燕马震宇闫石吴士良
- 关键词:多肽抗原表位抗体亚细胞定位
- 文献传递
- 人4IgB7-H3-Fc融合蛋白的制备及其对T细胞的共刺激作用
- 目的:作为新的共刺激分子,B7-H3从发现至今已有不少相关的报道。在最初的研究中,B7-H3被认为是一正性调控分子,但随着研究的深入,又有学者提出鼠B7-H3信号对T细胞介导的免疫应答以负性调控为主,同时下调IL-2的表...
- 周迎会马震宇陈永井马珍妮王勤王雪峰马泓冰谢芳张学光
- 关键词:基因转染融合蛋白共刺激
- 文献传递
- 共刺激分子B7-H3与糖基化相关性的初步探讨被引量:6
- 2006年
- 目的:探讨共刺激分子B7-H3与N-乙酰氨基半乳糖转移酶之间的相关性。方法:采用RT-PCR的方法检测同一细胞系上B7-H3和N-乙酰氨基半乳糖转移酶(T1-T7)的表达,从而探讨它们之间可能的相关性。结果:成功地检测到了B7-H3与N-乙酰氨基半乳糖转移酶(T1-T7)表达的差异性和一致性。结论:共刺激分子B7-H3和N-乙酰氨基半乳糖转移酶(T1-T7)在T1、T2存在可能的结合点,为进一步的研究提供了线索。
- 蒲仁芳马震宇杭赛宇周迎会吴士良
- 关键词:B7-H3
- 抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建及瞬时表达被引量:2
- 2007年
- 目的构建及瞬时表达抗人CD28鼠-人嵌合抗体。方法采用基因工程技术,从分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:2F5)中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列。分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构建含有重组基因的pIRES表达质粒pIRES/h2F5。转染293T细胞并用抗性药物G418选择培养。采用流式细胞术,检测瞬时转染细胞后嵌合抗体的表达情况。结果抗人CD28鼠人嵌合抗体得到表达并能与CD28分子特异性结合。结论抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建和瞬时表达是成功的,为后续构建稳定分泌抗人CD28鼠-人嵌合抗体的CHO基因转染细胞株奠定了基础。
- 程钢陈永井马震宇费敏孙中文徐耀瑜胡玲玲邱玉华
- 关键词:CD28单克隆抗体嵌合抗体
- 甲氧雌二醇抑制大肠癌肝转移的实验研究
- 第一部分大肠癌肝转移模型建立的方法学改进
目的:建立模拟临床大肠癌根治术后肝转移动物模型,并探讨模型建立方法的改进。方法:在裸鼠脾脏内注入人结肠癌细胞5min后切除脾脏。术后分别于20、35、60天对裸鼠行病理...
- 马震宇
- 关键词:肝转移血管生成抑制剂肿瘤转移放射增敏大肠癌
- 文献传递
- 人4IgB7-H3-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究被引量:1
- 2007年
- 为获得人4IgB7-H3-Fc融合蛋白,研究其对T细胞的共刺激作用,采用PCR技术分别从pMD18-T/4IgB7-H3和pMD18-T/hIgG1(Fc)重组载体中扩增出人4IgB7-H3胞外段基因和人IgG1重链Fc恒定区基因,通过RT-PCR技术插入逆转录病毒载体pGEZ-Term,重组逆转录病毒载体与两个辅助病毒载体经脂质体法共转染包装细胞293T,收集含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清反复感染L929细胞,利用Zeocin筛选获得能稳定分泌4IgB7-H3-Fc融合蛋白的基因转染细胞。基因转染细胞经无血清培养后,收集的上清用Dot blot检测,超滤浓缩并经Protein G柱纯化,再用SDS-PAGE、Western blot鉴定。以4IgB7-H3-Fc蛋白检测活化T细胞表面未知受体的表达,通过MTT方法分析4IgB7-H3-Fc融合蛋白对T细胞的共刺激作用。结果显示,成功地构建了pEGZ-Term/4IgB7-H3-Fc重组逆转录病毒载体,经转染包装细胞293T后,筛选获得能稳定分泌4IgB7-H3-Fc蛋白的L929基因转染细胞株;纯化后的4IgB7-H3-Fc蛋白能够与活化T细胞表面结合,并对T细胞有显著的促增殖作用。为探讨人4IgB7-H3-Fc融合蛋白对T细胞的共刺激作用和寻找其未知受体奠定良好的物质基础。
- 马震宇周迎会陈永井费敏马珍妮王勤王雪峰马泓冰谢芳张学光
- 关键词:融合蛋白共刺激
- 人类β1,3半乳糖基转移酶7对人4IgB7-H3的修饰作用初探
- 2008年
- 目的:探讨人4IgB7-H3基因转染人胃癌细胞株SGC7901后人类β1,3半乳糖基转移酶7(β1,3-galacto-syltransferase 7,β3GalT7)的表达变化,以期发现4IgB7-H3与β3GalT7的相互关系。方法:脂质体介导重组逆转录病毒载体pEGZ-Term/4IgB7-H3转染SGC7901细胞,筛选获得稳定表达4IgB7-H3的亚克隆细胞株,通过RT-PCR和蛋白质印迹方法检测β3GalT7的表达。结果:成功获得稳定表达4IgB7-H3的亚克隆细胞株SGC7901/4IgB7-H3;β3GalT7随4IgB7-H3的表达上调而上调。结论:4IgB7-H3蛋白的修饰成熟可能需要β3GalT7的作用。
- 唐春花马震宇岳爱环行书丽蒋俊华张昊曹静媛周迎会吴士良
- 关键词:SGC7901转染